一种乳酸片球菌及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种乳酸片球菌及应用，涉及微生物的提取

【技术实现步骤摘要】
一种乳酸片球菌及应用


[0001]本专利技术涉及微生物的提取
、
鉴别及应用领域，具体的讲涉及一种乳酸片球菌及应用
。

技术介绍

[0002]由于畜禽养殖中兽用抗菌药物不规范使用，严重威胁畜禽产品质量安全和公共卫生安全，给人类和动物健康带来众多隐患
。
乳酸菌被公认为是安全的食品级微生物，是“替抗”方案中应用最多
、
最重要饲料添加剂之一
。
乳酸菌既可以发酵饲料使其具有独特的酸香味，改善适口性；又可以促进动物生长
、
调节肠道
、
增强免疫和抗氧化功能等
。
蚯蚓肠道菌群结构及功能具有多样性，蚯蚓因进食腐朽食物及生活环境习性特点，逐渐被利用到养殖行业发挥其作用
。
蚯蚓在恶劣的环境中生存，会存在增强自身抵抗力以及抗菌物质
。
从蚯蚓体内分离的乳酸菌，对养殖行业有着重要意义
。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的在于克服现有技术之不足，而提供一种能够提高动物免疫力及抗氧化能力的乳酸片球菌
。
[0004]本专利技术目的是由以下技术方案实现的：
[0005]一种乳酸片球菌
(Pediococcus acidilacticii)
，该乳酸片球菌来源于蚯蚓，命名为：乳酸片球菌
11029
菌株，已于
2021
年
12
月
16
日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为：
CGMCC No.24122
，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编：
100101
，分类命名：乳酸片球菌
(Pediococcus acidilacticii)。
[0006]本专利技术得到的一种乳酸片球菌
11029
菌株是从我国北京市蚯蚓体内的乳酸菌分离得到，包括如下步骤：
[0007]1)
筛选：将蚯蚓置于
75
％酒精中做体表消毒，沿体表剪开，接种于
MRS
琼脂培养基，
37℃
厌氧培养
48h
；
[0008]2)
菌株纯化：利用平板划线纯化，对乳酸菌特征性菌落经多次纯化培养；
[0009]3)
菌株鉴定：利用通用引物
27F
和
1492R
经
PCR
扩增
DL01
菌株的
16S rRNA
基因获得的序列在
GeneBank
公共数据库的序列号为
JF899267
，此序列和基因组的
G+C
含量是鉴定该菌株的主要分子特征依据
。
[0010]4)
菌株生物特性：对分离菌株进行生长特性
、
产酸能力
、
抗逆性检测
。
[0011]经菌株鉴定和生物特性研究，本专利技术从蚯蚓肠道中成功分离到的株菌革兰染色为阳性，经生化鉴定和
16S rRNA
测序比对为乳酸片球菌
。
筛选出了一株生长性能良好产酸能力强，以及抗逆性良好的乳酸片球菌菌株
11029。
[0012]进一步的，本专利技术目的还可以由以下技术方案实现：
[0013]一种乳酸片球菌制剂，利用所述的乳酸片球菌进行发酵，包括如下步骤：
[0014]1)
菌种活化：将乳酸片球菌菌株
11029
按1％的接种量，接入
MRS
肉汤培养基，
180r/min
，培养
24h
，进行反复复壮；
[0015]2)
发酵培养基制备：将新鲜吐肠后的蚯蚓进行匀浆，制得组织匀浆液，蚯蚓匀浆液经
60
左
℃
右，
10min
巴氏消毒处理后放入
‑
80℃
超低温冷冻箱保存，使用前解冻，将
3g
无水葡萄糖加入
100ml
蒸馏水后高压灭菌，加入蚯蚓匀浆
5g
作为发酵底物备用；
[0016]3)
将步骤
1)
所得乳酸片球菌菌液均匀接种到步骤
2)
所得底物中，密闭发酵
。
[0017]进一步的，所述步骤
3)
乳酸片球菌菌株
11029
的接种量为1～5％
。
[0018]进一步的，所述步骤
3)
乳酸片球菌菌株
11029
的接种量为1％
。
[0019]进一步的，所述培养温度为：
20
～
40℃、
发酵时间为：
30
～
60h。
[0020]进一步的，所述培养温度为：
28℃、
发酵时间为：
48h。
[0021]本专利技术还提供了一种乳酸片球菌的应用，该乳酸片球菌菌株
11029
可用于制备提高禽类的蛋品质及提高畜禽的抗氧化
、
免疫功能的菌制剂
。
[0022]进一步的，该乳酸片球菌可用于制备提高蛋鸡的蛋品质及提高抗氧化
、
免疫功能的菌制剂
。
[0023]本专利技术有益效果
[0024]本申请的乳酸片球菌菌株
11029
具有抑菌效果好
、
耐酸耐胆盐抗逆好
、
生长迅速和生物量较高等优点
。
通过益生特性研究和安全性评价，可用于提高禽类蛋品质
。
通过临床试验可提高畜禽的生长性能，增强畜禽的抗氧化能力和改善其免疫能力
。
本专利技术的乳酸片球菌菌株
11029
可作为一种潜在的益生菌添加剂应用于畜禽生产具有使用成本低
、
对人畜安全的特点
。
该菌株具有抗菌谱广
、
生长迅速
、
抗逆性强
、
热稳定好和生物安全性高等优点，从而作为益生菌在农业
、
食品
、
医学
、
林业
、
环保等方面被广泛研究
。
具体实施方式
[0025]下面结合实施例对本专利技术作进一步的详述
。
实施例中的微生物菌剂，按微生物发酵常规方法及微生物菌剂制备常规方法制成
。
[0026]实施例1[0027]菌株分离
[0028]将蚯蚓置于
75
％酒精中做体表消毒，沿体表剪开，接种于
MRS
琼脂培养基，
37℃本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种乳酸片球菌
(Pediococcus acidilacticii)
，其特征在于，该乳酸片球菌来源于蚯蚓，命名为：乳酸片球菌
11029
菌株，已于
2021
年
12
月
16
日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为：
CGMCC
：
24122。2.
一种乳酸片球菌制剂，其特征在于，利用权利要求1所述的乳酸片球菌进行发酵，包括如下步骤：
1)
菌种活化：将乳酸片球菌菌株
11029
按1％的接种量，接入
MRS
肉汤培养基，
180r/min
，培养
24h
，进行反复复壮；
2)
发酵培养基制备：将新鲜吐肠后的蚯蚓进行匀浆，制得组织匀浆液，蚯蚓匀浆液经
60
左
℃
右，
10min
巴氏消毒处理后放入
‑
80℃
超低温冷冻箱保存，使用前解冻，将
3g
无水葡萄糖加入
100ml
蒸馏水后高压灭菌，加入蚯蚓匀浆
5g
作为发酵底物备用；
3)

【专利技术属性】
技术研发人员：潘兴亮，刘钧，宋彦军，梁静泊，王重庆，刘宇，吕兰，李复煌，刘依山，田莉，
申请(专利权)人：北京市畜牧总站，
类型：发明
国别省市：