【技术实现步骤摘要】
一种提高花椰菜小孢子出胚率的培养基配方及其培养方法
本专利技术涉及一种提高花椰菜小孢子出胚率的培养基配方及其培养方法,属于植物组织培养
技术介绍
花椰菜含有丰富的蛋白质、碳水化合物、纤维及各种维生素及矿物质等营养物质,且味道鲜美而在世界各地普遍栽培。但是,传统选育花椰菜杂交新品种的育种周期一般需6-8年,其中选育亲本材料就需5-6年。为缩短其育种时间并提高其出胚率,有研究人员利用游离小孢子培养技术培育花椰菜再生植株,即待小孢子胚长产生时,转到温度25℃、光照4000LX、光周期12-16hr/d的光照条件下培养,将转绿后的胚转移到含蔗糖3%的MS无激素固体培养基上继续培养,直至幼苗长成;在含蔗糖3%的MS无激素固体培养基中添加激动素、6苄基嘌呤和萘乙酸三种生长素。另,有研究人员以花椰菜的花药为材料,按无菌操作要求接种,进行花药诱导愈伤组织培养、愈伤组织分化培养、分化苗生根培养等步骤完成花椰菜新种苗的育成。通过花药培养可以保特亲本的纯度稳定,加快杂种后代的选择效果。对于加快培育优良的椰菜品种具有很好的应用价值。但是,上述培养方式随对出胚率有一定提高作用,但是还远远达不到预估水平,本专利技术即是在上述技术方案的基础上进行的改进。
技术实现思路
针对上述情况,本专利技术的目的在于提供一种提高花椰菜小孢子出胚率的培养基配方及其培养方法。为解决
技术介绍
的相关问题,本专利技术提供一种提高花椰菜小孢子出胚率的培养基配方,各组分在每升培养基中所含重量为:(1)花蕾预处理培养基:NLN-13液体培养基+蔗糖或白糖130g/L+0.05-0.2%秋水仙碱+1-3%DMS ...
【技术保护点】
1.一种提高花椰菜小孢子出胚率的培养基配方,其特征在于,各组分在每升培养基中所含重量为:(1)花蕾预处理培养基:NLN‑13液体培养基+蔗糖或白糖130g/L+0.05‑0.2%秋水仙碱+1‑3%DMSO+1‑2%维生素B+1‑2%维生素E,pH5.6‑6.0,灭菌;(2)胚状体诱导培养基:MS基础培养基+BA 1.0‑2.0mg/L+IAA 0.5‑1.0mg/L+秋水仙碱4.0‑5.0mg/L+30g/L蔗糖或白糖+9g/L琼脂,pH 5.8,灭菌;(3)胚状体分化培养基:MS基础培养基+GA 0.5‑1.0mg/L+BA1.0‑2.0mg/L+NAA0.05mg/L+AgNO3 4.0‑5.0mg/L+30g/L蔗糖或白糖+9g/L琼脂,pH 5.8,灭菌;(4)胚状体再分化培养基:MS基础培养基+AgNO3 4.0mg/L+30g/L蔗糖+10‑11g/L琼脂,pH 5.8,灭菌;(5)胚状体生根培养基:1/2MS基础培养基+IAA 1.0mg/L+30g/L蔗糖+9g/L琼脂,pH 5.8,灭菌。
【技术特征摘要】
1.一种提高花椰菜小孢子出胚率的培养基配方,其特征在于,各组分在每升培养基中所含重量为:(1)花蕾预处理培养基:NLN-13液体培养基+蔗糖或白糖130g/L+0.05-0.2%秋水仙碱+1-3%DMSO+1-2%维生素B+1-2%维生素E,pH5.6-6.0,灭菌;(2)胚状体诱导培养基:MS基础培养基+BA1.0-2.0mg/L+IAA0.5-1.0mg/L+秋水仙碱4.0-5.0mg/L+30g/L蔗糖或白糖+9g/L琼脂,pH5.8,灭菌;(3)胚状体分化培养基:MS基础培养基+GA0.5-1.0mg/L+BA1.0-2.0mg/L+NAA0.05mg/L+AgNO34.0-5.0mg/L+30g/L蔗糖或白糖+9g/L琼脂,pH5.8,灭菌;(4)胚状体再分化培养基:MS基础培养基+AgNO34.0mg/L+30g/L蔗糖+10-11g/L琼脂,pH5.8,灭菌;(5)胚状体生根培养基:1/2MS基础培养基+IAA1.0mg/L+30g/L蔗糖+9g/L琼脂,pH5.8,灭菌。2.根据权利要求1所述的一种提高花椰菜小孢子出胚率的培养基配方,其特征在于,所述灭菌的方式可以为高温灭菌或过滤灭菌中的一种。3.根据权利要求1或2任一所述的培养基配方培养花椰菜小孢子的方法,其特征在于,(1)供体植株与花蕾的选择:选择植株与花蕾生长健康的花椰菜作为供体植株;并从中选择花瓣与花药长度比在0.6-1.0之间,处于单核中晚期的花蕾;(2)花蕾灭菌:用5.2%活性氯次氯酸钠50mL/L+95%酒精100mL/L+吐温20100μL配制成灭菌液;在摇床上将花蕾放入灭菌液中进行表面消毒18分钟,再在超净台上用无菌水清洗5次后,备用;(3)花蕾预处理培养:将灭菌后花蕾置于花蕾预处理培养基上...
【专利技术属性】
技术研发人员:眭丽英,包万军,张见,邢军,傅先来,范晓嫚,赵鸿阳,刘亚婷,
申请(专利权)人:天津在田科技有限公司,
类型:发明
国别省市:天津,12
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