The present invention relates to an immunoassay method for hepatitis B virus surface antibody in the field of photostimulated chemiluminescence technology. The method comprises the following steps: (1) chemiluminescence immunoreaction is carried out on the test sample containing hepatitis B virus surface antibody, the first and second readings of chemiluminescence are stimulated and recorded, and the difference between the second and the first readings is recorded as A. (2) Make the first standard curve and the second standard curve respectively according to the increase of the first and second readings of a series of known reference materials containing HBsAb; (3) Compare the first and second readings of samples containing HBsAb with the first standard curve and the second standard curve to determine the sample. Benzene concentration. The invention also relates to a system for identifying HBsAg immunoassay and a kit for detecting HBsAg.
【技术实现步骤摘要】
免疫测定方法、用于鉴定免疫测定的系统和试剂盒本申请是申请日为2016年11月22日,申请号为201611034237.7,专利技术名称为“免疫测定方法、用于鉴定免疫测定的系统和试剂盒”的中国专利申请的分案申请。
本专利技术涉及光激化学发光
,具体涉及一种乙型肝炎病毒表面抗体免疫测定方法、一种用于鉴定乙型肝炎病毒表面抗体免疫测定的系统和一种检测乙型肝炎病毒表面抗体的试剂盒。
技术介绍
免疫学检测是基于抗原抗体特异性反应的原理进行的,由于其可以利用同位素、酶、化学发光物质等对被测物进行显示或信号的放大,因此常被用于检测蛋白质、激素等微量生物活性物质。化学发光免疫分析则是近年来发展较迅速的非放射性免疫检测技术,其原理是利用化学发光物质进行信号的放大,并借助其发光强度,对免疫结合过程进行直接测定,该法已成为免疫学检测的重要方向之一。光激化学发光法是化学发光分析技术的常用方法之一,可用于研究生物分子间的相互作用,临床上主要用于疾病的检测。该技术整合了高分子微粒技术、有机合成、蛋白质化学及临床检测等相关领域的研究。它通过感光微粒和发光微粒在一定范围内结合,产生离子氧能量的传递,发出光信号,从而对待测样本进行检测。其中,感光微粒内部填充有感光化合物,而发光微粒内部填充有发光化合物和镧系元素。在红色激光(600~700nm)的激发下,感光微粒释放出高能态的单线态氧离子(4μS),其传播距离约为200nm。当感光微粒和发光微粒的距离足够接近时,感光微粒释放的单线态氧离子能到达发光微粒,并通过一系列的化学反应,发射出520~620nm高能级的光,而被仪器检测到。在本反应 ...
【技术保护点】
1.一种乙型肝炎病毒表面抗体的免疫测定方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:(1)对含乙型肝炎病毒表面抗体的待测样本进行化学发光免疫反应,激发和记录化学发光的第一次和第二次读数,并将第二次和第一次读数之间的差值增幅记为A;(2)根据含乙型肝炎病毒表面抗体的已知的一系列标准物质的第一次读数和两次读数的增幅A’分别做标准曲线;(3)将含乙型肝炎病毒表面抗体的待测样本的第一次读数和两次读数的增幅A与标准曲线进行比较,来确定样本的浓度。
【技术特征摘要】
1.一种乙型肝炎病毒表面抗体的免疫测定方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:(1)对含乙型肝炎病毒表面抗体的待测样本进行化学发光免疫反应,激发和记录化学发光的第一次和第二次读数,并将第二次和第一次读数之间的差值增幅记为A;(2)根据含乙型肝炎病毒表面抗体的已知的一系列标准物质的第一次读数和两次读数的增幅A’分别做标准曲线;(3)将含乙型肝炎病毒表面抗体的待测样本的第一次读数和两次读数的增幅A与标准曲线进行比较,来确定样本的浓度。2.根据权利要求1所述的免疫测定方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:(a1)将含乙型肝炎病毒表面抗体的待测样本与第一抗原包被的发光微粒、标记物标记的第二抗原混合,温育得混合液;(a2)第一次读数:在步骤(a1)的混合液中再加入标记物特异结合物标记的感光微粒,温育后进行激发光照射并检测发射光量,光子计数器读数,计为RLU1;(a3)第二次读数:将步骤(a2)中进行第一次读数后的反应溶液进一步温育后,再进行激发光照射并检测发射光量,光子计数器读数,计为RLU2;(a4)计算样本第二次读数所得信号值相对于第一次读数所得信号值的增幅A,A=(RLU2/RLU1-1)×100%;(a5)根据含乙型肝炎病毒表面抗体的已知的一系列标准物质的两次读数的增幅A’做标准曲线;(a6)通过A值确定待测样本中乙型肝炎病毒表面抗体的浓度是在标准曲线的上升区间或者是在下降区间,再将待测样本的RLU1代入其对应的标准曲线计算浓度。3.根据权利要求2所述的免疫测定方法,其特征在于,发光微粒是指填充有发光化合物和镧系元素化合物的高分子微粒;所述感光微粒是填充有感光化合物的高分子微粒,在红色激光激发下,可以产生单线态氧离子。4.根据权利要求2所述的免疫测定方法,其特征在于,步骤(a2)和(a3)中,以600~700nm的红色激发光照射,检测反应溶液的发射光量;发射光的检测波长为520~620nm。5.根据权利要求2所述的免疫测定方法,其特征在于,所述抗原是指具有免疫原性的物质;所述第一抗原和第二抗原指可特异性结合于所述乙型肝炎病毒表面抗体的抗原。6.一种用于鉴定乙型肝炎病毒表面抗体免疫测定的系统,所述系统包括:免疫反应装置,其用于实施化学发光免疫反应,化学发光免疫反应激发和计数装置,其用于激发和记录化学发光的第一次和第二次读数,并将第二次和第一次读数之间的差值增幅记为A,处理器,其用于根据含乙型肝炎病毒表面抗体的已知的一系列标准物质的第一次读数和两次读数的增幅A分别做标准曲线,将含乙型肝炎病毒表面抗体的待测样本的第一次读数和两次读数的增幅A’与标准曲线进行比较,来确定样本的浓度。7.根据权利要求6所述的系统,其特征在于,所述系统的使用方法包括如下步骤:(1)将含乙型肝炎病毒表面抗体的待测样本与第一抗原包被的发光微粒、标记物标记的第二抗原混合,温育得混合液;(2)第一次读数:在步骤(1)的混合液中再加入标记物特异结合物标记的感光微粒,温育后进行激发光照射并检测发射光量,光子计数器读数,计为RLU1;(3)第二次读数:将步骤(2)中进行第一次读数后的反应溶液进一步温育后,再进行激发光照射并检测发射光量,光子计数器读数,计为RLU2;(4)计算样本第二次...
【专利技术属性】
技术研发人员:杨阳,赵卫国,张向辉,
申请(专利权)人:博阳生物科技上海有限公司,
类型:发明
国别省市:上海,31
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