油橄榄叶提取物在制备防治胎儿酒精综合症药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及油橄榄叶提取物在制备防治胎儿酒精综合症药物中的应用，属于防治胎儿酒精综合症药物技术领域。本发明专利技术解决的技术问题为提供油橄榄叶提取物的一种新用途。即油橄榄叶提取物在制备防治胎儿酒精综合症药物中的应用。发明专利技术人研究发现，油橄榄叶提取物表现出对乙醇诱导的斑马鱼胚胎发育毒性的形态学保护，其中油橄榄叶提取物对乙醇诱导斑马鱼胚胎体内促凋亡基因的表达上调及凋亡抑制基因的表达下调分别具有一定的抑制凋亡作用。本发明专利技术发现油橄榄叶提取物能降低乙醇导致的斑马鱼胚胎发育的形态变化，抑制凋亡发生，对斑马鱼胚胎具有一定的保护功能，为胎儿酒精综合症的预防和治疗提供新的方法。

Application of Olive Leaf Extract in the Preparation of Drugs for Preventing and Curing Fetal Alcohol Syndrome

The invention relates to the application of olive leaf extract in the preparation of medicines for preventing and treating fetal alcohol syndrome, and belongs to the technical field of medicines for preventing and treating fetal alcohol syndrome. The technical problem solved by the invention provides a new use of olive leaf extract. That is, the application of olive leaf extract in the preparation of drugs for preventing and treating fetal alcohol syndrome. Inventors found that olive leaf extract exhibited morphological protection against ethanol-induced embryonic development toxicity in zebrafish. Among them, olive leaf extract inhibited the expression of apoptotic genes and inhibited the expression of apoptotic genes in ethanol-induced zebrafish embryos. The invention discovers that the olive leaf extract can reduce the morphological changes of zebrafish embryo development caused by ethanol, inhibit the occurrence of apoptosis, protect zebrafish embryo to a certain extent, and provide a new method for the prevention and treatment of fetal alcohol syndrome.

【技术实现步骤摘要】
油橄榄叶提取物在制备防治胎儿酒精综合症药物中的应用
本专利技术涉及油橄榄叶提取物在制备防治胎儿酒精综合症药物中的应用，属于防治胎儿酒精综合症药物

