用于确定对象的细胞介导的免疫能力的方法技术

本发明专利技术涉及用于确定对象的细胞介导的免疫能力的方法。所述方法包括对包含来自所述对象的免疫细胞的样品进行细胞介导的免疫测定(CMI)。所述方法还包括体外检测对肽池的免疫响应，其中，所述肽池由至少3种病毒抗原衍生。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于确定对象的细胞介导的免疫能力的方法
本专利技术涉及用于确定对象的细胞介导的免疫能力的方法。特别地，该方法包括对包含免疫细胞的样品进行细胞介导的免疫测定并检测对至少三种病毒抗原的免疫响应，所述免疫细胞例如从对象获得的外周血单核细胞(PBMC)。
技术介绍
免疫能力涉及个体中正常起作用的免疫响应的存在，包括适应性(T细胞和B细胞)免疫响应和固有(补体和Toll样受体)免疫响应。设计用于测量免疫能力(特别是细胞介导的免疫能力)的测定可用于监测供体对抗原的T细胞响应。对个体的免疫能力，特别是其发动细胞介导的免疫响应的一般能力，进行测量或监测是可取的。例如，免疫能力评估对于临床医生来说可用于若干疾病状况(包括移植、癌症、自身免疫疾病、HIV和疫苗试验)。提供免疫功能测量的测定包括市售产品CylexImmunknow和QFTMonitor。混合淋巴细胞反应(MLR)也可用于评估个体的免疫响应。CylexImmunknow测量用PHA刺激后全血中ATP的产生。这依赖于血液样品中包含的细胞的非特异性刺激。该测定对测量免疫功能的有效性得到了不同的结果(Lipschultzetal.(2014))。提供对免疫功能的定性和定量测量(QuantiferonPackInsert2014)。特别地，QFM涉及用固有(TLR介导的)+适应性(TCR介导的)抗原的组合刺激全血。通过ELISA检测从响应于抗原的细胞分泌的IFNγ。QFM读数使得供体分为3类：低(<15IU/mLIFNγ)、中(15-1000IU/mLIFNγ)和高(IU/mLIFNγ)。研究界已将混合淋巴细胞反应(MLR)测定用作T细胞功能的预测因子(Manjietal.(1975))。特别地，MLR测定涉及将PBMC样品与来自对照的PBMC(处理以防止增殖)混合，添加放射性染料，并且通过放射性染料的衰变来测量样品PBMC的增殖。
技术实现思路
本专利技术人已经确定，可以通过使用选择的病毒抗原来确定个体的细胞介导的免疫能力。通过选择合适的病毒抗原池，可以确定各种个体的免疫能力，从而允许开发用于测试各种个体的免疫能力的单一测定系统。根据本专利技术，提供一种用于确定对象的细胞介导的免疫能力的方法，其中所述方法包括对包含免疫细胞的样品进行细胞介导的免疫测定(CMI)，所述免疫细胞例如来自对象的外周血单核细胞(PBMC)，所述方法包括体外检测对肽池的免疫响应，其中所述肽池由至少三种病毒抗原衍生而来。根据权利要求1所述的方法，其中所述池或肽由至少4种、5种或6种病毒抗原衍生而来。在优选的实施方式中，所述肽池由3种、4种或5种病毒抗原衍生而来。在一个方面，所述病毒抗原选自人3型腺病毒的六邻体蛋白、流感病毒的基质蛋白1(H3N2)、爱泼斯坦巴尔病毒(EpsteinBarrvirus)的BZLF-1蛋白、流感病毒的核衣壳蛋白、呼吸道合胞病毒的融合糖蛋白G0。在本专利技术的一个方面，所述病毒抗原由人3型腺病毒的六邻体蛋白、呼吸道合胞病毒的融合糖蛋白G0和流感病毒的核衣壳蛋白组成。在本专利技术的另一个方面，所述病毒抗原由人3型腺病毒的六邻体蛋白、流感病毒的基质蛋白1、流感病毒的核衣壳蛋白和呼吸道合胞病毒的融合糖蛋白G0组成。在本专利技术的另一个方面，所述病毒抗原由人3型腺病毒的六邻体蛋白，爱泼斯坦巴尔病毒的反式激活因子蛋白BZLF1和呼吸道合胞病毒的融合糖蛋白G0组成。在本专利技术的另一个方面，所述病毒抗原由人3型腺病毒的六邻体蛋白、爱泼斯坦巴尔病毒的BALF-4、BMLF-1、BRLF-1、BZLF-1、EBNA-1、EBNA-3A、EBNA-3B、EBNA-3C、EBNA-4、LMP-1和LMP-2蛋白、流感病毒的基质蛋白1、流感病毒的核衣壳蛋白和呼吸道合胞病毒的融合糖蛋白G0组成。附图说明图1.在ELISPOT测定中六邻体、EBV、MP1、NP、FGF0和BZLF1的加速稳定性测试的示例图。图2.在ELISPOT测定中总结的组合肽池(ICA混合物)与个体肽池(添加物)的对比示例图。图3.在ELISPOT测定中不同种族的测试供体。图4.显示了在ELISPOT测定中使用ICAMix测试有免疫能力的供体中的响应变化的示例图。具体实施方式应当理解，可以根据本领域的特定需要而适用所公开方法的不同应用。还应理解，本文使用的术语仅用于描述本专利技术的特定实施方式的目的，而非意在限制性。另外，除非内容另有明确说明，在本说明书和所附权利要求中使用的单数形式“一个/一种(a/an)”和“所述(the)”包括复数指代物。因此，例如，所提及的“片段”包括“多个片段”，所提及的“细胞”包括两个或更多个这样的细胞，所提及的“对象”包括两个或更多个这样的对象，等等。