作为免疫抑制化合物的糖原和植物糖原纳米颗粒、和组合物及它们的使用方法技术

提供了包含糖原或植物糖原纳米颗粒的化合物或组合物，其抑制I型干扰素的先天免疫响应。该组合物中的糖原或植物糖原纳米颗粒被适当地阳离子化，在一个实施方式中，被氨基官能化。

Glycogen and Plant Glycogen Nanoparticles as Immunosuppressive Compounds and Their Use

Compounds or compositions containing glycogen or plant glycogen nanoparticles are provided to inhibit the innate immune response of interferon I. The glycogen or plant glycogen nanoparticles in the composition are cationized appropriately and functionalized by amino groups in one embodiment.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】作为免疫抑制化合物的糖原和植物糖原纳米颗粒、和组合物及它们的使用方法本申请要求美国申请号62/331,662和美国申请号62/454,424的优先权，它们通过引用并入本文。
本申请涉及免疫调节剂组合物。
技术介绍
糖原是动物的短期储能材料。在哺乳动物中，糖原出现在肌肉和肝脏组织中。它由1,4-葡聚糖链组成，通过α-1,6-糖苷键高度支化，分子量为106-108道尔顿。糖原以直径为20-200nm的致密颗粒的形式存在于动物组织中。还发现糖原在微生物中积累，例如在细菌和酵母中。无论是在结构还是物理性质方面，植物糖原是一种与糖原非常相似的多糖。基于其植物来源而与糖原不同。植物糖原最重要的来源是甜玉米粒，以及特定品种的大米、大麦和高粱。
技术实现思路
在一个实施方式中，提供了一种有效量的糖原或植物糖原纳米颗粒用于抑制细胞、细胞培养物、组织或受试者中的抗病毒响应的用途。还提供了一种抑制细胞、细胞培养物、组织或受试者中的抗病毒响应的方法，其包含向细胞、细胞培养物、组织或受试者中引入或施用有效量的糖原或植物糖原纳米颗粒。在一个实施方式中，糖原或植物糖原纳米颗粒是阳离子化的。在一个实施方式中，糖原或植物糖原纳米颗粒是胺修饰的。在一个实施方式中，糖原或植物糖原纳米颗粒修饰有短链季铵化合物，该短链季铵化合物包含至少一个未被取代的或由一个或多个N、O、S或卤素原子取代的具有1至16个碳原子的烷基部分。在一个实施方式中，纳米颗粒的平均颗粒直径为约30nm至约150nm。在一个实施方式中，至少90％或基本上所有纳米颗粒的平均直径为约40nm至约140nm，约50nm至约130nm，约60nm至约120nm，约70nm至约110nm，约80nm至约100nm，约30nm至约40nm，约40nm至约50nm，约50nm至约60nm，约60nm至约70nm，约70nm至约80nm，约80nm至约90nm，约90nm至约100nm，约100nm至约110nm，约110nm至约120nm，约120nm至约130nm，约130nm至约140nm，或约140nm至约150nm。在一个实施方式中，纳米颗粒未与另一分子进一步结合。在另一实施方式中，纳米颗粒进一步与一个或多个小分子结合，其中分子是亲水性修饰剂、药代动力学修饰剂、生物活性修饰剂或可检测的修饰剂。在一个实施方式中，受试者是基于病毒载体的基因疗法患者。如本文描述的用途和方法可以用于治疗或预防疾病或病症。在一个实施方式中，疾病或病症是自身免疫性疾病。在一个实施方式中，疾病或病症是炎性疾病。在一个实施方式中，疾病或病症是疼痛。在一个实施方式中，疾病或病症是败血症(sepsis，脓毒症)。在一个实施方式中，组合物用于局部给药。