核酸扩增制造技术

在一些实施方案中，本教导内容提供了用于核酸扩增的方法，包括形成反应混合物，和使反应混合物经历适合于核酸扩增的条件。在一些实施方案中，用于核酸扩增的方法包括使待被扩增的核酸经历部分变性条件。在一些实施方案中，用于核酸扩增的方法包括在不完全变性被扩增的核酸的情况下进行扩增。在一些实施方案中，用于核酸扩增的方法使用催化同源重组的酶和聚合酶。在一些实施方案中，可在单个反应容器中进行用于核酸扩增的方法。在一些实施方案中，可在反应混合物的单一连续液相中进行用于核酸扩增的方法，而无需反应混合物的区室化或反应组分的固定。在一些实施方案中，用于核酸扩增的方法包括任选地在存在聚合物的情况下，在等温扩增条件下在表面上扩增至少一个多核苷酸。聚合物可包括筛分剂和/或扩散减少剂。

Nucleic acid amplification

In some implementations, this tutorial provides methods for nucleic acid amplification, including the formation of reaction mixtures and the conditions under which reaction mixtures undergo suitable nucleic acid amplification. In some implementations, methods for nucleic acid amplification include subjecting the nucleic acid to be amplified to partial denaturation conditions. In some implementations, methods for nucleic acid amplification include amplification in the case of incompletely denatured amplified nucleic acids. In some implementations, enzymes and polymerases catalyzing homologous recombination are used for nucleic acid amplification. In some implementations, a method for nucleic acid amplification can be carried out in a single reaction vessel. In some implementations, a method for nucleic acid amplification can be performed in a single continuous liquid phase of the reaction mixture without requiring compartmentalization of the reaction mixture or immobilization of the reaction components. In some implementations, methods for nucleic acid amplification include selectively amplifying at least one polynucleotide on the surface in the presence of a polymer and under isothermal amplification conditions. Polymers may include screening agents and/or diffusion reducers.

【技术实现步骤摘要】
核酸扩增专利技术背景本申请是申请号为201380031868.1的分案申请。核酸扩增在分子生物学中非常有用并且实际上在生物学、治疗学、诊断学、法医学和研究的每个方面都具有广泛的适用性。通常地，使用一种或多种引物从起始模板产生扩增子，其中扩增子相应于或互补于从其产生所述扩增子的模板。多重扩增还可使过程简化并减少费用。该应用涉及用于核酸扩增和/或分析的方法和试剂。专利技术概述本文中提供了核酸扩增和/或分析的方法、试剂和产物。扩增可利用固定的和/或溶解的引物。可将单组引物与不同的模板混合，或者可将单个模板与多种不同的引物接触，或者可将多种不同的模板与多种不同的引物接触。从本文中提供的方法产生的扩增子是适合用于进一步分析例如序列测定的底物。在一些实施方案中，本教导内容提供了用于核酸扩增的组合物、系统、方法、装置和试剂盒。附图详述图1提供了显示模板行走(templatewalking)的实施方案的示意图。在可选择的实施方案中，固定的引物包含被命名为(A)n的富含腺苷的序列，例如(A)30，并且模板上针对固定引物的引物结合部位包含互补的富含T的序列，例如(T)30。图2描述了在小珠上通过模板行走的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于核酸扩增的方法，包括:(a)将至少两个多核苷酸分配至反应室的阵列中，这是通过将单个所述多核苷酸引入至少两个所述反应室来进行的；和(b)通过扩增所述至少两个反应室内的多核苷酸来形成至少两个基本上单克隆的核酸群，其中所述至少两个反应室在扩增期间彼此流体连通。

【技术特征摘要】
2012.04.19 US 61/635,584;2012.09.11 US 61/699,810;1.用于核酸扩增的方法，包括:(a)将至少两个多核苷酸分配至反应室的阵列中，这是通过将单个所述多核苷酸引入至少两个所述反应室来进行的；和(b)通过扩增所述至少两个反应室内的多核苷酸来形成至少两个基本上单克隆的核酸群，其中所述至少两个反应室在扩增期间彼此流体连通。2.权利要求1的方法，其中所述至少两个多核苷酸具有不同的序列。3.权利要求1的方法，其中在扩增期间在不完全变性所述至少...

【专利技术属性】
技术研发人员：CY·李，D·拉夫，SM·陈，J·奥尼尔，R·卡辛斯卡斯，J·罗恩伯格，
申请(专利权)人：生命技术公司，
类型：发明
国别省市：美国,US