能够结合LINC00266-1多肽的抗体制造技术

本发明专利技术涉及癌症的诊断和治疗领域。本发明专利技术公开了一种能够结合LINC00266‑1多肽的抗体。该抗体可以用于肿瘤的检测或诊断，或患者预后情况的评估与监测。

【技术实现步骤摘要】
能够结合LINC00266-1多肽的抗体
本专利技术涉及癌症的诊断和治疗领域，具体而言，涉及一种能够结合LINC00266-1多肽的抗体。
技术介绍
lncRNALINC00266-1在美国国立卫生研究院NCBI数据库中被注释为一种长链非编码RNA，现有认为lncRNALINC00266-1是不能编码蛋白质或多肽的。因而，现有技术也不存在能够特异性结合LINC00266-1多肽的抗体。
技术实现思路
本专利技术涉及一种包含抗原结合结构域的分离的结合蛋白，其能够特异性结合LINC00266-1多肽；所述LINC00266-1多肽的氨基酸序列如SEQIDNO：1所示。根据本专利技术的另一方面，本专利技术还涉及如上所述的结合蛋白在制备用于肿瘤诊断和/或预后评估的试剂或试剂盒中的应用，其中增加的LINC00266-1多肽的浓度是实体瘤的指征和/或实体瘤预后不良的指征。根据本专利技术的另一方面，本专利技术还涉及包含如上所述的结合蛋白的试剂、试剂盒或试纸条。与现有技术相比，本专利技术至少具有如下优点：本专利技术提供一种用于检测LINC00266-1多肽的抗体，LINC00266-1多肽是实体恶性肿瘤预后评估判断的新标记物。临床研究证实，LINC00266-1多肽在实体恶性肿瘤组织中高表达与实体恶性肿瘤患者预后差呈正相关。癌组织中LINC00266-1多肽高水平的患者具有更短的生存期和更高的死亡率。据此，LINC00266-1抗体可作为检测剂，有效提高了临床中实体恶性肿瘤预后判断的阳性率。附图说明为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1所示为本专利技术实施例2中针对LINC00266-1多肽的抗原表位肽1和2的抗体能够特异性识别和检测LINC00266-1多肽以及LINC00266-1多肽类似物，及针对抗原表位肽1的抗体有更优异的特异性的结果图；图2为本专利技术实施例2中，针对LINC00266-1多肽的抗原表位肽1的抗体能够特异性识别和检测LINC00266-1多肽的结果图；图3为本专利技术实施例3中，在同一来源不同侵袭转移潜能癌细胞中LINC00266-1多肽表达的结果；图4为本专利技术实施例4中，3对新鲜冷冻成对的胃癌、肝癌组织与其对应癌旁组织中LINC00266-1多肽表达的结果；图5本专利技术实施例5中，在结肠癌和对应癌旁正常结肠组织中LINC00266-1多肽表达的示意图；图5a表示对应的癌旁正常结肠组织；图5b表示结肠癌组织；图6为本专利技术实施例5中，LINC00266-1多肽在90对成对的结肠癌组织与其对应癌旁正常结肠组织石蜡切片中表达的统计分析结果(N：癌旁组织，T：癌组织)；图7为本专利技术实施例5中LINC00266-1多肽表达水平高、低与结肠癌患者死亡率关联的结果；图8为本专利技术实施例5中LINC00266-1多肽高、低表达水平影响结肠癌患者预后判断的Kaplan-Meier生存分析曲线图。具体实施方式本专利技术涉及一种包含抗原结合结构域的分离的结合蛋白，其能够特异性结合LINC00266-1多肽；所述LINC00266-1多肽的氨基酸序列如SEQIDNO：1所示。“结合蛋白”此用语包括全长抗体或抗体片段，抗体可以为多克隆抗体及单克隆抗体。此外，“抗体”此用语包括天然发生的抗体以及非天然发生的抗体，包括例如嵌合型(chimeric)、双功能型(bifunctional)、人源化(humanized)抗体以及人抗体，以及相关的合成异构形式(isoforms)。在一些实施方式中，所述结合蛋白可以通过SEQIDNO：1或其部分(例如SEQIDNO：2及3)为结合对象通过筛选的方式得到，例如噬箘体展示技术，以及本领域技术人员所公知的其他理由抗原筛选抗体的技术。或者通过本专利技术所提供的免疫的方式。长链非编码RNA(LongNon-ProteinCodingRNA，lncRNA)起初被认为是基因组转录的“噪音”，不具有生物学功能。然而，近年来的研究表明，实际上lncRNA以RNA的形式在多种层面上(表观遗传调控、转录调控以及转录后调控等)调控了基因的表达水平。然而近年来的研究表明，某些的序列中包含的一小段却看上去好像一个编码区域，也能编码一些蛋白(AMicropeptideEncodedbyaPutativeLongNoncodingRNARegulatesMusclePerformance，DouglasM.etal，Cell，2015)。即便如此，现有技术仍普遍认为绝大多数lncRNA不会编码任何蛋白质。长链基因间非编码RNA(LongIntergenicNon-ProteinCodingRNA，lincRNA)是lncRNA中的一种，LINC00266-1(GeneID：140849)是最近新发现的一种lincRNA，其功能还未探究清楚。在本专利技术之前，还没有出现涉及本专利技术LINC00266-1多肽以及本专利技术蛋白多肽用于实体恶性肿瘤预后评估及诊断的公开报道，也没有证实长链非编码RNALINC00266-1编码一种活性多肽的公开报道，更没有出现LINC00266-1多肽用于实体恶性肿瘤预后评估及诊断的公开报道。在一些实施方式中，所述抗体以LINC00266-1多肽的SEQIDNO：2或3所示表位序列作为免疫原免疫得到。进一步的，所述SEQIDNO：2或3所示序列作为抗原时，其纯度＞85％。在一些实施方式中，在进行免疫之前，所述免疫原与载体蛋白进行偶联。在一些实施方式中，所述载体蛋白为钥孔戚血蓝蛋白。在一些实施方式中，所述结合蛋白为全长抗体，其恒定区序列选自IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgM、IgE、IgD任何其中之一。在一些实施方式中，所述恒定区的种属来源为牛、马、乳牛、猪、绵羊、山羊、大鼠、小鼠、狗、猫、兔、骆驼、驴、鹿、貂、鸡、鸭、鹅、火鸡、斗鸡或人。在一些实施方式中，所述结合蛋白为纳米抗体、F(ab’)2、Fab’、Fab、Fv、scFv、双特异抗体和抗体最小识别单位中的一种。在一些实施方式中，所述结合蛋白标记有显示信号强度的指示剂。所述指示剂可以用来指示抗原-抗体复合物的存在/含量，以进行定性/定量分析。在一些实施方式中，所述显示信号强度的指示剂包括荧光物质、量子点、地高辛标记探针、生物素、放射性同位素、放射性造影剂、顺磁离子荧光微球、电子致密物质、化学发光标记物、超声造影剂、光敏剂、胶体金或酶中的任一种。在一些实施方式中，所述荧光物质包括Alexa350、Alexa405、Alexa430、Alexa488、Alexa555、Alexa647、AMCA、氨基吖啶、BODIPY630/650、BODIPY650/665、BODIPY-FL、BODIPY-R6G、BODIPY-TMR、BODIPY-TRX、5-羧基-4′，5′-二氯-2′，7′-二甲氧基荧光素、5-羧基-2′，4′，5′，7′-四氯荧光素、5-羧基荧光素、5-羧基罗丹明、6-羧基罗丹明、6-羧基四甲基罗丹明、CascadeBlue、Cy2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.包含抗原结合结构域的分离的结合蛋白，其能够特异性结合LINC00266‑1多肽；所述LINC00266‑1多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。

