快速筛选防治褐飞虱杀虫剂的试剂盒及其方法技术

本发明专利技术公开了一种快速筛选防治褐飞虱杀虫剂的试剂盒及其方法，它包括9个检测瓶和对应的9个对照瓶，其中，9个检测瓶的瓶内壁和瓶底面均覆盖有9种药膜，每种药膜都含有一种杀虫剂，分别为烯啶虫胺、呋虫胺、噻虫嗪、噻虫胺、毒死蜱、异丙威环氧虫啶、氟啶虫胺腈或醚菊酯；本试剂盒操作简单，易于向农民推广；可以在田间使用，不需要在室内完成；节省时间，短时间即可检测出褐飞虱对药剂的敏感性；储存条件简单，货架期长。

A Kit for Rapid Screening of Insecticides against Nilaparvata lugens and Its Methods

The invention discloses a kit for rapid screening of insecticides against Brown Planthopper and its method, which comprises nine detection bottles and nine corresponding control bottles. Among them, the inner wall and bottom of nine detection bottles are covered with nine kinds of drug films, each of which contains one kind of insecticide, namely nicotinamide, furosemide, thiazide, thiamethoxam, chlorpyrifos, isopropyl epoxypyrimidine and fluridine. The kit is simple to operate and easy to popularize to farmers. It can be used in the field without being completed indoors. It can save time and detect the sensitivity of brown planthopper to insecticides in a short time. The storage conditions are simple and the shelf life is long.