技术介绍
胎儿酒精综合症(fetalalcoholsyndrome，FAS)是由于孕妇在怀孕期间酗酒引起胎儿发育受损的一系列综合症状，其临床表现主要是：发育迟缓，颅面部畸形，中枢神经系统功能障碍等。由于酗酒的广泛存在，新生儿中受到酒精严重毒害的比例接近1/200，而中等程度受损的比例更高。现代医学对FAS的病因病理研究取得巨大突破，但治疗上仍需特效药物。传统研究FAS的实验模型是小鼠。大量研究表明，经过乙醇处理的斑马鱼胚胎在发育过程中也表现出相似的FAS特征，包括发育迟缓，小眼，面额畸形，中枢神经系统受损，胎儿期接触乙醇导致斑马鱼产生长期的行为异常等，因此斑马鱼被认为是研究胎儿酒精综合症理想的替代模型。斑马鱼是脊椎生物，与人类有87％的基因同源性，其胚胎透明，体外发育，在体视显微镜下可直观其发育过程中的形态变化，并且发育时间短，产卵量大，可重复性和可靠性较高，便于管理。斑马鱼已经成为世界第三大模式生物，被广泛用于药物筛选，毒理研究，生物发育研究等。油橄榄(OleaeuropaeaL.)是世界有名的木本油料树种，原产地是地中海地区。研究揭示，油橄榄叶中含有丰富的抗氧化活性成分，其中主要成分为橄榄苦苷。油橄榄叶提取物具有降血脂，降血压，预防阿尔兹海默病和癌症，抑制病毒和细菌感染，对外源化学毒物包括双酚A、阿霉素、甲状腺素、4-羟基壬烯醛等的毒害具有保护功能。王昱在《首都师范大学学报(自然科学版)》中发表的文献《油橄榄叶提取物对酒精性肝活性物质的影响》，报道了油橄榄叶提取物对乙醇导致的小鼠肝损伤的保护功能，表明了油橄榄叶提取物能够有效减轻肝组织的病理损伤，对慢性酒精性肝损伤有显著的保护作用，可作为治疗肝损伤、肝纤维化的一种具有潜在价值的药物。但是，肝损伤与FAS的发病机理不同，临床表现也不相同，为完全不同的病症。
技术实现思路
基于此，本专利技术解决的技术问题是提供油橄榄叶提取物的一种新用途。具体的，本专利技术提供油橄榄叶提取物在制备防治胎儿酒精综合症药物中的应用。优选的，油橄榄叶提取物采用热水浸提法、索氏抽提法、超声波辅助有机溶剂提取法或微波辅助有机溶剂提取法提取得到。作为其中一种优选方案，所述防治胎儿酒精综合症药物为防治乙醇对胚胎发育毒害方面的药物。作为另一优选方案，所述防治胎儿酒精综合症药物为降低乙醇所致胚胎发育形态异常的药物。作为另一优选方案，所述防治胎儿酒精综合症药物为对乙醇诱导的胚胎发育过程中Bcl-2基因表达下调和Bax基因表达上调具有抑制作用的药物。优选的，所述油橄榄叶提取物的浓度为12.5～50mg/L。本专利技术还提供橄榄苦苷在制备防治胎儿酒精综合征药物中的应用。与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：本专利技术油橄榄叶提取物能降低乙醇导致的斑马鱼胚胎发育的形态变化，抑制凋亡发生，对斑马鱼胚胎具有一定的保护功能，为胎儿酒精综合症的预防和治疗提供新的方法。附图说明图1为斑马鱼胚胎暴露于不同浓度油橄榄叶提取物(SE)后的致死率，孵化率，心率的观测结果。图2为暴露于不同浓度油橄榄叶提取物(SE)后的斑马鱼胚胎发育形态变化。图3为斑马鱼胚胎暴露于不同浓度乙醇后的致死率和孵化率结果。图4为胚胎暴露于1.5％乙醇96hpf时的畸形结果；其中，A：发育正常孵化仔鱼；B：心包水肿，尾巴打结，小眼，体短的孵化仔鱼；C:心包水肿，卵黄水肿，未孵化的胚胎。图5为不同油橄榄叶提取物降低1.5％乙醇处理斑马鱼胚胎致死率结果。图6为不同油橄榄叶提取物改善1.5％乙醇处理斑马鱼胚胎72hpf孵化率结果。图7为不同油橄榄叶提取物改善1.5％乙醇处理斑马鱼胚胎72hpf的畸形率结果。图8为不同油橄榄叶提取物改善1.5％乙醇处理斑马鱼胚胎96hpf的体长结果。图9为不同油橄榄叶提取物改善1.5％乙醇处理斑马鱼胚胎96hpf的眼睛直径结果。图10为不同油橄榄叶提取物改善1.5％乙醇处理斑马鱼胚胎55hpf的心跳结果。图11为不同油橄榄叶提取物改善1.5％乙醇处理斑马鱼胚胎/仔鱼的120hpf的吖啶橙荧光染色结果。