一种猪用复合益生菌制剂的制备方法技术

本发明专利技术公开一种猪用复合益生菌制剂的制备方法，具体为：以富微量元素酵母、枯草芽孢杆菌、乳酸肠球菌发酵培养液，按比例与复合维生素复配制粒、包衣，得到一种富含有机微量元素、维生素、活性酵母菌、活性枯草芽孢杆菌、活性乳酸肠球菌的功能性母仔猪专用益生菌制剂，本方法制得的复合益生菌制剂富含有母猪和仔猪需要的有机微量元素、微生物活菌、多种维生素，能够改善肠道平衡，提高免疫力，减少腹泻和便秘的发生，降低发病率，较单一的益生菌制剂效价高，作用明显，添加到饲料中，能够降低料肉比，提高饲料利用率，提高经济效益。

【技术实现步骤摘要】
一种猪用复合益生菌制剂的制备方法
本专利技术涉及益生菌制剂的制备方法，具体涉及一种猪用复合益生菌制剂的制备方法。
技术介绍
母猪和仔猪比较容易发生腹泻和便秘，益生菌是一种可以通过改善肠道微生物平衡，从而对母猪和仔猪产生有益作用的活菌，在饲料中添加益生菌制剂可以明显降低母猪和仔猪腹泻和便秘的发生率，提高了母猪的健康状况和母仔猪的免疫力。母猪是生产生猪的核心，仔猪是生猪生产的基础，在母猪和仔猪生长过程中，需要添加硒、锌、铬、铁等各种微量元素，来提高母猪的繁殖性能、免疫力，以及仔猪的健康水平。目前，母猪和仔猪料中所添加的微量元素基本上都是无机微量元素，长期食用无机微量元素不仅不会增加母猪的繁殖性能、提高母、仔猪的免疫力，反而会降低母猪的生产年限，降低母仔猪的免疫力，而有机微量元素添加剂量少，生物效价高。因此，添加生物富集的有机微量元素是目前的发展趋势。
技术实现思路
本专利技术目的是提供一种富微量元素酵母、枯草芽孢杆菌、乳酸肠球菌的复合益生菌，按比例与复合维生素复配制粒、包衣，得到一种富含有机微量元素、维生素、活性酵母菌、活性枯草芽孢杆菌、活性乳酸肠球菌的功能性猪用益生菌制剂。本专利技术的目的是由以下技术方案实现的：一种猪用复合益生菌制剂的制备方法，包括下列步骤：(1)富微量元素酵母培养；(2)枯草芽孢杆菌培养；(3)乳酸肠球菌发酵培养；(4)菌液分离；(5)冷冻干燥制备复合菌粉；(6)菌粉制粒；(7)菌剂颗粒包衣。进一步的，本专利技术目的还可以由以下技术方案实现：一种猪用复合益生菌制剂的制备方法，包括下列步骤：(1)富微量元素酵母菌培养：斜面菌种培养→一级液体种子培养→二级液体种子培养→发酵罐种子培养→发酵罐培养，具体工艺如下：斜面菌种培养：将酿酒酵母菌种接种到添加有微量元素的麦芽汁固体斜面上进行培养，斜面菌种培养完成后，取斜面菌种培养的长势较好的富微量元素酵母菌落，接种于添加有微量元素的500ml一级种子发酵培养基中进行摇瓶发酵培养，得一级富微量元素种子液，将一级富微量元素种子液转接到含有微量元素的50L二级种子发酵培养基中进行发酵培养，得二级富微量元素种子培养液，将二级富微量元素种子培养液转接到含有微量元素的500L发酵罐培养基中进行发酵培养，得到富微量元素酵母发酵液；(2)枯草芽孢杆菌培养：取冰箱中斜面保藏的枯草芽孢杆菌菌种，按照一级液体种子培养、二级液体种子培养、发酵罐培养的顺序扩大培养；取斜面保存的枯草芽孢杆菌，接种于500ml一级种子发酵培养基中进行摇瓶发酵培养，发酵完成后得一级种子液；将一级种子液转入50L二级种子发酵培养基中进行发酵培养得到二级种子液；将二级种子液转接到300-600L发酵罐培养基中进行发酵罐培养，得到枯草芽孢杆菌发酵液；(3)乳酸肠球菌发酵培养：取冰箱中保藏的乳酸肠球菌种，按照斜面菌种培养、一级液体种子培养、二级液体种子培养、发酵罐培养的顺序扩大培养，斜面菌种培养：将乳酸肠球菌种接种到MRS培养基上进行斜面菌种培养，斜面菌种培养完成后，取斜面菌种培养的长势较好的菌落，接种于一级种子发酵培养基，进行摇瓶发酵培养，得到一级种子液，将一级种子液转入30L二级种子发酵培养基中进行二级发酵培养，得到二级种子液；将二级种子液转接到3000L发酵培养基中进行发酵罐培养，得到乳酸肠球菌发酵液；(4)菌液分离：将步骤(1)～(3)发酵完成的菌液，分别采用碟式离心机进行离心分离，转速6000-10000r/min，分别制得活菌浓浆；(5)冷冻干燥制备复合菌粉：将步骤(4)所得活菌浓浆按比例混合均匀，将冷冻干燥保护液与混合活菌浓浆按比例混匀，进行冷冻干燥，制得益生菌冻干粉；(6)菌粉制粒：将冻干后的菌粉与大豆蛋白粉、玉米淀粉、混合维生素粉按比例混合均匀，投入制粒机内进行制粒，得到粒径0.8-2.0mm的颗粒；(7)菌剂颗粒包衣:将制得的颗粒置于流化床中进行肠溶包衣。