【技术实现步骤摘要】
快速筛选防治褐飞虱杀虫剂的试剂盒及其方法
本专利技术涉及植物保护学农药学领域，具体涉及一种快速筛选防治褐飞虱杀虫剂的试剂盒及其方法。
技术介绍
褐飞虱Nilaparvatalugens属半翅目飞虱科。褐飞虱为单食性害虫，只能在水稻和普通野生稻上取食和繁殖，对我国及东南亚大部分国家的稻区产生严重的影响。长期以来，对褐飞虱的防治以化学防治为主，但由于杀虫剂的长期广泛使用，导致褐飞虱对多种杀虫剂的敏感性逐年降低。近几年的田间褐飞虱抗药性监测结果表明其对一些常用杀虫剂品种已产生了中等水平甚至高水平抗性。因此，快速准确检测褐飞虱对不同药剂的敏感程度，快速准确选择用药，对褐飞虱有效防治及延缓其抗药性的发展具有重要的指导作用。目前防治褐飞虱的常用杀虫剂有烯啶虫胺、噻虫嗪、噻虫胺、呋虫胺、毒死蜱、异丙威、环氧虫啶、氟啶虫胺腈和醚菊酯等。2017年的监测结果表明华中地区褐飞虱田间种群已对吡虫啉、噻虫嗪等产生了高水平抗性；对烯啶虫胺、毒死蜱等处于中等水平抗性；对烯啶虫胺、氟啶虫胺腈、三氟苯嘧啶敏感(未发表数据)。监测褐飞虱抗性程度方法一般是需要从田间采虫，在实验室进行试验，且一般需要3～5天才能查结果。此方法需要将褐飞虱从田间带回实验室，路途远，易造成较多数量的试虫死亡，费时费力。因此，需要一种快速筛选防治褐飞虱杀虫剂的试剂盒，对延缓褐飞虱抗药性的发展具有重要的指导作用。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的不足，提供了一种快速筛选防治褐飞虱杀虫剂的试剂盒及其方法，利用该试剂盒可以60min内快速检测褐飞虱田间种群对烯啶虫胺、呋虫胺、噻虫嗪、噻虫胺、毒死蜱、异丙威环氧虫啶、氟啶虫胺腈或醚菊酯的敏感性，用于检测的药膜玻璃管经改进贮藏期可大于10个月。本专利技术可以在田间进行，较于常规的生物测定(稻苗浸渍法、点滴法等)方法，减少了必须将田间的虫子转移到室内的过程，减少了工作量，且大大缩短了测定时间。加入成膜剂，延长了用于诊断的药膜玻璃管的货架期，便于保存。为实现上述目的，本专利技术所设计一种快速筛选防治褐飞虱杀虫剂的试剂盒，它包括9个检测瓶和对应的9个对照瓶，其中，9个检测瓶的瓶内壁和瓶底面均覆盖有9种药膜，每种药膜都含有一种杀虫剂，分别为烯啶虫胺、呋虫胺、噻虫嗪、噻虫胺、毒死蜱、异丙威环氧虫啶、氟啶虫胺腈或醚菊酯；9个检测瓶中药膜的含药量以及杀虫剂与成膜剂重量比分别为：醚菊酯117.72～268.96ng/cm2，醚菊酯和成膜剂重量比为1:1841；噻虫嗪803.8～1525.19ng/cm2，噻虫嗪和成膜剂重量比为1:195；噻虫胺257.16～506.15ng/cm2，噻虫胺和成膜剂重量比为1:1160；烯啶虫胺9.05～18.90ng/cm2，烯啶虫胺和成膜剂重量比为1:24000；呋虫胺504.32～871.32ng/cm2，呋虫胺和成膜剂重量比为1:342；异丙威4.77～6.36ng/cm2，异丙威和成膜剂重量比为1:54545；毒死蜱150.24～366.70ng/cm2，毒死蜱和成膜剂重量比为1:1433；环氧虫啶72.88～110.61ng/cm2，环氧虫啶和成膜剂重量比为1:3250；氟啶虫胺腈895.18～1336.92ng/cm2，氟啶虫胺腈和成膜剂重量比为1:194；对照瓶的瓶内壁和瓶底面均覆盖有成膜剂。进一步地，所述试剂盒还包括吸虫器、白纸板和毛笔。再进一步地，所述成膜剂选自聚醋酸乙烯酯、水性丙烯酸树脂和壳聚糖的一种。再进一步地，所述成膜剂为壳聚糖，使用将其制备成壳聚糖水溶液，其质量分数为1.00～1.50％，pH值为4。再进一步地，所述试剂盒包括吸虫器、白纸板、毛笔、9个检测瓶和对应的9个对照瓶，其中，9个检测瓶的瓶内壁和瓶底面均覆盖有9种药膜，每种药膜都含有一种杀虫剂，分别为烯啶虫胺、呋虫胺、噻虫嗪、噻虫胺、毒死蜱、异丙威环氧虫啶、氟啶虫胺腈或醚菊酯；9个检测瓶中药膜的含药量以及杀虫剂与成膜剂重量比分别为：醚菊酯171.23ng/cm2，醚菊酯和成膜剂重量比为1:1841；噻虫嗪983.8ng/cm2，噻虫嗪和成膜剂重量比为1:195；噻虫胺402.13ng/cm2，噻虫胺和成膜剂重量比为1:1160；烯啶虫胺13.65ng/cm2，烯啶虫胺和成膜剂重量比为1:24000；呋虫胺693.12ng/cm2，呋虫胺和成膜剂重量比为1:342；异丙威5.13ng/cm2，异丙威和成膜剂重量比为1:54545；毒死蜱250.26ng/cm2，毒死蜱和成膜剂重量比为1:1433；环氧虫啶89.61ng/cm2，环氧虫啶和成膜剂重量比为1:3250；氟啶虫胺腈996.32ng/cm2，氟啶虫胺腈和成膜剂重量比为1:194；对照瓶的瓶内壁和瓶底面均覆盖有成膜剂。再进一步地，所述检测瓶由以下方法制备而成：1)根据不同检测瓶中的药膜含药量、以及杀虫剂和成膜剂重量比称取称取杀虫剂和成膜剂，备用；其中，醚菊酯117.72～268.96ng/cm2，醚菊酯和成膜剂重量比为1:1841；噻虫嗪803.8～1525.19ng/cm2，噻虫嗪和成膜剂重量比为1:195；噻虫胺257.16～506.15ng/cm2，噻虫胺和成膜剂重量比为1:1160；烯啶虫胺9.05～18.90ng/cm2，烯啶虫胺和成膜剂重量比为1:24000；呋虫胺504.32～871.32ng/cm2，呋虫胺和成膜剂重量比为1:342；异丙威4.77～6.36ng/cm2，异丙威和成膜剂重量比为1:54545；毒死蜱150.24～366.70ng/cm2，毒死蜱和成膜剂重量比为1:1433；环氧虫啶72.88～110.61ng/cm2，环氧虫啶和成膜剂重量比为1:3250；氟啶虫胺腈895.18～1336.92ng/cm2，氟啶虫胺腈和成膜剂重量比为1:194；2)杀虫剂置于离心管中，加入丙酮稀释得到稀释液；3)然后加入丙酮、成膜剂和水；混匀均匀，得到药液，并将药液在瓶底和瓶壁上涂抹均匀，成膜晾干，即得到检测瓶，其中，每个检测瓶的药膜中含有一种杀虫剂，其杀虫剂为烯啶虫胺、呋虫胺、噻虫嗪、噻虫胺、毒死蜱、异丙威环氧虫啶、氟啶虫胺腈和醚菊酯中任意一种。本专利技术提供了一种上述试剂盒筛选杀虫剂的方法，包括以下步骤：1)向不同检测瓶中吸入15～20头健康的褐飞虱(待检测田间品系)3龄若虫，培养55～65min后检查死亡率；记录活虫数，对照组死亡率≤5％，计算检测瓶中褐飞虱的校正死亡率，公式如下：2)诊断结果判断标准：当某个检测瓶的校正死亡率大于等于90％时，即认为褐飞虱田间种群对该检测瓶的对应药剂比较敏感，田间推荐继续使用该药剂对褐飞虱进行防治。本专利技术的有益效果：本试剂盒操作简单，易于向农民推广；可以在田间使用，不需要在室内完成；节省时间，短时间即可检测出褐飞虱对药剂的敏感性；储存条件简单，货架期长。附图说明图1为不加成膜剂与加入成膜剂的货架期时长示意图。说明加入成膜剂可以延长货架期。图2为褐飞虱田间种群在烯啶虫胺诊断剂量下的死亡率与其抗性倍数的相关性示意图。说明褐飞虱田间种群在烯啶虫胺诊断剂量下的死亡率与其抗性倍数显著相关(p<0.001，在0.01水平显著相关)。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术作进一步的详细描述，以便本领域技术人员理解。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种快速筛选防治褐飞虱杀虫剂的试剂盒，其特征在于：它包括9个检测瓶和对应的9个对照瓶，其中，9个检测瓶的瓶内壁和瓶底面均覆盖有9种药膜，每种药膜都含有一种杀虫剂，分别为烯啶虫胺、呋虫胺、噻虫嗪、噻虫胺、毒死蜱、异丙威环氧虫啶、氟啶虫胺腈或醚菊酯；9个检测瓶中药膜的含药量以及杀虫剂与成膜剂重量比分别为：醚菊酯117.72～268.96ng/cm2，醚菊酯和成膜剂重量比为1:1841；噻虫嗪803.8～1525.19ng/cm2，噻虫嗪和成膜剂重量比为1:195；噻虫胺257.16～506.15ng/cm2，噻虫胺和成膜剂重量比为1:1160；烯啶虫胺9.05～18.90ng/cm2，烯啶虫胺和成膜剂重量比为1:24000；呋虫胺504.32～871.32ng/cm2，呋虫胺和成膜剂重量比为1:342；异丙威4.77～6.36ng/cm2，异丙威和成膜剂重量比为1:54545；毒死蜱150.24～366.70ng/cm2，毒死蜱和成膜剂重量比为1:1433；环氧虫啶72.88～110.61ng/cm2，环氧虫啶和成膜剂重量比为1:3250；氟啶虫胺腈895.18～1336.92ng/cm2，氟啶虫胺腈和成膜剂重量比为1:194；对照瓶的瓶内壁和瓶底面均覆盖有成膜剂。...

