一种基于金纳米簇锚定羟基氧化钴纳米片的吡虫啉荧光免疫分析方法技术

本发明专利技术公开了一种基于金纳米簇锚定羟基氧化钴纳米片的吡虫啉荧光免疫分析方法，属于生物传感器技术领域，本发明专利技术通过金纳米簇锚定在二维羟基氧化钴纳米片表面，形成纳米复合材料，导致荧光强度显著降低。通过引入能够触发CoOOH纳米片分解的抗坏血酸，可有效逆转猝灭效应。值得注意的是，抗坏血酸诱导的相应荧光反应与抗体标记的ALP活性有关。经过竞争免疫反应后，ALP标记的抗体可与固定化抗原相结合，可调节检测平台的荧光变化。利用系统的荧光切换，FIA对吡虫啉的检测浓度(IC50)为1.3ng mL

Imidacloprid fluorescence immunoassay based on gold nanocluster anchored cobalt hydroxide nanotablets

The invention discloses a fluorescence immunoassay method for imidacloprid based on gold nanoclusters anchored cobalt hydroxide nanosheets, belonging to the field of biosensor technology. The method forms nanocomposites by anchoring gold nanoclusters on the surface of two-dimensional cobalt hydroxide nanosheets, resulting in significant reduction of fluorescence intensity. The quenching effect can be effectively reversed by introducing ascorbic acid, which can trigger the decomposition of CoOOH nanosheets. It is worth noting that the corresponding fluorescence reaction induced by ascorbic acid is related to the activity of antibody-labeled ALP. After competitive immune response, ALP-labeled antibodies can be combined with immobilized antigens to adjust the fluorescence changes of the detection platform. The detection concentration of imidacloprid (IC50) by FIA was 1.3ng mL by fluorescence switching of the system.

【技术实现步骤摘要】
一种基于金纳米簇锚定羟基氧化钴纳米片的吡虫啉荧光免疫分析方法
本专利技术属于生物传感器
，具体涉及一种基于金纳米簇锚定羟基氧化钴纳米片(CoOOHNPs)复合材料的制备方法，并巧妙建立碱性磷酸酶(ALP)介导的吡虫啉荧光免疫检测分析方法。
技术介绍
现今，农药污染已成为一个世界性的公共卫生问题，其暴发不仅造成巨大的经济损失，还会严重危害人类生命安全。吡虫啉(Imidacloprid)作为一种触杀型烟碱类农药，作用于突触后的烟碱乙酰胆碱受体引起中枢神经正常传导受阻，使害虫麻痹死亡。同样，残留在农产品和环境样品中吡虫啉对动物和人类的神经受体也存在危害，甚者可能损害人体外周血淋巴细胞的DNA，在微量水平即可对人体健康造成巨大危险。因此，对食品和环境基质中的吡虫啉进行灵敏分析，对于满足食品安全需求、保护生态系统和保障人类健康具有重要意义。目前成熟的吡虫啉检测方法(高效液相色谱、液-质联用色谱、气相色谱法和气-质联用色谱)虽然可达到较高灵敏度，但是仪器检测存在操作复杂、成本高昂、稳定性差、检测步骤多等缺点，无法实现复杂样品中吡虫啉的大批量快速灵敏检测。基于特异性抗体-抗原识别的免疫分析，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于金纳米簇锚定羟基氧化钴纳米片的吡虫啉荧光免疫分析方法，其特征在于，其步骤如下：A、羟基氧化钴纳米片(CoOOH NPs)的制备：首先制备CoOOH纳米片，将KOH和CoCl2按体积比1:4混合，然后超声1‑5min；将NaClO相比上述混合液体积比1:55加入上述溶液中，继续超声10‑15min，然后10000rpm离心10‑15min，收集CoOOH NPs产物；去离子水洗涤三次，冷冻干燥得到的CoOOH NPs黑色粉末；最后，将CoOOH NPs用去离子水溶解稀释至0.025mg mL‑1备用；B、谷胱甘肽功能化的金纳米簇AuNCs制备：将HuCl4和GSH按照体积比1:4混合...

【技术特征摘要】
1.一种基于金纳米簇锚定羟基氧化钴纳米片的吡虫啉荧光免疫分析方法，其特征在于，其步骤如下：A、羟基氧化钴纳米片(CoOOHNPs)的制备：首先制备CoOOH纳米片，将KOH和CoCl2按体积比1:4混合，然后超声1-5min；将NaClO相比上述混合液体积比1:55加入上述溶液中，继续超声10-15min，然后10000rpm离心10-15min，收集CoOOHNPs产物；去离子水洗涤三次，冷冻干燥得到的CoOOHNPs黑色粉末；最后，将CoOOHNPs用去离子水溶解稀释至0.025mgmL-1备用；B、谷胱甘肽功能化的金纳米簇AuNCs制备：将HuCl4和GSH按照体积比1:4混合，在1500r/min磁力搅拌过程中加入8倍体积的超纯水；然后，将上述混合物加热到70-80℃反应24小时以上，即可获得黄色AuNCs溶液，通过透析进行纯化，并通过冷冻抽干获得黄色AuNCs粉末，最后超纯水溶解稀释至0.20mgmL-1备用；C、CoOOH-AuNCs复合材料的制备：将步骤一的CoOOHNPs溶液和步骤B制备的AuNCs溶液等体积混合，并超声处理10-15分钟，然后将混合溶液在10000rpm下离心10-15分钟，10mL去离子水溶解沉淀，得到CoOHO-AuNCs复合材料溶液；D、吡虫啉的荧光免疫分析...

【专利技术属性】
技术研发人员：卢革宇，闫旭，李红霞，金蕊，孙鹏，刘方猛，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：吉林,22