一种猪用复合益生菌制剂的制备方法，所述的步骤(1)中的微量元素包括：Se2+、Zn2+、Cr3+、Fe2+，微量元素的添加浓度依次为：120-200ug/ml、600-1000ug/ml、100-260ug/ml、120-200ug/ml，其中，Se2+由亚硒酸盐提供，Zn2+由硫酸锌、氯化锌等锌盐提供，Cr3+由氯化铬、硫酸铬等铬盐提供，Fe2+由硫酸亚铁、氯化亚铁等亚铁提供。一种猪用复合益生菌制剂的制备方法，所述的步骤(1)中的斜面菌种培养温度为24-37℃，pH6.5，时间为15-40h；种子发酵培养基配方：含糖总量26-30％，总糖可以是麦芽汁、葡萄糖两种或者其中一种，培养条件为：pH6.5、温度为24-37℃、时间为15-40h；发酵罐培养基配方为：麦芽汁5-8％、糖蜜为6-15％、pH6.5，微量元素采用流加方式，分批次加入，在24-37℃培养12-36小时。一种猪用复合益生菌制剂的制备方法，所述步骤(2)的种子发酵培养基配方：葡萄糖0.5％、淀粉2.5％、磷酸二氢钠0.2％、蛋白胨2.5％、酵母粉0.5％、硫酸锰0.02％、硫酸镁：0.1％；发酵罐培养基配方：葡萄糖0.5-2.5％、淀粉1.5％、磷酸二氢钠0.2％、豆粕3.5％、破壁酵母0.5％、硫酸锰0.02％、硫酸镁0.1％；其中，一级种子培养条件：发酵温度为28-42℃、调节pH值6.8-7.2，搅拌转速140r/min，培养18-30h，二级种子培养条件：接种量1.0-1.5％、发酵温度28-42℃、pH7.2、搅拌转速在60-100r/min、培养14-20h，发酵罐培养条件：接种量1.0-1.5％、发酵温度28-42℃、pH7.2、搅拌转速在60-100r/min、培养20-32h。一种猪用复合益生菌制剂的制备方法，所述步骤(3)的发酵培养基配方为：糖2.0％、蛋白粉2.0％、酵母膏1％、硫酸镁0.6％、硫酸锰0.3％、柠檬酸二铵0.2％、醋酸钠0.5％、吐温800.1％、pH6.2～6.4；其中，斜面菌种培养条件：35℃培养20-30h，一级液体种子培养条件：温度为26-40℃、pH6.2-6.4，16-180r/min培养18-30h，二级液体种子培养条件：接种量0.5-1.5％、温度28-42℃、pH6.2-6.4，60-100r/min培养14-20h，发酵罐培养条件：接种量1.0-1.5％、温度28-42℃、pH7.2，60-100r/min培养20-32h。一种猪用复合益生菌制剂的制备方法，所述的步骤(5)中的活菌浓浆混合比例为：富微量元素酵母：乳酸肠球菌：枯草芽孢杆菌＝0.6-1.0:0.2-1.0:1.2-2.5；冷冻干燥保护液配方：100克纯净水中加入蔗糖5-15g、海藻糖15-30g、甘露醇1-5g、甘油2-5g制成冻干保护液，冷冻干燥保护液与混合活菌浓浆的比例为0.2-0.5:1。一种猪用复合益生菌制剂的制备方法，所述步骤(6)中的菌粉、蛋白粉、玉米淀粉、复合维生素粉的混合比例为1.0:0.2-0.8：0.2-0.5:1.5-4.0；其中，复合维生素粉是由维生素E、β胡萝卜素、维生素B2、烟酸构成，添加比例为1：2.0:0.8:2.4。一种猪用复合益生菌制剂的制备方法，所述的步骤(7)中的流化床包衣条件为：温度80±5℃、雾化压力0.25m本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种猪用复合益生菌制剂的制备方法，其特征在于，包括下列步骤：(1)富微量元素酵母培养；(2)枯草芽孢杆菌培养；(3)乳酸肠球菌发酵培养；(4)菌液分离；(5)冷冻干燥制备复合菌粉；(6)菌粉制粒；(7)菌剂颗粒包衣。

