一种合成PT141的方法技术

本发明专利技术涉及医药合成领域，公开了一种合成PT141的方法。本发明专利技术所述方法先固相合成PT141线性肽；然后将线性肽加入到缓冲液中，采用嗜热杆菌蛋白酶、木瓜蛋白酶、A2胰凝蛋白酶、胰蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、Butelase1酶中的一种或两种以上进行环化，获得PT141。本发明专利技术改变常规方法采用偶联试剂和活化试剂的环化方式，以全新的酶制剂环化方式应用到PT141的合成中，获得较高纯度和收率的PT141，同时所述方法能够以普通的保护氨基酸和裂解试剂进行合成，应用范围更广，方法更简便，对环境友好。

A METHOD FOR SYNTHESIS OF PT141

The invention relates to the field of pharmaceutical synthesis, and discloses a method for synthesizing PT141. The method of the invention first synthesizes PT141 linear peptide in solid phase, and then adds the linear peptide to the buffer solution, and uses one or more of thermophilic Bacillus protease, papain, A2 trypsin, trypsin, subtilisin and Butelase 1 enzymes for cyclization to obtain PT141. The invention changes the conventional method to adopt the cyclization mode of coupling reagent and activating reagent, applies the new enzyme preparation cyclization mode to the synthesis of PT141, and obtains PT141 with higher purity and yield. At the same time, the method can be synthesized with common protective amino acid and pyrolysis reagent, and has wider application scope, simpler method and is environmentally friendly.

【技术实现步骤摘要】
一种合成PT141的方法
本专利技术涉及医药合成领域，具体涉及一种合成PT141的方法。
技术介绍
PT141，即布雷默浪丹(Bremelanotide)，是一种alpha-黑素细胞刺激激素类似物，由美国Palatin公司开发的一种治疗性功能障碍的环肽类药物，目前处于临床III期。PT141为人工合成的氮端乙酰化环七肽化合物，C端为羧酸，肽序见式I，Cas：189691-06-3。Ac-Nle-Cyclo(Asp-His-D-Phe-Arg-Trp-Lys)-OH式I目前，合成PT141方法主要为固相合成法，以Fmoc-Asp(OAllyl)-OH和Fmoc-Lys(Alloc)-OH为原料进行合成，但是在合成过程中存在保护氨基酸和脱保护试剂昂贵以及采用HF裂解方式对设备要求较高，并且对环境污染也较严重的问题。中国专利CN101857629A公开了一种合成PT141的方法，其采用了较为普通的保护氨基酸以及TFA切割试剂进行固相合成，虽然避免了上述固相合成工艺的一些缺点，但是整个工艺的收率难以令人满意。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种合成PT141的方法，使得所述方法本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种合成PT141的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、固相合成PT141线性肽；步骤2、将线性肽加入到缓冲液中，采用嗜热杆菌蛋白酶、木瓜蛋白酶、A2胰凝蛋白酶、胰蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、Butelase 1酶中的一种或两种以上进行环化，获得PT141。

【技术特征摘要】
1.一种合成PT141的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、固相合成PT141线性肽；步骤2、将线性肽加入到缓冲液中，采用嗜热杆菌蛋白酶、木瓜蛋白酶、A2胰凝蛋白酶、胰蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、Butelase1酶中的一种或两种以上进行环化，获得PT141。2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述缓冲液为pH2-9的PBS缓冲液。3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述环化为在0-100℃反应。4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述线性肽与酶的质量比为100:1～1000:1。5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤1包括：步骤1.1、固相合成在PT141线性肽所示氨基酸序列的Lys侧链上、Trp侧链上、Arg侧链上、His侧链上以及Asp侧链上偶联有保护基，且在PT141线性肽所示氨基酸序列C端偶联有树脂以及在N端乙酰化的PT141线性肽树脂；步骤1.2、向PT141线性肽树脂加入裂解液脱除树脂以及各氨基酸侧链保护基，获得PT141线性肽。6.根据权利要求5所述方法，其特征在于，步骤1.1包括：步骤1.1.1、将保护的Lys和树脂在偶联试剂及催化剂DMAP作用下进行偶联反应，获得保护的Lys-树脂；然后将剩余保护氨基酸按照PT141线性肽所示氨基酸序列C段到N端的肽序，用偶联试剂进行逐一合成，获得肽树脂1；步骤1.1.2、对肽树脂1的N端进行乙酰化，获得PT141线性肽树脂。7.根据权利要求6所述方法，其特征在于，所述保护的Lys以及剩余保护氨基酸为：Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-D-Phe-OH、Fm...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈学明，
申请(专利权)人：深圳翰宇药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44