本发明专利技术公开一种笼目海带褐藻聚糖硫酸酯复方免疫增强剂，其特征在于由笼目海带褐藻聚糖硫酸酯、黄芪多糖和党参多糖按质量比为1：2：1混合而成。实验结果表明笼目海带褐藻聚糖硫酸酯复方免疫增强剂可增加BALB/c小鼠体内GM‑CSF、TNF‑α、IL‑10分泌水平，通过激活核因子‑κ（NF‑κB）和促分裂原激活蛋白激酶（MAPKs）途径改善机体免疫活动；能够促进机体非特异性免疫，同时对小鼠迟发型变态、血清溶血素HC50、ConA诱导脾淋巴细胞转化表现出显著性差异，可调整机体的特异性细胞免疫及体液免疫。
【技术实现步骤摘要】
笼目海带褐藻聚糖硫酸酯复方免疫增强剂
本专利技术涉及一种免疫增强剂，尤其是一种可显著提高免疫力的笼目海带褐藻聚糖硫酸酯复方免疫增强剂。
技术介绍
褐藻聚糖硫酸酯（fucoidan）是一种水溶性结合有硫酸基团的活性杂多糖，主要成分为岩藻糖和硫酸基。褐藻聚糖硫酸酯具有广泛的生理和生物活性，研究表明，不同的提取方法、不同的藻类中提取的褐藻聚糖硫酸酯，其组成成分和结构等存在较大差异。褐藻聚糖硫酸酯的生物活性不但取决于其组成成分、结构、硫酸基团的含量及其位置，还取决于可能与多糖链接的多酚含量。笼目海带（KjellmaniellacrassifoliaMiyabe）为褐藻优势种质资源，它在系统分类上属于海带目（Laminariales），海带科（Laminariaceae），Kjellmaniella属，是近几年研究团队培育栽培的优质褐藻。笼目海带一方面富含褐藻聚糖硫酸酯，另一方面因低温的生长环境使其富含以U-fucoidan为主的优质褐藻聚糖硫酸酯，具有抗肿瘤、降血脂、保肝护肝等多种生物活性。黄芪多糖和党参多糖分别是以黄芪和党参为原料，经提取、浓缩、纯化而成的水溶性杂多糖，可作为免疫促进剂或调节剂。尽管笼目海带褐藻聚糖硫酸酯、黄芪多糖和党参多糖均具有提高免疫力的作用，但迄今为止并没有将三者合理复配以显著提高免疫力的相关报道。
技术实现思路
本专利技术是为了解决现有技术所存在的上述技术问题，提供一种可显著提高免疫力的笼目海带褐藻聚糖硫酸酯复方免疫增强剂。本专利技术的技术解决方案是：一种笼目海带褐藻聚糖硫酸酯复方免疫增强剂，其特征在于由笼目海带褐藻聚糖硫酸酯、黄芪多糖和党参多糖按质量比为1：2：1混合而成；所述笼目海带褐藻聚糖硫酸酯依次按照如下步骤制备：以清洗后的笼目海带为原料，向原料中加入复合酶，在pH4.0～pH5.5和温度40～60℃条件下酶解40~70分钟，所述复合酶添加量为原料质量的0.70～0.90%，然后在96～100℃水浴加热3～4小时，降至室温，离心得上清液A，所述复合酶由纤维素酶、果胶酶和蛋白酶按质量比为5：5～6：0.3～0.5混合而成；在上清液A中加入乙醇至乙醇质量浓度为20%产生沉淀，离心得上清液B；在上清液B中加入乙醇至乙醇质量浓度为60%产生沉淀，离心得沉淀；将沉淀溶于水中，加入乙醇至乙醇质量浓度为30%产生沉淀，离心去沉淀得上清液C；在上清液C中继续添加乙醇至乙醇质量浓度为70%产生沉淀，离心得沉淀；冷冻干燥沉淀得白色粉末；所述黄芪多糖和党参多糖按如下方法提取：称取60目黄芪粉末或党参粉末5.00g，加8倍体积去离子水，100℃水浴加热90min；4500r/min离心，保留滤液，重复三次；合并滤液，真空旋蒸浓缩至20mL；加入三倍体积质量浓度95%乙醇，4℃过夜醇沉，4500r/min离心保留沉淀，真空冷冻干燥，分别得到黄芪多糖或党参多糖。