【技术特征摘要】
1.一种快速筛选防治褐飞虱杀虫剂的试剂盒，其特征在于：它包括9个检测瓶和对应的9个对照瓶，其中，9个检测瓶的瓶内壁和瓶底面均覆盖有9种药膜，每种药膜都含有一种杀虫剂，分别为烯啶虫胺、呋虫胺、噻虫嗪、噻虫胺、毒死蜱、异丙威环氧虫啶、氟啶虫胺腈或醚菊酯；9个检测瓶中药膜的含药量以及杀虫剂与成膜剂重量比分别为：醚菊酯117.72～268.96ng/cm2，醚菊酯和成膜剂重量比为1:1841；噻虫嗪803.8～1525.19ng/cm2，噻虫嗪和成膜剂重量比为1:195；噻虫胺257.16～506.15ng/cm2，噻虫胺和成膜剂重量比为1:1160；烯啶虫胺9.05～18.90ng/cm2，烯啶虫胺和成膜剂重量比为1:24000；呋虫胺504.32～871.32ng/cm2，呋虫胺和成膜剂重量比为1:342；异丙威4.77～6.36ng/cm2，异丙威和成膜剂重量比为1:54545；毒死蜱150.24～366.70ng/cm2，毒死蜱和成膜剂重量比为1:1433；环氧虫啶72.88～110.61ng/cm2，环氧虫啶和成膜剂重量比为1:3250；氟啶虫胺腈895.18～1336.92ng/cm2，氟啶虫胺腈和成膜剂重量比为1:194；对照瓶的瓶内壁和瓶底面均覆盖有成膜剂。2.根据权利要求1所述快速筛选防治褐飞虱杀虫剂的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括吸虫器、白纸板和毛笔。3.根据权利要求1所述快速筛选防治褐飞虱杀虫剂的试剂盒，其特征在于：所述成膜剂选自聚醋酸乙烯酯、水性丙烯酸树脂和壳聚糖的一种。4.根据权利要求1所述快速筛选防治褐飞虱杀虫剂的试剂盒，其特征在于：所述成膜剂为壳聚糖。5.根据权利要求1所述快速筛选防治褐飞虱杀虫剂的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括吸虫器、白纸板、毛笔、9个检测瓶和对应的9个对照瓶，其中，9个检测瓶的瓶内壁和瓶底面均覆盖有9种药膜，每种药膜都含有一种杀虫剂，分别为烯啶虫胺、呋虫胺、噻虫嗪、噻虫胺、毒死蜱、异丙威环氧虫啶、氟啶虫胺腈或醚菊酯；9个检测瓶中药膜的含药量以及杀虫剂与成膜剂重量比分别为：醚菊酯171.23ng/cm2，醚菊酯和成膜剂重量比为1:1841；噻虫嗪983.8ng/cm2，噻虫嗪和成膜剂重量比为1:195；噻虫胺402.13ng/cm2，噻虫胺和成膜剂重量比为1:1160；烯啶虫胺13.65ng/cm2，烯啶虫胺和成膜剂重量比为1:240...

【专利技术属性】
技术研发人员：万虎，何顺，李建洪，任志杰，毛凯凯，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：湖北,42