图12为不同油橄榄叶提取物改善1.5％乙醇处理斑马鱼胚胎/仔鱼的120hpf的相对荧光强度结果。图13为不同油橄榄叶提取物改善1.5％乙醇处理斑马鱼胚胎/仔鱼120hpf的抗凋亡基因Bcl-2表达水平结果。图14为不同油橄榄叶提取物改善1.5％乙醇处理斑马鱼胚胎/仔鱼120hpf的促凋亡基因Bax表达水平结果。具体实施方式本专利技术提供油橄榄叶提取物在制备防治胎儿酒精综合症药物中的应用。专利技术人研究发现，油橄榄叶提取物表现出对乙醇诱导的斑马鱼胚胎发育毒性的形态学保护，其中油橄榄叶提取物对乙醇诱导斑马鱼胚胎体内促凋亡基因的表达上调及凋亡抑制基因的表达下调分别具有一定的抑制凋亡作用。其中，油橄榄叶提取物可以采用本领域常用的方法进行提取得到，其提取溶剂可以为水或者常用的有机溶剂，比如醇。优选的，油橄榄叶提取物采用热水浸提法、索氏抽提法、超声波辅助有机溶剂提取法或微波辅助有机溶剂提取法提取得到。经分析，油橄榄叶提取物的主要成分为橄榄苦苷。作为其中一种优选方案，所述防治胎儿酒精综合症药物为防治乙醇对胚胎发育毒害方面的药物。作为另一优选方案，所述防治胎儿酒精综合症药物为降低乙醇所致胚胎发育形态异常的药物。作为另一优选方案，所述防治胎儿酒精综合症药物为对乙醇诱导的胚胎发育过程中Bcl-2基因表达下调和Bax基因表达上调具有抑制作用的药物。优选的，所述油橄榄叶提取物的浓度为12.5～50mg/L。本专利技术还提供橄榄苦苷在制备防治胎儿酒精综合征药物中的应用。下面结合实施例对本专利技术的具体实施方式做进一步的描述，并不因此将本专利技术限制在所述的实施例范围之中。实施例1油橄榄叶提取物的制备以及对斑马鱼胚胎保护作用的形态学研究1、油橄榄叶提取物的制备(1)样品预处理取油橄榄鲜叶于阴凉干燥通风处自然阴干，阴干后40℃干燥至恒重，粉碎过60目筛，粉末备用。(2)热水浸提法称取粉末100g，加1L纯水，55℃浸提210min，浸提后5000r/min离心10min，上清液用旋转蒸发仪浓缩至100mL，冷冻干燥得制备物HWE。(3)索氏抽提法称取粉末100g，加3.5L60％乙醇，80℃索氏抽提105min，5000r/min离心10min，上清液用旋转蒸发仪浓缩至100mL，冷冻干燥得制备物SE。(4)超声波辅助有机溶剂提取法称取粉末100g，加2L60％乙醇，35kHZ，150W超声波提取50min，50000r/min离心10min，上清液用旋转蒸发仪浓缩至100mL，冷冻干燥得制备物UAE。(5)微波辅助有机溶剂提取法称取粉末100g，加2L80％乙醇，450w微波加热70s，5000r/min离心10min，上清液用旋转蒸发仪浓缩至100mL，冷冻干燥得制备物MAE。2、分析测定油橄榄叶制备物中的多酚含量和成分采用福林酚法测定制备物HWE、SE、UAE和MAE的总多酚含量。HPLC法测定制备物HWE、SE、UAE和MAE中的5种多酚类化合物(茶多酚、儿茶素、香草醛、芦丁和橄榄苦苷)的含量。测定方法如下：称取油本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.油橄榄叶提取物在制备防治胎儿酒精综合症药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.油橄榄叶提取物在制备防治胎儿酒精综合症药物中的应用。2.根据权利要求1所述的油橄榄叶提取物在制备防治胎儿酒精综合症药物中的应用，其特征在于：所述油橄榄叶提取物采用热水浸提法、索氏抽提法、超声波辅助有机溶剂提取法或微波辅助有机溶剂提取法提取得到。3.根据权利要求1所述的油橄榄叶提取物在制备防治胎儿酒精综合症药物中的应用，其特征在于：所述防治胎儿酒精综合症药物为防治乙醇对胚胎发育毒害方面的药物。4.根据权利要求1所述的油橄榄叶提取物在制备防治胎儿酒精综合症药物中的应...

【专利技术属性】
技术研发人员：王维香，温巧，李艳，
申请(专利权)人：西华大学，
类型：发明
国别省市：四川,51