含芳香环基团的玫瑰烷型二萜、制备方法及在制备抗结核药物中的应用技术

本发明专利技术公开一种含芳香环基团的玫瑰烷型二萜，其特征在于结构通式如下：

Rosane diterpenoids containing aromatic ring groups, their preparation methods and applications in the preparation of anti-tuberculosis drugs

The invention discloses a rosane diterpenoid containing aromatic ring groups, which is characterized by the following general structural formula:

【技术实现步骤摘要】
含芳香环基团的玫瑰烷型二萜、制备方法及在制备抗结核药物中的应用
本专利技术涉及玫瑰烷型二萜化合物，尤其涉及一种含芳香环基团的玫瑰烷型二萜、制备方法及在制备抗结核药物中的应用。
技术介绍
月腺大戟（Euphorbiaeebracteolatae）为大戟科大戟属植物，多年生草本，药用部位为根，为中药狼毒的原植物之一，植物资源丰富，收载于《中华人民共和国药典》（2015版）中。其味苦、辛，性平，有毒，具有散结杀虫的功效。民间药用历史悠久，常用于治疗淋巴结核及肿瘤等疾病。但是，其中的抗结核活性成分尚不明确，抗结核作用机制亦不清晰。因此，迄今为止并没有以月腺大戟为原料，提取抗结核活性成份的相关报道。
技术实现思路
本专利技术是为了解决现有技术所存在的上述技术问题，提供一种含芳香环基团的玫瑰烷型二萜、制备方法及在制备抗结核药物中的应用。本专利技术的技术解决方案是：一种含芳香环基团的玫瑰烷型二萜，其特征在于结构通式如下：式中A环为芳香化的玫瑰烷型二萜，R1，R2，R3，R4，R5分别为氢原子、羟基、卤素原子、甲氧基、氨基、巯基、C1至C8脂肪酸、烷氨基或烷巯基及其光学异构体。所述R1、R3、R4、R5=H；R2=OH。所述R1、R3、R4=H；R2、R5=OH。所述R1、R4、R5=H；R2、R5=OH；R3=β-OCH3所述R1、R3、R5=H；R2、R5=OH；R4=α-OCH3。所述R1、R3、R4、R5=H；R2=。所述R3、R4、R5=H；R1、R2=OH。上述含芳香环基团的玫瑰烷型二萜的制备方法，其特征在于按照如下步骤进行：a.将月腺大戟干燥根粉碎，用质量浓度80%的乙醇加热回流提取三次，合并提取液，减压浓缩并回收乙醇，得月腺大戟浸膏；将浸膏用水分散，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇多次等体积萃取，分别减压浓缩得石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物及正丁醇萃取物；b.将石油醚萃取物与乙酸乙酯萃取物合并，进行硅胶柱层析，石油醚-丙酮按50:1，30:1，20:1，10:1，5:1，2:1，1:1梯度洗脱；c.合并石油醚-丙酮30:1至10:1洗脱流份；合并石油醚-丙酮10:1至5:1洗脱流份；d.将上述合并后的两个馏分分离，得化合物1-6含芳香环基团的玫瑰烷型二萜化合物。上述含芳香环基团的玫瑰烷型二萜在制备抗结核药物中的应用。所述含芳香环基团的玫瑰烷型二萜在制备抗结核药物中的应用是在制备抑制结核分枝杆菌乙酰基转移功能蛋白GlmU药物中的应用。本专利技术通过现代色谱、波谱技术结合高通量药物筛选，从月腺大戟中提取制备了六个含有芳香环基团的玫瑰烷型二萜类化合物。所制备的化合物具有对结核分枝杆菌的抑制活性，尤其是对结核分枝杆菌乙酰基转移功能蛋白GlmU具有抑制作用，可应用于制备抗结核药物。附图说明图1是本专利技术实施例化合物6对GlmU乙酰基转移功能的抑制作用示意图。图2是本专利技术实施例化合物6对GlmU乙酰基转移功能抑制动力学研究示意图。图3是本专利技术实施例化合物1与GlmU蛋白的相互作用Docking分析图。图4是本专利技术实施例化合物2与GlmU蛋白的相互作用Docking分析图。图5是本专利技术实施例化合物3与GlmU蛋白的相互作用Docking分析图。图6是本专利技术实施例化合物4与GlmU蛋白的相互作用Docking分析图。图7是本专利技术实施例化合物5与GlmU蛋白的相互作用Docking分析图。图8是本专利技术实施例化合物6与GlmU蛋白的相互作用Docking分析图。具体实施方式本专利技术的制备方法按照如下步骤进行：a.取月腺大戟干燥根20kg，粉碎，用质量浓度80%的乙醇加热回流提取三次，合并提取液，减压浓缩并回收乙醇，得月腺大戟浸膏3.7kg；将浸膏用水分散，依次用石油醚、乙酸乙酯及正丁醇多次等体积萃取，分别减压浓缩得石油醚萃取物192g，乙酸乙酯萃取物264g，正丁醇萃取物90g；b.将石油醚萃取物与乙酸乙酯萃取物合并，取400g进行硅胶柱层析，石油醚-丙酮（50:1，30:1，20:1，10:1，5:1，2:1，1:1）梯度洗脱；c.合并石油醚-丙酮30:1至10:1洗脱流份，共77g，记为YXH；合并石油醚-丙酮10:1至5:1洗脱流份，共45g，记为YXK；d.将上述YXH及YXK两个馏分分别经反复硅胶柱色谱、制备型中压柱色谱、制备薄层色谱、制备型液相色谱及重结晶等方法分离，得化合物1-6。一.化合物的结构测定：化合物1：白色粉末，根据HR-ESI-MSm/z271.2054[M+H]+，确定其分子式为C19H26O，UV(CH3OH)λmax202.3、279.7nm，提示含有芳香环结构。在1H-NMR（500MHz，CDCl3）谱中，δ1.02(3H,s)、2.11(3H,s)、1.01(3H,s)为三个甲基质子信号，δ7.05(1H,d,J=8.5Hz)、6.63(1H,d,J=8.5Hz)为苯环上的两个氢质子信号，δ5.57(1H,dd,J=17.5,11.0Hz)、4.97(1H,dd,J=17.5,1.5Hz)、4.88(1H,dd,J=11.0,1.5Hz)为末端双键上的三个氢质子信号，δ7.25(1H,s)为一个羟基氢信号。在13C-NMR（125MHz，CDCl3）中，共给出19个碳信号，其中δ122.6、112.5、151.1、121.9、135.7、140.9为苯环上六个碳信号，δ151.2、108.8为末端双键碳信号，综合以上波谱数据，该化合物为玫瑰烷型二萜类化合物。根据1H-1HCOSY谱，建立了三个自旋耦合体系，分别为H-1/H-2，H-6/H-7/H-8/H-14，H-11/H-12。在HMBC谱中，H-19和C-3、C-4、C-5之间远程相关，H-1和C-3、C-5之间远程相关，H-2和C-3、C-10之间远程相关，确定A环为四取代苯环结构，H-15和C-13、C-14之间远程相关，H-16和C-13之间远程相关，H-17和C-13、C-14之间远程相关，确定了C-15、C-16位末端双键。因此，综合以上波谱数据，确定了化合物1的结构。化合物2：白色粉末，根据HR-ESI-MSm/z287.2011[M+H]+，确定其分子式为C19H26O2，UV(CH3OH)λmax285.2nm，提示含有芳香环结构。在1H-NMR（600MHz，CDCl3）谱中，δ1.03(3H,s)、1.02(3H,s)、2.20(3H,s)为三个甲基质子信号，δ6.63(1H,d,J=8.4Hz)、6.52(1H,d,J=8.4Hz)为苯环上的两个氢质子信号，δ5.77(1H,dd,J=17.4,10.8Hz)，4.91(1H,d,J=17.4Hz)，4.86(1H,d,J=10.8Hz)为末端双键上的三个氢质子信号。在13C-NMR（150MHz，CDCl3）中，共给出19个碳信号，其中δ120.6、112.3、149.6、121.7、135.3、148.8为苯环上六个碳信号，δ150.2、109.3为末端双键碳信号，δ81.3为连氧碳信号。综合以上波谱数据，该化合物为玫瑰烷型二萜类化合物。根据1H-1HCOSY谱，建立了三个自旋耦合体系，分别为H-1/H-2，H-6/H-7/H-8/H-14，H-11/H-12。在HM本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种含芳香环基团的玫瑰烷型二萜，其特征在于结构通式如下：

