The invention discloses a method for extracting and detecting rice blast gene, which is characterized by the following steps: cutting off the disease spot from the rice plant or selecting the mycelium of rice blast fungus and putting it into test tube quantitatively, then injecting DNA extraction buffer into test tube, putting the test tube into a wet-hot sterilizing pot for water bath treatment, lasting 10 minutes to 12 minutes. After natural cooling of the test tube after water bath treatment, it is filtered into the corresponding filter device. The filtered mixture is quantitatively and uniformly injected into the PCR_96 orifice plate and placed in the environment of 20 C for refrigeration. The probe of the detection device collects the data of the mixed liquid in the PCR_96 orifice plate, and generates the DNA detection data sheet automatically with the computer. This method can improve the controllability of rice blast gene extraction, reduce the occurrence of unexpected conditions in gene extraction, and ensure the stability and efficiency of rice blast gene extraction.
【技术实现步骤摘要】
一种对水稻的稻瘟病基因进行提取检测的方法
本专利技术涉及水稻稻瘟病
,具体为一种对水稻的稻瘟病基因进行提取检测的方法。
技术介绍
水稻是草本稻属的一种,属谷类,也是稻属中作为粮食的最主要最悠久的一种,目前是全世界最重要的粮食作物之一,也是世界上一半人口的主粮,随着目前全球人口的日益增长,人们对稻米的需求量越来越大,但是,由于水稻在种植中会有各种病害的发生,严重制约了水稻的产量,所以人们对水稻的病害重视度越来越高。稻瘟病是水稻重要病害之一,可引起大幅度减产,严重时减产40%~50%,甚至颗粒无收,世界各稻区均有发生。该病在水稻植株的各处均有发生,其中以水稻植株叶部、节部发生为多,发生后可造成不同程度减产,尤其穗颈瘟或节瘟发生早而重,可造成白穗以致绝产。近年来,世界各稻区的稻瘟病年发生面积出现逐年增加趋势,局部大爆发并不少见,目前稻瘟病可能发生在省域内的任何年头、任何季节,极大地影响了水稻的产量。由于稻瘟病对于水稻的严重性,所以世界各稻区均在研究稻瘟病的防治方式,在对稻瘟病研究过程中,都会对各时期稻瘟病的基因进行提取检测装置,虽然目前一些稻瘟病的基因提取检测存在 ...
【技术保护点】
1.一种对水稻的稻瘟病基因进行提取检测的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)提前准备好DNA提取缓冲液;(2)从水稻发病的植株上单独将病斑切取下来或者挑取稻瘟病菌的菌丝,定量的放入试管中;(3)然后定量的将准备好DNA提取缓冲液注入带有植株病斑或者稻瘟病菌菌丝的试管中;(4)将上述带有植株病斑或者稻瘟病菌菌丝的试管放入湿热灭菌锅中进行水浴处理,时长10min‑12min;(5)将水浴处理后的试管放置到常温状态下进行自然冷却;(6)试管内的混合液经自然冷却后,导入相应的过滤装置中进行过滤,从而过滤掉混合液中残留的固态杂质;(7)将过滤后的混合液定量均匀的注入PCR‑96孔板 ...
【技术特征摘要】
1.一种对水稻的稻瘟病基因进行提取检测的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)提前准备好DNA提取缓冲液;(2)从水稻发病的植株上单独将病斑切取下来或者挑取稻瘟病菌的菌丝,定量的放入试管中;(3)然后定量的将准备好DNA提取缓冲液注入带有植株病斑或者稻瘟病菌菌丝的试管中;(4)将上述带有植株病斑或者稻瘟病菌菌丝的试管放入湿热灭菌锅中进行水浴处理,时长10min-12min;(5)将水浴处理后的试管放置到常温状态下进行自然冷却;(6)试管内的混合液经自然冷却后,导入相应的过滤装置中进行过滤,从而过滤掉混合液中残留的固态杂质;(7)将过滤后的混合液定量均匀的注入PCR-96孔板内,再将带有混合液的PCR-96孔板安置到-20℃的环境下进行冷藏,以供后续检测使用;(8)检测时取出PCR-96孔板,检测装置的探针上标记酶、生物素、放射性同位素,探针对PCR-96孔板内的混合液进行数据采集,通过与计算机内的DNA检测系统的标准对照表进行对比,计算对比度,自动生成DNA检测数据表。2.根据权利要求1所述的一种对水稻的稻瘟...
【专利技术属性】
技术研发人员:黄永相,李伟,郭建夫,李东,祝敏丹,
申请(专利权)人:广东海洋大学,
类型:发明
国别省市:广东,44
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