脆弱拟杆菌提取物在制备防治炎症性肠病的药物或食品中的应用制造技术

本发明专利技术涉及脆弱拟杆菌提取物在制备防治炎症性肠病的药物或食品中的应用，该脆弱拟杆菌提取物为脆弱拟杆菌荚膜多糖A。本发明专利技术意外地制备得到了分子量为5‑70KD的脆弱拟杆菌荚膜多糖A，并且意外地发现分子量为5～70KD的荚膜多糖A具有更好的防治炎症性肠病的功能，其效果远好于从脆弱拟杆菌NCTC 9343中提取得到的分子量为110KD的荚膜多糖A。

Application of Bacteroides fragilis extract in the preparation of drugs or food for the prevention and treatment of inflammatory bowel disease

The present invention relates to the application of the extract of Bacillus fragilis in the preparation of medicine or food for the prevention and treatment of inflammatory bowel disease. The extract of Bacillus fragilis is capsular polysaccharide A of Bacillus fragilis. The capsular polysaccharide A of Bacillus fragilis with molecular weight of 5 70 KD was prepared by accident, and it was found that the capsular polysaccharide A with molecular weight of 5 to 70 KD had better function in preventing and treating inflammatory bowel disease than the capsular polysaccharide A with molecular weight of 110 KD obtained from Bacillus fragilis NCTC 9343.

【技术实现步骤摘要】
脆弱拟杆菌提取物在制备防治炎症性肠病的药物或食品中的应用
本专利技术涉及脆弱拟杆菌的应用
，特别是涉及一种脆弱拟杆菌提取物在制备防治炎症性肠病的药物或食品中的应用。
技术介绍
炎症性肠病(Inflammatoryboweldisease，IBD)是一组不明原因的慢性肠道炎症性疾病，包括溃疡性结肠炎(Ulcerativecolitis，UC)和克罗恩病(Crohn'sdisease，CD)。前者又称非特异性溃疡性结肠炎，是一种原因不明的直肠和结肠的炎症，病变主要限于大肠黏膜与黏膜下层。后者为一种慢性肉芽肿性炎症，病变可累及胃肠道各部位，而以末段回肠及临近结肠为主，多呈节段性、非对称性分布(蒋蔚茹.炎症性肠病的认识与治疗进展[J].上海医药,2010,05:207-210.)。炎症性肠病的发病机制尚未阐明，目前认为是基因上易感人群对肠道共生微生物产生过度的先天或后天免疫反应所致(蒋蔚茹.炎症性肠病的认识与治疗进展[J].上海医药,2010,05:207-210.)。西方国家IBD发病年龄多呈双峰状分布，UC第一个发病年龄高峰为30-39岁，CD为20-29岁，UC和CD第二个发病年龄高峰为60-70岁，以第一个高峰病例数为多。亚洲国家IBD发病年龄第二高峰少见，UC和CD发病年龄高峰较西方国家延迟10年。近20年来，IBD病例数在国内迅猛增加。1989-2007年间我国IBD文献报道病例数逐渐增多(HuRW，OuyangQ，ChenXetal.AnalysisofthearticlesofinflammatoryboweldiseaseintheliteratureChinainrecentfifteenyears[J].ChinJGastroenterol，2007，12:74-77.)。Jiang等(JiangXL，CuiHF.Ananalysisof10218ulcerativecolitiscasesinChina[J].WorldJGastroenterol，2002，8(1):158-161.)分析了1981-2000年国内文献报道的10218例UC患者，发现10年间病例数上升了3.08倍。Wang等(WangY，OuyangQ；APDW2004ChineseIBDworkinggroup.UlcerativecolitisinChina:retrospectiveanalysisof3100hospitalizedpatients[J].JGastroenterolHepatol，2007，22(9):1450-1455.)和中国IBD工作组(APDW2004ChineseIBDWorkingGroup.Retrospectiveanalysisof515casesofCrohn’sdiseasehospitalizationinChina:nationwidestudyfrom1990to2003[J].JGastroenterolHepatol，2006，21(6):1009-1015.)对1990-2003年间IBD住院患者进行回顾性研究，共收集3100例UC和515例CD患者，结果显示我国IBD住院患者呈逐渐增加趋势，粗略推测UC患病率约为11.6/10万，CD约为1.4/10万，增长情况与日本、韩国、新加坡等国家相似。目前，对于炎症性肠病，其治疗药物主要包括以下几类：(1)氨基水杨酸类制剂、(2)肾上腺糖皮质激素(GCS)、(3)免疫抑制剂、(4)单克隆抗体、(5)抗生素。但是上述药物存在以下缺陷：氨基水杨酸类制剂有较大毒副作用，比如柳氮磺吡啶(Sulfasalazine，SASP)，其代谢产物磺胺吡啶会产生不良反应；GCS长期使用易产生不良反应；传统免疫抑制剂(比如硫唑嘌呤(AZA)、6-巯基嘌呤(6–MP)及氨甲蝶呤(MTX))并不是对所有IBD患者均有效，而且不良反应较多；新型免疫抑制剂(比如环孢素A(CsA)、他克莫司(FK506)和霉菌酚(MMF)等对IBD有效，但其疗效和安全性尚有待于进一步评价；目前对于中、重度IBD和高危病人，若采用前三种传统药物无效的，则会立即采用单克隆抗体诱导缓解，但是单克隆抗体价格昂贵，并且也存在潜在的危险性，如使用IFX的病人罹患结核或组织胞浆菌病等感染的可能性明显增加，此外，神经系统脱髓鞘病变、充血性心力衰竭以及淋巴瘤等疾病的患病率也有提高；抗生素也只能酌情选用，具有恶心、呕吐、肢端感觉异常等不良反应。传统药物如氨基水杨酸类制剂、糖皮质激素、免疫抑制剂等不良反应较多，而单克隆抗体药物又价格昂贵，目前，对于炎症性肠病尚缺乏有效的治疗手段。因此有必要研究新型的能够治疗炎症性肠病的有效药物。脆弱拟杆菌(bacteroidesfragilis)是革兰氏阴性厌氧细菌中拟杆菌属的成员，属于拟杆菌门，完全不同于厚壁菌门的双歧杆菌、乳酸菌等。拟杆菌属有25个菌种，仅来自人类的有10个菌种，仅来自动物的有10个菌种，来自人和动物的有5个菌种。脆弱拟杆菌是一种专性厌氧细菌，依培养基的不同和生长阶段的不同，菌体形态呈现多形性，一般条件下菌体为杆状、两端钝圆、着色深，中间色浅且不均匀，有荚膜、无芽胞、无动力，有些有空泡，菌体长短不一。依据能否合成、分泌脆弱拟杆菌肠毒素(BFT)可将其分为产肠毒素型脆弱拟杆菌(EnterotoxigenicBacteroidesfragilis,ETBF)和非产肠毒素型脆弱拟杆菌(NontoxigenicBacteroidesfragilis，NTBF)。脆弱拟杆菌作为人及动物肠道正常菌群的一部分，主要存在于结肠中。此外，呼吸道、胃肠道及泌尿生殖道粘膜也可定植生长。
技术实现思路
基于此，本专利技术提供了一种脆弱拟杆菌(bacteroidesfragilis)提取物的新应用。具体技术方案如下：脆弱拟杆菌提取物在制备防治炎症性肠病的药物或食品中的应用，所述脆弱拟杆菌提取物中含有脆弱拟杆菌荚膜多糖A。在其中一些实施例中，所述脆弱拟杆菌荚膜多糖A的分子量为5～75KD。在其中一些实施例中，所述脆弱拟杆菌荚膜多糖A的分子量为15KD～65KD；在其中一些实施例中，所述脆弱拟杆菌荚膜多糖A的分子量为25KD～55KD。在其中一些实施例中，所述脆弱拟杆菌荚膜多糖A的分子量为35KD～45KD。在其中一些实施例中，所述脆弱拟杆菌提取物中脆弱拟杆菌荚膜多糖A的含量为60-75wt％。在其中一些实施例中，所述脆弱拟杆菌为保藏编号为CGMCCNo.10685的脆弱拟杆菌ZY-312。在其中一些实施例中，所述脆弱拟杆菌提取物的制备方法包括以下步骤：(1)将发酵培养后的脆弱拟杆菌菌液离心沉淀，收集第一沉淀物，取所述第一沉淀物加入65-72℃的水，溶解后再加入苯酚溶液，保持65-72℃搅拌25-35min，离心，收集第一上清液；(2)将步骤(1)中收集的第一上清液用乙醚萃取去除苯酚，再去除残留的乙醚，收集水相溶液；(3)在步骤(2)中收集到的水相溶液中加入无水乙醇至乙醇的终浓度为75-85v/v％，醇沉，离心，收集第二沉淀物；(4)取所述第二沉淀物，加水配制成混悬液，再调节pH为6.5-7.5，离心，收集第二上清液，透析除盐，冷冻干燥，即得所述脆弱拟本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.脆弱拟杆菌提取物在制备防治炎症性肠病的药物或食品中的应用，其特征在于，所述脆弱拟杆菌提取物中含有脆弱拟杆菌荚膜多糖A。