【技术特征摘要】
1.一种猪用复合益生菌制剂的制备方法，其特征在于，包括下列步骤：(1)富微量元素酵母培养；(2)枯草芽孢杆菌培养；(3)乳酸肠球菌发酵培养；(4)菌液分离；(5)冷冻干燥制备复合菌粉；(6)菌粉制粒；(7)菌剂颗粒包衣。2.如权利要求1所述的一种猪用复合益生菌制剂的制备方法，其特征在于，包括下列步骤：(1)富微量元素酵母菌培养：斜面菌种培养→一级液体种子培养→二级液体种子培养→发酵罐培养，具体工艺如下：斜面菌种培养：将酿酒酵母菌种接种到添加有微量元素的麦芽汁固体斜面上进行培养，斜面菌种培养完成后，取斜面菌种培养的长势较好的富微量元素酵母菌落，接种于添加有微量元素的500ml一级种子发酵培养基中进行摇瓶发酵培养，得一级富微量元素种子液，将一级富微量元素种子液转接到含有微量元素的50L二级种子发酵培养基中进行发酵培养，得二级富微量元素种子培养液，将二级富微量元素种子培养液转接到含有微量元素的500L发酵罐培养基中进行发酵培养，得到富微量元素酵母发酵液；(2)枯草芽孢杆菌培养：取冰箱中斜面保藏的枯草芽孢杆菌菌种，按照一级液体种子培养、二级液体种子培养、发酵罐培养的顺序扩大培养；取斜面保存的枯草芽孢杆菌，接种于500ml一级种子发酵培养基中进行摇瓶发酵培养，发酵完成后得一级种子液；将一级种子液转入50L二级种子发酵培养基中进行发酵培养得到二级种子液；将二级种子液转接到300-600L发酵罐培养基中进行发酵罐培养，得到枯草芽孢杆菌发酵液；(3)乳酸肠球菌发酵培养：取冰箱中保藏的乳酸肠球菌种，按照斜面菌种培养、一级液体种子培养、二级液体种子培养、发酵罐培养的顺序扩大培养，斜面菌种培养：将乳酸肠球菌种接种到MRS培养基上进行斜面菌种培养，斜面菌种培养完成后，取斜面菌种培养的长势较好的菌落，接种于一级种子发酵培养基，进行摇瓶发酵培养，得到一级种子液，将一级种子液转入30L二级种子发酵培养基中进行二级发酵培养，得到二级种子液；将二级种子液转接到3000L发酵培养基中进行发酵罐培养，得到乳酸肠球菌发酵液；(4)菌液分离：将步骤(1)～(3)发酵完成的菌液，分别采用碟式离心机进行离心分离，转速6000-10000r/min，分别制得活菌浓浆；(5)冷冻干燥制备复合菌粉：将步骤(4)所得活菌浓浆按比例混合均匀，将冷冻干燥保护液与混合活菌浓浆按比例混匀，进行冷冻干燥，制得益生菌冻干粉；(6)菌粉制粒：将冻干后的菌粉与大豆蛋白粉、玉米淀粉、混合维生素粉按比例混合均匀，投入制粒机内进行制粒，得到粒径0.8-2.0mm的颗粒；(7)菌剂颗粒包衣:将制得的颗粒置于流化床中进行肠溶包衣。3.如权利要求1或2任一项所述的一种猪用复合益生菌制剂的制备方法，其特征在于，所述的步骤(1)中的微量元素包括：Se2+、Zn2+、Cr3+、Fe2+，微量元素的添加浓度依次为：120-200ug/ml、600-1000ug/ml、100-260ug/ml、120-200ug/ml，其中，Se2+由亚硒酸盐提供，Zn2+由硫酸锌、氯化锌等锌盐提供，Cr3+由氯化铬、硫酸铬等铬盐提供，Fe2+由硫酸亚铁、氯化亚铁等亚铁提供。4.如权利要求2或3任一项所述的一种猪用复合益生菌制剂的制备方法，其特征在于，所述的步骤(1)中的斜面菌种培养温度为24-37℃，pH6.5，时间为15-4...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑瑞峰，王玉田，潘兴亮，常卓，赵有，金银姬，朱晓静，滕忠香，刘在春，
申请(专利权)人：北京市畜牧总站，
类型：发明
国别省市：北京,11