【技术实现步骤摘要】
一种草莓ABA降解途径关键酶FveCYP707A4a基因及其应用
本专利技术涉及植物生物
,特别是一种草莓ABA降解途径关键酶FveCYP707A4a基因及其应用。
技术介绍
草莓(FragariaXananassa)属蔷薇科草莓属植物,是重要的鲜食水果作物之一,也是蔷薇科植物重要的功能基因研究的模式物种,其果实发育相关的遗传和分子生物学研究越来越受到关注GiovannoniJamesJ..2004。其中,植物激素的调控对于果实发育和品质形成至为关键(钟晓红,2004)。植物激素脱落酸(ABA)不仅能促进草莓果实对糖的吸收,而且在草莓果实成熟调控过程中发挥重要的作用。ABA在其他非呼吸跃变型果实中也起着核心作用,比如在樱桃果实成熟过程中,ABA参与了果实的生长发育与成熟;柑橘成熟过程中积累了大量的ABA;并且越来越多的研究也表明,ABA参与果实发育和成熟过程的调控(KanoY,1981,JohnOA1994,JiangYM2003,钟晓红,2004)。ABA的快速分解代谢是影响植物组织ABA含量的重要因素。ABA氧化失活是高等植物内源ABA分解的主要方式,主要通过ABA8′位甲基羟基化途径完成;8′-羟化酶(8-hydoxylase)是该氧化途径的关键酶,该酶属于细胞色素P450单加氧酶(Krochko等,1998),在草莓果实的发育过程中,该基因的表达水平的改变影响了果实体内ABA激素的含量,进而调节草莓果实的发育和成熟。病毒诱导基因沉默(virus-inducedgenesilencing,VIGS)是一种操作简单、快速便捷的基因功能鉴定方法。将 ...
【技术保护点】
1.一种草莓ABA降解途径关键酶FveCYP707A4a基因,其特征在于,FveCYP707A4a基因全序列如下所示:SEQ ID No.1:FveCYP707A4aATGAAGAAGAGCAAGGGAGGAGGAGAAGAAGACCCCCATGATGATCATGGTCATAAGAATAGGGCGGCTCAGCTCCCTCCAGGCTCATTTGGTTGGCCTTATATCGGTGAGACCCTTCAGCTCTATTCTCAGGACCCAAACACTTTCTTCTCTTCCAGACAGAAAAGGTATGGGAAAATTTTTAAGACACATATACTTGGGAGTCCATGTGTGATGCTGGCGAGCCCGGAGGCTGCAAAGTTTGTATTGGTCACTCAAGCTCACTTGTTCAAGCCCACCTATCCCAAAAGCAAAGAGGCTCTGATTGGTCCCTCCGCATTATTTTTCCACCATGGAGATTACCATTTCAGACTGAGGAAGCTTGTTCAGCGATCTCTCAGTCCTGATGCTATTCGGAATTTGGTGCCCCATATCGAC ...
【技术特征摘要】
1.一种草莓ABA降解途径关键酶FveCYP707A4a基因,其特征在于,FveCYP707A4a基因全序列如下所示:SEQIDNo.1:FveCYP707A4aATGAAGAAGAGCAAGGGAGGAGGAGAAGAAGACCCCCATGATGATCATGGTCATAAGAATAGGGCGGCTCAGCTCCCTCCAGGCTCATTTGGTTGGCCTTATATCGGTGAGACCCTTCAGCTCTATTCTCAGGACCCAAACACTTTCTTCTCTTCCAGACAGAAAAGGTATGGGAAAATTTTTAAGACACATATACTTGGGAGTCCATGTGTGATGCTGGCGAGCCCGGAGGCTGCAAAGTTTGTATTGGTCACTCAAGCTCACTTGTTCAAGCCCACCTATCCCAAAAGCAAAGAGGCTCTGATTGGTCCCTCCGCATTATTTTTCCACCATGGAGATTACCATTTCAGACTGAGGAAGCTTGTTCAGCGATCTCTCAGTCCTGATGCTATTCGGAATTTGGTGCCCCATATCGACGCCACAGCTGCCTCTGTGACCTCGGAATGGTGGGGCACCGGGAAAGTCATCAACACCTTCCATGAGATGAAGAAGTTTTCTTTCGAAGTTGGTGTACTAGTAATTTTTGGCCAATTGGAGACCCGCTACAAAGAAGAACTGAGGAAAAACTATATGGCAGTGAACAAAGGCTACAATTCATTTCCCATAAACATTCCTGGAACGCCATACAAAAAGGCTTTGTTGGCGAGGGAGAGGCTGAGGCACATTATCGGTGACATTATCCATGAGAGAAAGGAGAAGAGGTTACCTGAAAAGGATCTGTTGGGTTGTTTGCTGAGATCAATAAACGAAGGAGGGGAAGTTTTGAGTGATGACCAAATCGCAGACAACATAATAGGTGTTCTCTTTGCTGCTCAAGACACCACAGCCAGTGTCATGACCTGGATTTTCAAGTACCTCCATGACGAACCAAAAATCCTAGAAGCTGTTAAGGCCGAACAAAATGCAATTCGCCTATCAAATGAACAAGCAGGTAACCAACCATTGAGTTGGGCAGACACCAGAAACATGCCAATTAGTTACAAGGTTGTGTTGGAGAGTTTGAGACTGTCAAGCATTATATCATTCCTTTTTAGAGAAGCTGTGGTTGATGTGGAGTACAAAGGTTACTTGATTCCAAAAGGTTGGAAGGTGATGCCTTTGTTCAGGAACATTCATCATAATCCTGAATTCTTCACCGACCCTCAGAAATTCGATCTTTCTAGATTCGAGGTTGCACCAAAGCCAAATACATTTATGCCATTTGGCAGTGGAGTCCATGCTTGTCCAGGAAACGAGCTTGCTAAGCTGGAATTACTGATCATGATCCACCATTTAGTCACCAATTTCAGGTGGGAAATTGAGGGATCCCAAAGCGGGACCGAGTATAGTCCATTTCCTGTACCTCTGAATGGACTTCCGGTCAAACTTTGGAAATTAGAATAG;氨基酸序列如下所示:SEQIDNo.2:MKKSKGGGEEDPHDDHGHKNRAAQLPPGSFGWPYIGETLQLYSQDPNTFFSSRQKRYGKIFKTHILGSPCVMLASPEAAKFVLVTQAHLFKPTYPKSKEALIGPSALFFHHGDYHFRLRKLVQRSLSPDAIRNLVPHIDATAASVTSEWWGTGKVINTFHEMKKFSFEVGVLVIFGQLETRYKEELRKNYMAVNKGYNSFPINIPGTPYKKALLARERLRHIIGDIIHERKEKRLPEKDLLGCLLRSINEGGEVLSDDQIADNIIGVLFAAQDTTASVMTWIFKYLHDEPKILEAVKAEQNAIRLSNEQAGNQPLSWADTRNMPISYKVVLESLRLSSIISFLFREAVVDVEYKGYLIPKGWKVMPLFRNIHHNPEFFTDPQKFDLSRFEVAPKPNTFMPFGSGVHACPGNELAKLELLIMIHHLVTNFRWEIEGSQSGTEYSPFPVPLNGLPVKLWKLE。2.根据权利要求1所述的一种草莓ABA降解途径关键酶FveCYP707A4a基因,其特征在于,其测序方法包括如下步骤:步骤一,根据草莓ABA降解途径关键酶FveCYP707A4a基因的CDS序列设计PCR扩增引物对;步骤二,以Fragariavesca草莓瘦果cDNA为模版,利用PCR扩增引物对,通过PCR扩增获得FveCYP707A4a基因全序列。3.根据权利要求2所述的一种草莓ABA降解途径关键酶FveCYP707A4a基因,其特征在于,PCR扩增程序为:94℃,4min进行预变性;94℃,40s变性;60℃条下退火30s;72℃下延伸1rnin;30个循环扩增,72℃再延伸10min结束反应。4.一种草莓ABA降解途径关键酶FveCYP707A4a基因的应用,其特征在于,包括:将FveCYP707A4a基因沉默后,能够抑制草莓果实膨大,草莓果实中游离ABA含量下降。5.根据权利要求4所述的一种草莓ABA降解途径关键酶FveCYP707A4a基因的应用,其特征在于,将FveCYP707A4a基因沉默的方法为:利用病毒诱导基因沉默的方法,构建FveCYP707A4a的烟草脆裂病毒沉默载体,将沉默载体转入农杆菌后,再用微注射方法感染草莓幼绿果,建立病毒诱导FveCYP707A4a基因沉默的转基因草莓株系。6.根据权利要求5所述的一种草莓ABA降解途径关键酶FveCYP707A4a基因的应用,其特征在于,所述病毒诱导基因沉默的方法包括:步骤一,将FveCYP707A4a基因全序列用infusion的方法克隆到表达载体pCAMBIA1305,测序正确;FveCYP707A4a基因全序列如下所示:SEQIDNo....
【专利技术属性】
技术研发人员:何军,
申请(专利权)人:浙江五合生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:浙江,33
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