【技术特征摘要】
1.脆弱拟杆菌提取物在制备防治炎症性肠病的药物或食品中的应用，其特征在于，所述脆弱拟杆菌提取物中含有脆弱拟杆菌荚膜多糖A。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述脆弱拟杆菌荚膜多糖A的分子量为5～75KD。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述脆弱拟杆菌荚膜多糖A的分子量为35KD～45KD。4.根据权利要求1-3任一项所述的应用，其特征在于，所述脆弱拟杆菌为保藏编号为CGMCCNo.10685的脆弱拟杆菌ZY-312。5.根据权利要求1-3任一项所述的应用，其特征在于，所述脆弱拟杆菌提取物的制备方法包括以下步骤：(1)将发酵培养后的脆弱拟杆菌菌液离心沉淀，收集第一沉淀物，取所述第一沉淀物加入65-72℃的水，溶解后再加入苯酚溶液，保持65-72℃搅拌25-35min，离心，收集第一上清液；(2)将步骤(1)中收集的第一上清液用乙醚萃取去除苯酚，再去除残留的乙醚，收集水相溶液；(3)在步骤(2)中收集到的水相溶液中加入无水乙醇至乙醇的终浓度为75-85v/v％，醇沉，离心，收集第二沉淀物；(4)取所述第二沉淀物，加水配制成混悬液，再调节pH为6.5-7.5，离心，收集...

【专利技术属性】
技术研发人员：智发朝，王晔，刘洋洋，白杨，王从峰，
申请(专利权)人：广州知易生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44