在一个实施方式中，组合物用于全身给药。如本文描述的用途和方法可用于制造疫苗。在一个实施方式中，用途是用于在疫苗制造中增强感染细胞培养物中的病毒生长和复制。还提供了一种联合疗法，其包含基于病毒载体的基因疗法和糖原或植物糖原纳米颗粒。在一个实施方式中，糖原或植物糖原纳米颗粒是阳离子化的。在一个实施方式中，糖原或植物糖原纳米颗粒是胺修饰的。在一个实施方式中，糖原或植物糖原纳米颗粒修饰有短链季铵化合物，该短链季铵化合物包含至少一个未被取代的或由一个或多个N、O、S或卤素原子取代的具有1至16个碳原子的烷基部分。在一个实施方式中，基于病毒载体的基因疗法是腺病毒。附图说明图1是植物糖原/糖原纳米颗粒的示意图。图2示出了植物糖原(PHX)和化学修饰的植物糖原对虹鳟鱼性腺细胞(RTG-2)细胞系成活力的影响。AB–阿尔玛蓝，CFDA-羧基荧光素二乙酸酯，乙酰氧基甲基酯。PHX–植物糖原OSA3–OSA-植物糖原，DS＝0.02NH2–氨基-植物糖原，DS＝0.1Q151–N-(2-羟基)丙基-3-三甲基铵-植物糖原，DS＝1.00。图3示出了在存在或不存在PHX-NH2的情况下使用VHSV-IVb感染72小时或144小时后，RTgillW-1细胞中MX1(代表性的先天免疫基因)转录物表达的变化。使用单独培养基(对照)、VHSV-IVb和具有0.5ng/mL或0.05ng/mLPHX-NH2的VHSV-IVb将RTgillW-1细胞处理72或144小时。使用qRT-PCR测量MX1转录物水平。图4示出了在存在或不存在PHX-NH2的情况下使用鲑鱼呼肠孤病毒(CSV)(CSV；TCID50＝1.995x104)感染24小时后，RTG-2细胞中Mx1转录物表达的变化。使用单独培养基(对照)、CSV和具有0.5ng/mLPHX-NH2的CSV将RTG2细胞处理24小时。使用qRTPCR测量感染后二十四小时的Mx1转录水平。使用ΔΔCq方法、归一化到β-肌动蛋白并且相对于CSV感染的细胞计算表达。以图基(Tukey)事后检验法使用单因素ANOVA分析数据，***P≤0.001。图5示出了在存在或不存在未修饰的PHX或PHX-NH2的情况下用CSV感染72小时后，CHSE-214细胞的细胞病变效应。使用CSV、具有0.05ng/mL未修饰的PHX的CSV、或具有0.05ng/mLPHX-NH2的CSV将CHSE-214细胞处理72小时。然后将CHSE-214细胞固定，染色并且对合胞体覆盖的面积/总面积(＝％合胞体)进行定量。图6示出了RTG-2细胞对Cy5.5-标记的PHX颗粒的内在化。用Cy5.5-植物糖原纳米颗粒温育的RTG-2细胞的荧光共聚焦图像。用单独的PBS(未处理的对照细胞)将RTG-细胞处理2小时或20小时，或者用PHX-CY5处理细胞。图7示出了在幼稚的裸CD-1小鼠静脉注射后30分钟和24小时，离体成像器官中荧光信号的定量。平均荧光浓度数据表明，除肝脏和肾脏外，还可在肺和心脏中检测到高信号。30分钟时的荧光浓度高于24小时时的荧光浓度。预扫描数据指示了未注射Cy5.5-植物糖原的小鼠的荧光浓度数据(即背景自发荧光)。数据表示为平均值+/-SD。图8示出了在幼稚的裸CD-1小鼠静脉注射Cy5.5-植物糖原后30分钟和24小时，离体成像脑中荧光信号的定量。数据表明，与预扫描(自发荧光水平)相比，Cy5.5-植物糖原在大脑中存在可测量的信号。信号在30分钟时最高，并在24小时内随时间缓慢下降。图9示出了使用摇动法定量PHX-NH2对CHSE-214细胞中CSV生产的影响。与单独的CSV相比，PHX-NH2导致CSV滴度增加了943.96％(SEM＝43.97)。(p>0.05)。图10示出了使用两种处理(摇动法和预处理方法)定量PHX-NH2对鲤丘疹性上皮瘤(epitheliomapapulosumcyprinid)(EPC)细胞中VHSV-IVb生产的影响。