【技术特征摘要】
1.一种含芳香环基团的玫瑰烷型二萜，其特征在于结构通式如下：式中A环为芳香化的玫瑰烷型二萜，R1，R2，R3，R4，R5分别为氢原子、羟基、卤素原子、甲氧基、氨基、巯基、C1至C8脂肪酸、烷氨基或烷巯基及其光学异构体。2.根据权利要求1所述含芳香环基团的玫瑰烷型二萜，其特征在于所述R1、R3、R4、R5=H；R2=OH。3.根据权利要求1所述含芳香环基团的玫瑰烷型二萜，其特征在于所述R1、R3、R4=H；R2、R5=OH。4.根据权利要求1所述含芳香环基团的玫瑰烷型二萜，其特征在于所述R1、R4、R5=H；R2、R5=OH；R3=β-OCH3。5.根据权利要求1所述含芳香环基团的玫瑰烷型二萜，其特征在于所述R1、R3、R5=H；R2、R5=OH；R4=α-OCH3。6.根据权利要求1所述含芳香环基团的玫瑰烷型二萜，其特征在于所述R1、R3、R4、R5=H；R2=。7.根据权利要求1所述含芳香环基团的玫瑰烷型二萜，其特征在于所述R3、R4、R5...

【专利技术属性】
技术研发人员：王超，马骁驰，马郁芳，鄢秋龙，霍晓奎，
申请(专利权)人：大连医科大学，
类型：发明
国别省市：辽宁,21