检测受试物质的方法技术

本发明专利技术提供更简便地并且在进一步降低非特异性信号的状态下检测受试物质的方法。本发明专利技术使受试物质，有对所述受试物质的结合性并且固定在基板上的捕获体1、和有对所述受试物质的结合性并且含标记的捕获体2在液中接触，将所述捕获体2配置在基板上之后，重复从含所述捕获体2的物质的基板上的解离和向基板上的接触，在特定的工序和特定的工序中，对基板上的标记来源信号配置图案进行比较，将基本上同位置的信号检测为显示受试物质的信号。

Methods for testing substances

The invention provides a more convenient method for detecting the tested substance under the condition of further reducing the non-specific signal. The invention contacts the tested substance, the captured body 1 fixed on the substrate and the labeled captured body 2 in liquid. After configuring the captured body 2 on the substrate, the captured substance 2 is repeatedly dissociated from the substrate containing the captured body 2 and contacted to the substrate, in a specific process and a specific process. In the process, the signal configuration patterns of the marker source on the substrate are compared, and the signal of the same position is detected as the signal showing the substance under test.

【技术实现步骤摘要】
检测受试物质的方法
本专利技术涉及检测受试物质的方法等。
技术介绍
以往已知利用与受试物质的特异性的结合反应的检测技术。例如，在称为ELISA法的检测技术中，由固定化与受试物质特异性地结合的抗体的基板将受试物质捕获到基板上，再者，使与受试物质特异性地结合的抗体反应而由2个抗体夹受试物质之后，通过作为标记使酶结合而形成免疫复合物，进行由基于酶及其底物的反应的信号检测受试物质(专利文献1)。【现有技术文献】【专利文献】【专利文献1】美国专利申请公开第2006/0188932号说明书【专利技术的概要】【专利技术要解决的课题】但是，这样的检测方法通常要求对固定化在基板的物质和未固定化在基板上的物质进行分离的被称为(B/F分离)的烦琐的作业。另外，即使进行B/F分离，非特异性吸附也残留，由于这成为信号的背景，有无法特异性地检测受试物质的问题。从而，本专利技术旨在提供更简便地并且在进一步降低非特异性信号的状态下检测受试物质的方法。【用于解决课题的手段】本专利技术人鉴于上述课题而推进锐意研究的结果发现，通过使受试物质、有对于上述受试物质的结合性并且固定在基板上的捕获体1和有对于上述受试物质的结合性并且含标记的捕获体2在液中接触，将上述捕获体2配置在基板上之后，重复从含上述捕获体2的物质的基板上的解离和向基板上的接触，由特定的工序和特定的工序对基板上的标记来源信号配置图案进行比较，将基本上同位置的信号检测为显示受试物质的信号(特异信号)，可解决上述课题。本专利技术人基于此见解而推进进一步研究的结果，完成本专利技术。即，本专利技术包含下述的实施方式。项A检测受试物质的方法，其包括：使上述受试物质、有对于上述受试物质的结合性并且固定在基板上的捕获体1和有对于上述受试物质的结合性并且含标记的捕获体2在液中接触，将至少一部分的上述捕获体2配置在基板上的第1接触工序、在上述第1接触工序之后，使含上述捕获体2的物质的一部分从基板上解离而游离到液中的第1解离工序、在上述第1解离工序之后，使上述受试物质、有对于上述受试物质的结合性并且固定在基板上的捕获体1和有对于上述受试物质的结合性并且含标记的捕获体2在液中接触，将至少一部分的上述捕获体2配置在基板上的第2接触工序、在上述第2接触工序之后，使含上述捕获体2的物质的一部分从基板上解离而游离到液中的第2解离工序、及对在上述第1解离工序中的解离后的基板上的标记来源信号配置图案和在上述第2解离工序中的解离后的基板上的标记来源信号配置图案进行比较，将基本上同位置的信号检测为显示受试物质的信号的检测工序。