【技术特征摘要】
1.包含抗原结合结构域的分离的结合蛋白，其能够特异性结合LINC00266-1多肽；所述LINC00266-1多肽的氨基酸序列如SEQIDNO：1所示。2.根据权利要去1所述的结合蛋白，其特征在于，所述抗体以LINC00266-1多肽的SEQIDNO：2或3所示表位序列作为免疫原免疫得到。3.根据权利要去2所述的结合蛋白，其特征在于，在进行免疫之前，所述免疫原与载体蛋白进行偶联。4.根据权利要去3所述的结合蛋白，其特征在于，所述载体蛋白为钥孔戚血蓝蛋白。5.根据权利要去1所述的结合蛋白，其特征在于，所述结合蛋白为全长抗体，其恒定区序列选自IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgM、IgE、IgD任何其中之一。6.根据权利要求5所述的结合蛋白，其特征在于，所述恒定区的种属来源为牛、马、乳牛、猪、绵羊、山羊、大鼠、小鼠、狗、猫、兔、骆驼、驴、鹿、貂、鸡、鸭、鹅、火鸡、斗鸡或人。7.根据权利要去1所述的结合蛋白，其特征在于，所述结合蛋白...

【专利技术属性】
技术研发人员：晏光荣，朱嵩，王继重，
申请(专利权)人：广州医科大学附属第三医院广州重症孕产妇救治中心，广州柔济医院，
类型：发明
国别省市：广东,44