一种大肠杆菌β半乳糖苷酶受体的制备方法技术

本申请涉及一种大肠杆菌β半乳糖苷酶受体的制备方法。本申请提供了一种SEQ ID NO：1所示的编码β半乳糖苷酶受体的核苷酸，以及SEQ ID NO：2所示的β半乳糖苷酶受体。根据大肠杆菌β半乳糖苷酶结构和功能，以及酶供体和酶受体的互补原理，设计了删除第13至33位氨基酸的酶受体；将酶受体的编码核苷酸与载体连接，并转化至大肠杆菌构建重组表达宿主细胞；通过发酵大量表达酶受体；通过亲和层析技术对酶受体纯化，脱盐后的酶受体纯度在90％以上。与常规酶受体相比，本申请的酶受体产量更高、互补活性更强，可应用于CEDIA生化诊断试剂的研制。

【技术实现步骤摘要】
一种大肠杆菌β半乳糖苷酶受体的制备方法本申请是申请号为201610841474.8，申请日为2016年9月22日，专利技术名称为“一种大肠杆菌β半乳糖苷酶受体及其制备方法”的中国专利申请的分案申请。
本申请涉及生物
，更具体地涉及克隆酶供体免疫分析技术。本申请提供了一种大肠杆菌β半乳糖苷酶的酶受体，其编码核酸、表达载体、宿主细胞及制备方法。
技术介绍
大肠杆菌β半乳糖苷酶(GenBank:EDU66561.1)可以通过溴化氢CNBr2裂解或者基因重组技术得到两个肽段：缺失N端少量氨基酸的大片段，称为酶受体(Enzymeacceptor，EA)：缺失大部分C端氨基酸的小片段，称为酶供体(Enzymedonor，ED)。二者单独存在没有酶活性，同时存在时二者可以聚合，形成具有酶活性的全酶，这一现象被定义为α-互补。大肠杆菌β半乳糖苷酶的这种特性已被应用于分子生物学和克隆酶供体免疫分析技术(ClonedEnzymeDonorImmunoassay，CEDIA)中。CEDIA技术在临床生化诊断中可以检测小分子化合物。CEDIA是一种免疫检测技术，其结合了β半乳糖苷酶α互补原理和抗原抗体本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种制备β半乳糖苷酶受体的方法，包括步骤：‑在允许β半乳糖苷酶受体进行表达的条件下，培养原核宿主细胞；和‑纯化并收集所述β半乳糖苷酶受体；其中所述β半乳糖苷酶受体是SEQ ID No.2所示。

【技术特征摘要】
1.一种制备β半乳糖苷酶受体的方法，包括步骤：-在允许β半乳糖苷酶受体进行表达的条件下，培养原核宿主细胞；和-纯化并收集所述β半乳糖苷酶受体；其中所述β半乳糖苷酶受体是SEQIDNo.2所示。2.根据权利要求1所述的方法，其中：所述培养在28至40℃，优选30至40℃、更优选35至38℃，最优选37℃的温度中进行；所述培养在需氧条件下进行，优选在溶氧大于40％的条件下进行；所述培养在pH值6.8至7.2的条件下进行。3.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：王贵利，高秋峰，龚俊，刘希，
申请(专利权)人：北京九强生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11