使用预处理方法，与单独的VHSV-IVb相比，PHX-NH2导致VHSV-IVb滴度增加了147.96％(SEM＝125.2)。使用摇动法，PHX-NH2使VHSV-IVb滴度降低了26％(SEM＝25.88％)。(p<0.05)。图11示出了使用预处理方法定量PHX-NH2对CHSE-214中传染性胰腺坏死病毒(IPNV)生产的影响。与单独的IPNV相比，PHX-NH2导致IPNV滴度增加了本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.有效量的糖原或植物糖原纳米颗粒用于抑制细胞、细胞培养物、组织或受试者中的抗病毒响应的用途。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.05.04 US 62/331,662;2017.02.03 US 62/454,4241.有效量的糖原或植物糖原纳米颗粒用于抑制细胞、细胞培养物、组织或受试者中的抗病毒响应的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其中所述糖原或植物糖原纳米颗粒是阳离子化的。3.根据权利要求1所述的用途，其中所述糖原或植物糖原纳米颗粒是胺修饰的。4.根据权利要求1所述的用途，其中使用短链季铵化合物修饰所述糖原或植物糖原纳米颗粒，所述短链季铵化合物包含至少一个未被取代的或由一个或多个N、O、S或卤素原子取代的具有1至16个碳原子的烷基部分。5.根据权利要求1至4中任一项所述的用途，其中所述纳米颗粒具有的平均颗粒直径为约30nm至约150nm。6.根据权利要求5所述的用途，其中至少90％或基本上全部所述纳米颗粒具有的平均直径为约40nm至约140nm，约50nm至约130nm，约60nm至约120nm，约70nm至约110nm，约80nm至约100nm，约30nm至约40nm，约40nm至约50nm，约50nm至约60nm，约60nm至约70nm，约70nm至约80nm，约80nm至约90nm，约90nm至约100nm，约100nm至约110nm，约110nm至约120nm，约120nm至约130nm，约130nm至约140nm，或约140nm至约150nm。7.根据权利要求1至6中任一项所述的用途，其中所述纳米颗粒未进一步结合到另一分子。8.根据权利要求1至6中任一项所述的用途，其中所述纳米颗粒进一步结合到一个或多个小分子，其中所述分子是亲水性修饰剂、药代动力学修饰剂、生物活性修饰剂或可检测的修饰剂。9.根据权利要求1至8中任一项所述的用途，用于抑制受试者中的抗病毒响应。10.根据权利要求9所述的用途，其中所述受试者是基于病毒载体的基因治疗患者。11.根据权利要求9或10所述的用途，用于治疗或预防疾病或病症。12.根据权利要求11所述的用途，其中所述疾病或病症是自身免疫性疾病。13.根据权利要求11所述的用途，其中所述疾病或病症是炎性疾病。14.根据权利要求11所述的用途，其中所述疾病或病症是疼痛。15.根据权利要求11所述的用途，其中所述疾病或病症是败血症。16.根据权利要求9至15中任一项所述的用途，其中组合物用于局部给药。17.根据权利要求9至15中任一项所述的用途，其中组合物用于全身给药。18.根据权利要求1至8中任一项所述的用途，用于抑制细胞培养物中的抗病毒响应。19.根据权利要求18所述的用途，用于制造疫苗。20.根据权利要求18或19所述的用途，用于在制造疫苗中增强感染细胞培养物中的病毒生长和复制。21.一种抑制细胞、细胞培养物、组织或受试者中的抗病毒响应的方法，包括向所述细胞、所述细胞培养物、所述组织或所述受试者引入或施用有效量的糖原或植物糖原纳米颗粒。22.根据权利要求21所述的方法，其中所述糖原或植物糖原纳米颗粒是阳离子化的...

【专利技术属性】
技术研发人员：安东·科列涅夫斯基，斯特凡妮·德维特欧尔，凯特琳·斯皮泰里，利萨·苏珊娜·贝托洛，
申请(专利权)人：奇迹连结生物技术公司，
类型：发明
国别省市：加拿大,CA