无论在上文或下文中，本文引用的所有出版物、专利和专利申请，均在此整体并入供参考。本专利技术的方法本专利技术人已经鉴定了使用细胞介导的免疫测定(CMI测定)确定对象的免疫能力的方法。设计用于测量免疫能力(特别是细胞介导的免疫能力)的CMI测定可用于监测供体对抗原的T细胞响应。专利技术人已经确定可以选择合适的病毒抗原池以检测各种个体中的细胞介导的免疫响应。无论个体景如何，病毒抗原池均在有免疫能力的个体中提供响应。因此，该测定可用于鉴定有免疫能力的个体，以及那些不能引起有效免疫响应的个体。因此，本专利技术提供了一种用于确定对象免疫能力的方法，其中所述方法包括对包含免疫细胞的样品进行细胞介导的免疫测定(CMI)，所述免疫细胞例如来自对象的外周血单核细胞(PBMC)，所述方法包括体外检测对肽池的免疫响应，其中所述肽池由至少3种病毒抗原衍生。所述方法可包括由至少3种、至少4种、至少5种或至少6种病毒抗原，高达7种或8种病毒抗原衍生的肽池。在特别优选的实施方式中，所述肽由3种、4种、5种或6种病毒抗原衍生。在特别优选的实施方式中，所述肽由3种、4种或5种(但不会更多)病毒抗原衍生。在本专利技术的供选择的方面，所述肽由2种、3种或4种病毒抗原衍生，并另外包含由EBV衍生的抗原池，但不包含任何其他病毒抗原。所述肽池可包含由单一病毒的病毒抗原、多于一种病毒的病毒抗原或由来自不同病毒的所有病毒抗原衍生的肽。所述肽池可包含由相同病毒和不同病毒的病毒抗原衍生的肽。在本专利技术的一个优选方面，至少3种病毒抗原由至少2种病毒，优选3种、4种、5种或6种病毒衍生。在优选的实施方式中，至少3种病毒抗原由人3型腺病毒、流感病毒、爱泼斯坦巴尔病毒和呼吸道合胞病毒中的一种或多种衍生。在更优选的实施方式中，所述病毒抗原选自由人3型腺病毒衍生的六邻体蛋白、由流感病毒衍生的基质蛋白1、由流感病毒衍生的核衣壳蛋白、由爱泼斯坦巴尔病毒衍生的BZLF-1蛋白和由呼吸道合胞病毒衍生的融合糖蛋白G0。所述流感病毒可以是任何流感病毒株。在特别优选的实施方式中，所述流感病毒是H3N2流感病毒株。在本专利技术的一种实施方式中，所述病毒抗原池由人3型腺病毒的六邻体蛋白、呼吸道合胞病毒的融合糖蛋白G0和流感病毒的核衣壳蛋白组成。在本专利技术的另一种实施方式中，所述病毒抗原池由人3型腺病毒的六邻体蛋白、流感病毒的基质蛋白1、流感病毒的核衣壳蛋白和呼吸道合胞病毒的融合糖蛋白G0组成。在本专利技术的另一种实施方式中，所述病毒抗原池由人3型腺病毒的六邻体蛋白、爱本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于确定对象的细胞介导的免疫能力的方法，其中，所述方法包括对包含来自所述对象的免疫细胞的样品进行细胞介导的免疫测定(CMI)，所述方法包括体外检测对肽池的免疫响应，其中，所述肽池由至少3种病毒抗原衍生。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.03.29 GB 1605210.21.一种用于确定对象的细胞介导的免疫能力的方法，其中，所述方法包括对包含来自所述对象的免疫细胞的样品进行细胞介导的免疫测定(CMI)，所述方法包括体外检测对肽池的免疫响应，其中，所述肽池由至少3种病毒抗原衍生。2.权利要求1所述的方法，其特征在于，所述免疫细胞是外周血单核细胞(PBMC)。3.权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述免疫细胞是T细胞。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述肽池由至少4种、5种或6种病毒抗原衍生。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述肽池由3种、4种或5种病毒抗原衍生。6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其特征在于，所述病毒抗原选自人3型腺病毒的六邻体蛋白、流感病毒的基质蛋白1(H3N2)、爱泼斯坦巴尔病毒的BZLF-1蛋白、流感病毒的核衣壳蛋白、呼吸道合胞病毒的融合糖蛋白G0。7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其特征在于，所述病毒抗原由人3型腺病毒的六邻体蛋白、呼吸道合胞病毒的融合糖蛋白G0和流感病毒的核衣壳蛋白组成。8.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其特征在于，所述病毒抗原由人3型腺病毒的六邻体蛋白、流感病毒的基质蛋白1、流感病毒的核衣壳蛋白和呼吸道合胞病毒的融合糖蛋白G0组成。9.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其特征在于，所述病毒抗原由人3型腺病毒的六邻体蛋白、爱泼...

【专利技术属性】
技术研发人员：斯科特·塔斯克，
申请(专利权)人：牛津免疫科技有限公司，
类型：发明
国别省市：英国,GB