The invention provides a cultivation method for improving diosgenin content of Dioscorea zingiberensis. The detailed steps of the method include: 1) optimization of cultivation materials; 2) pre-treatment of buds and surface disinfection; 3) anther inoculation and induction; 4) callus differentiation; 5) seedling rooting; 6) identification of plant ploidy, selection of diploid flower culture regeneration plants; 7) field planting after domestication; 8) planting of Dioscorea zingiberensis. New male lines were obtained by crossing super male and female plants. The invention applies the anther culture technology to the cultivation practice of Dioscorea zingiberensis for the first time, and succeeds in obtaining the regenerated plant of Diploid Zingiber zingiberensis by anther culture, and further hybridizes the SUPERMALE and female plants in the regenerated plant of Diploid Zingiber zingiberensis, and obtains a new line of Dioscorea zingiberensis with all male Because the content of diosgenin in male plants is higher than that in female plants, the new varieties of diosgenin bred by the invention can greatly improve the content of diosgenin, and can provide a strong guarantee for the sustainable development of the industry of turmeric.
【技术实现步骤摘要】
一种提高薯蓣皂苷元含量的黄姜培育方法
本专利技术涉及药源植物培育领域,尤其涉及一种提高薯蓣皂苷元含量的黄姜培育方法。
技术介绍
黄姜,学名叫盾叶薯蓣(DioscoreazingiberensisC.H.Wright),又名火藤根、火头根,隶属于薯蓣科薯蓣属根状茎组,是多年生缠绕草质藤本植物,其形态特征为雌雄异株,根茎横生,叶厚纸质,单叶互生,三角状卵形或长卵形,叶柄盾状着生,故名盾叶薯蓣,是区别于薯蓣属其他种植物的主要特征。黄姜是我国特有种,也是我国主要的药源植物,主要分布在河南、湖北、湖南、陕西、甘肃、四川等地区,野生状态下适宜生长在亚热带地区的气温较高、光照较强的疏林或低山河谷环境,其中以陕西湖北河南三省交界地带(伏牛山脉区)产出量较大。中国是世界上最早利用薯蓣属植物作为中草药治病的国家之一。中医认为黄姜的根茎果可直接入药,具有清肺止咳、利湿通淋、通络止痛、解毒消肿的功能,可治肺热咳嗽,湿热淋痛,风湿腰痛,痈肿恶疮,跌打扭伤,蜂蜇虫咬,同时具有治疗皮肤急性化脓性感染、软组织损伤、降血脂等功效,也有降低胆固醇、抗炎、抗肿瘤等药理作用。近代研究发现,黄姜是世界上薯 ...
【技术保护点】
1.一种提高薯蓣皂苷元含量的黄姜培育方法,其特征在于:该培育方法的详细步骤如下:1)培育材料的优选:选择黄姜优良种质资源作为培育材料,并挑选田间生长健壮、无病害的雄性单株采集花蕾;2)花蕾前处理与表面消毒:在黄姜的盛花期,上午10点前采集雄性单株上的花蕾,并从中筛选出小孢子发育时期处于单核靠边期的花蕾,洗净后用湿纱布包裹装于培养皿中,在4℃冰箱放置3~5d,然后将花蕾取出,在室温下用超声波处理30min;接下来对处理后的花蕾进行表面消毒:先用75%乙醇消毒60s,蒸馏水冲洗1~2次,再用1.5%次氯酸钠消毒20~30min,蒸馏水冲洗3~4次,用滤纸吸干花蕾表面的水分;3) ...
【技术特征摘要】
1.一种提高薯蓣皂苷元含量的黄姜培育方法,其特征在于:该培育方法的详细步骤如下:1)培育材料的优选:选择黄姜优良种质资源作为培育材料,并挑选田间生长健壮、无病害的雄性单株采集花蕾;2)花蕾前处理与表面消毒:在黄姜的盛花期,上午10点前采集雄性单株上的花蕾,并从中筛选出小孢子发育时期处于单核靠边期的花蕾,洗净后用湿纱布包裹装于培养皿中,在4℃冰箱放置3~5d,然后将花蕾取出,在室温下用超声波处理30min;接下来对处理后的花蕾进行表面消毒:先用75%乙醇消毒60s,蒸馏水冲洗1~2次,再用1.5%次氯酸钠消毒20~30min,蒸馏水冲洗3~4次,用滤纸吸干花蕾表面的水分;3)花药接种与诱导:在无菌工作台上,用解剖针和镊子从上述处理后的花蕾中剥离出花药,接种在诱导培养基上,在温度26~28℃、避光的条件下培养28~35d诱导出愈伤组织;4)愈伤组织分化:当诱导出的愈伤组织长到1.5~2.5cm后,将其转接到分化培养基上,先在温度26~28℃、光照强度800~l200lx、光照时间9~11h/d的条件下培养7d,再在温度24~26℃、光照强度2000~2500lx、光照时间11~13h/d的条件下进行培养,每25d左右继代1次,直至愈伤组织分化成幼苗;5)幼苗生根:将高度在3cm左右的幼苗单株切下接种到生根培养基上,在温度24~26℃、光照强度2500~3000lx、光照时间11~13h/d的条件下培养25~30d,幼苗长出旺盛的根系,形成完整的花培再生植株;6)植株倍性鉴定,筛选出二倍体花培再生植株:运用流式细胞仪技术对花培再生植株进行倍性鉴定,以黄姜正常二倍体植株(2n=2x=20)作为参照,筛选出花培再生植株中的二倍体植株;7)驯化后大田定植:将筛选出的二倍体植株移栽到装有栽培基质的育苗杯中,放入温室,在温度20~30℃、相对湿度70~80%、自然光照的条件下驯化1个月,然后将其定植到大田里,进行常规田间管理;8)将黄姜超雄株和雌株进行杂交,获得雄性新品系:等到大田定植的黄姜二倍体植株生长发育进入花期,根据开花特性辨别出超雄株和雌株,将二者进行人工杂交授粉,收获的杂交F1代种子即为雄性新品系。2.根据权利要求1所述的一种提高薯蓣皂苷元含量的黄姜培育方法,其特征在于,所述步骤2)中筛选出小孢子发育时期处于单核靠边期的花蕾的方法为:挑取花蕾中的花药于载玻片上,滴一滴卡宝品红溶液染色,用镊子将花药捣碎使其散出花粉小孢子,然后移去花药壁残渣,盖上盖玻片,在显微镜下观察小孢子的发育时期。3.根据权利要求1所述的一种提高薯蓣皂苷元含量的黄姜培育方法,其特征在于,所述步骤2)中超声波处理的频率为40...
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