本专利技术是将笼目海带褐藻聚糖硫酸酯、黄芪多糖和党参多糖进行合理复配，可显著提高机体免疫力。附图说明图1是本专利技术实施例与对照组碳廓清指数示意图。图2是本专利技术实施例与对照组血清溶血素HC50的影响示意图。具体实施方式实施例1：本专利技术的笼目海带褐藻聚糖硫酸酯复方免疫增强剂，是由笼目海带褐藻聚糖硫酸酯、黄芪多糖和党参多糖按质量比为1：2：1混合而成；所述笼目海带褐藻聚糖硫酸酯依次按照如下步骤制备：以清洗后的笼目海带为原料，向原料中加入复合酶，在pH5.5和温度60℃条件下酶解40分钟，所述复合酶添加量为原料质量的0.90%，然后在100℃水浴加热3小时，降至室温，离心得上清液A，所述复合酶是取5.0g纤维素酶，5.0g果胶酶和0.3g蛋白酶混合配制而成，纤维素酶、果胶酶和蛋白酶的酶活分别为80,000u/g、80,000u/g和1,000,000u/g；在上清液A中加入乙醇至乙醇质量浓度为20%产生沉淀，离心得上清液B；在上清液B中加入乙醇至乙醇质量浓度为60%产生沉淀，离心得沉淀；将沉淀溶于水中，加入乙醇至乙醇质量浓度为30%产生沉淀，离心去沉淀得上清液C；在上清液C中继续添加乙醇至乙醇质量浓度为70%产生沉淀，离心得沉淀；冷冻干燥沉淀得白色粉末；所述黄芪多糖和党参多糖按如下方法提取：称取60目黄芪粉末或党参粉末5.00g，加8倍体积去离子水，100℃水浴加热90min；4500r/min离心，保留滤液，重复三次；合并滤液，真空旋蒸浓缩至20mL；加入三倍体积质量浓度95%乙醇，4℃过夜醇沉，4500r/min离心保留沉淀，真空冷冻干燥，分别得到黄芪多糖或党参多糖。实施例2：本专利技术的笼目海带褐藻聚糖硫酸酯复方免疫增强剂，是由笼目海带褐藻聚糖硫酸酯、黄芪多糖和党参多糖按质量比为1：2：1混合而成；所述笼目海带褐藻聚糖硫酸酯依次按照如下步骤制备：以清洗后的笼目海带为原料，向原料中加入复合酶，在pH4.0和温度40℃条件下酶解70分钟，所述复合酶添加量为原料质量的0.70%，然后在96℃水浴加热4小时，降至室温，离心得上清液A，所述复合酶是取5.0g纤维素酶，6.0g果胶酶和0.5g蛋白酶混合配制而成，纤维素酶、果胶酶和蛋白酶的酶活分别为80,000u/g、80,000u/g和1,000,000u/g；在上清液A中加入乙醇至乙醇质量浓度为20%产生沉淀，离心得上清液B；在上清液B中加入乙醇至乙醇质量浓度为60%产生沉淀，离心得沉淀；将沉淀溶于水中，加入乙醇至乙醇质量浓度为30%产生沉淀，离心去沉淀得上清液C；在上清液C中继续添加乙醇至乙醇质量浓度为70%产生沉淀，离心得沉淀；冷冻干燥沉淀得白色粉末；所述黄芪多糖和党参多糖按如下方法提取：称取60目黄芪粉末或党参粉末5.00g，加8倍体积去离子水，100℃水浴加热90min；4500r/min离心，保留滤液，重复三次；合并滤液，真空旋蒸浓缩至20mL；加入三倍体积质量浓度95%乙醇，4℃过夜醇沉，4500r/min离心保留沉淀，真空冷冻干燥，分别得到黄芪多糖或党参多糖。实施例3：本专利技术的笼目海带褐藻聚糖硫酸酯复方免疫增强剂，是由笼目海带褐藻聚糖硫酸酯、黄芪多糖和党参多糖按质量比为1：2：1混合而成；所述笼目海带褐藻聚糖硫酸酯依次按照如下步骤制备：以清洗后的笼目海带为原料，向原料中加入复合酶，在pH5.0和温度50℃条件下酶解50分钟，所述复合酶添加量为原料质量的0.80%，然后在98℃水浴加热3.5小时，降至室温，离心得上清液A，所述复合酶是取5.0g纤维素酶，5.5g果胶酶和0.4g蛋白酶混合配制而成，纤维素酶、果胶酶和蛋白酶的酶活分别为80,000u/g、80,000u/g和1,000,000u/g；在上清液A中加入乙醇至乙醇质量浓度为20%产生沉淀，离心得上清液B；在上清液B中加入乙醇至乙醇质量浓度为60%产生沉淀，离心得沉淀；将沉淀溶于水中，加入乙醇至乙醇质量浓度为30%产生沉淀，离心去沉淀得上清液C；在上清液C中继续添加乙醇至乙醇质量浓度为70%产生沉淀，离心得沉淀；冷冻干燥沉淀得白色粉末；所述黄芪多糖和党参多糖按如下方法提取：称取60目黄芪粉末或党参粉末5.00g，加8倍体积去离子水，100℃水浴加热90min；4500r/min离心，保留滤液，重复三次；合并滤液，真空旋蒸浓缩至20mL；加入三倍体积质本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种笼目海带褐藻聚糖硫酸酯复方免疫增强剂，其特征在于由笼目海带褐藻聚糖硫酸酯、黄芪多糖和党参多糖按质量比为1：2：1混合而成；所述笼目海带褐藻聚糖硫酸酯依次按照如下步骤制备：以清洗后的笼目海带为原料，向原料中加入复合酶，在 pH4.0～pH5.5和温度40～60℃条件下酶解40~70分钟，所述复合酶添加量为原料质量的0.70～0.90%，然后在96～100℃水浴加热3～4小时，降至室温，离心得上清液A，所述复合酶由纤维素酶、果胶酶和蛋白酶按质量比为5：5～6：0.3～0.5混合而成；在上清液A中加入乙醇至乙醇质量浓度为20%产生沉淀，离心得上清液B；在上清液B中加入乙醇至乙醇质量浓度为60%产生沉淀，离心得沉淀；将沉淀溶于水中，加入乙醇至乙醇质量浓度为30%产生沉淀，离心去沉淀得上清液C；在上清液C中继续添加乙醇至乙醇质量浓度为70%产生沉淀，离心得沉淀；冷冻干燥沉淀得白色粉末；所述黄芪多糖和党参多糖按如下方法提取：称取60目黄芪粉末或党参粉末5.00g，加8倍体积去离子水，100 ℃水浴加热90 min；4500 r/min离心，保留滤液，重复三次；合并滤液，真空旋蒸浓缩至20 mL；加入三倍体积质量浓度95%乙醇，4 ℃过夜醇沉，4500 r/min离心保留沉淀，真空冷冻干燥，分别得到黄芪多糖或党参多糖。...
【技术特征摘要】
1.一种笼目海带褐藻聚糖硫酸酯复方免疫增强剂，其特征在于由笼目海带褐藻聚糖硫酸酯、黄芪多糖和党参多糖按质量比为1：2：1混合而成；所述笼目海带褐藻聚糖硫酸酯依次按照如下步骤制备：以清洗后的笼目海带为原料，向原料中加入复合酶，在pH4.0～pH5.5和温度40～60℃条件下酶解40~70分钟，所述复合酶添加量为原料质量的0.70～0.90%，然后在96～100℃水浴加热3～4小时，降至室温，离心得上清液A，所述复合酶由纤维素酶、果胶酶和蛋白酶按质量比为5：5～6：0.3～0.5混合而成；在上清液A中加入乙醇至乙醇质量浓度为20%产生沉淀，离心得上清液B；...
【专利技术属性】
技术研发人员：汪秋宽，彭雍博，任丹丹，何云海，宋悦凡，武龙，刘舒，丛海花，周慧，
申请(专利权)人：大连海洋大学，
类型：发明
国别省市：辽宁,21
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