项B检测受试物质的方法，其包括：使上述受试物质、有对于上述受试物质的结合性并且固定在基板上的捕获体1和有对于上述受试物质的结合性并且含标记的捕获体2在液中接触，将至少一部分的上述捕获体2配置在基板上的第1接触工序、在上述第1接触工序之后，使含上述捕获体2的物质的一部分从基板上解离而游离到液中的第1解离工序、在上述第1解离工序之后，使上述受试物质、有对于上述受试物质的结合性并且固定在基板上的捕获体1和有对于上述受试物质的结合性并且含标记的捕获体2在液中接触，将至少一部分的上述捕获体2配置在基板上的第2接触工序、及对在上述第1接触工序中的接触后的基板上的标记来源信号配置图案和在上述第2接触工序中的接触后的基板上的标记来源信号配置图案进行比较，将基本上同位置的信号检测为显示受试物质的信号的检测工序。项C检测受试物质的装置，其具备：收容反应液的反应部，上述反应液含上述受试物质和有对于上述受试物质的结合性并且含标记的捕获体2，上述反应部的底部是固定化了有对于上述受试物质的结合性的捕获体1的基板，赋予对于上述捕获体2的外力的外力赋予部，对基板上的标记来源信号配置图案进行摄像的摄像部，和使上述受试物质、上述捕获体1和上述捕获体2在液中接触，以使至少一部分的上述捕获体2配置在基板上的方式调整来自上述外力赋予部的外力，上述接触之后，以使含上述捕获体2的物质的一部分从基板上解离而游离到液中的方式调整来自上述外力赋予部的外力，并且对上述接触时及上述解离时的标记来源信号配置图案进行比较，将上述接触时及上述解离时基本上同位置的信号判断为显示受试物质的信号的处理部。项D检测受试物质的装置，其具备：有在底部固定化了有对于上述受试物质的结合性的捕获体1的基板，收容含上述受试物质和有对于上述受试物质的结合性并且含标记的捕获体2的反应液的反应部，赋予对于上述捕获体2的外力的外力赋予部，对基板上的标记来源信号配置图案进行摄像的摄像部，使上述受试物质、上述捕获体1和上述捕获体2在液中接触，以使至少一部分的上述捕获体2配置在基板上的方式调整来自上述外力赋予部的外力，在上述接触之后，以使含上述捕获体2的物质的一部分从基板上解离而游离到液中的方式调整来自上述外力赋予部的外力的控制部，和对上述接触时及上述解离时的标记来源信号配置图案进行比较，将上述接触时及上述解离时基本上同位置的信号判断为显示受试物质的信号的处理部。【专利技术的效果】本专利技术提供可更简便地并且在进一步降低非特异性信号的状态下检测受试物质的方法。再者，本专利技术也可提供可更简便地并且在进一步降低非特异性信号的状态下检测受试物质的装置。【附图的简单的说明】【图1】是显示引力的方向的例的模式图。【图2】是显示标记来源信号配置图案是形成在孔板上的检测到标记来源信号的孔(阳性孔)的配置图案时的一例的模式图。【图3】是显示将基本上同位置的信号基于由坐标系的隔区而判断的方法的一例的模式图。【图4】是显示将基本上同位置的信号基于自亮度重心的指定范围而判断的方法的一例的模式图。【图5】是显示将同位置的信号基于阳性孔(观察到信号的孔)的板上的位置而判断的方法的一例的模式图。【图6】是显示本专利技术的检测方法1的实施方式的一例(作为载体粒子，使用磁性粒子时的例)的模式图。【图7】是显示本专利技术的检测方法1的实施方式的一例(作为载体粒子，使用荷电粒子时的例)的模式图。【图8】是显示本专利技术的检测装置的一实施方式的构成的概略图。【图9】是显示图8中所示的检测装置的硬件构成的框图。【图10】是显示处理部的动作的图。【图11】是显示实施例1的结果(解离工序彼此的比较结果)的明场像。箭头表示光点，灰色箭头表示比较任何的解离工序间位置都不变的光点，白色箭头表示在不同的解离工序间位置发生改变的光点。【图12】是显示实施例1的结果(解离工序彼此的比较结果)的光点数的坐标图。■表示使用样品溶液的情况(有受试物质的情况)，□表示使用背景溶液的情况(无受试物质的情况)。横轴中，解离工序1表示解离工序1的光点的数，解离工序2表示通过解离工序1～2而位置不变的光点的数，解离工序3表示通过解离工序1～3而位置不变的光点的数，解离工序4表示通过解离工序1～4而位置不变的光点的数。【图13】是显示比较例1的结果的明场像。箭头表示光点。【图14】是显示比较例1的结果的光点数的坐标图。■表示使用样品溶液的情况(有受试物质的情况)，□表示使用背景溶液的情况(无受试物质的情况)。【具体实施方式】1.检测受试物质的方法1作为其一实施方式，本专利技术涉及检测受试物质的方法(在本说明书中有时表示为“本专利技术的检测方法1”)，其包括第1接触工序、第1解离工序、第2接触工序本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.检测受试物质的方法，其包括：第1接触工序，其使下列物质在液中接触：所述受试物质、捕获体1，其有对所述受试物质的结合性、并且固定在基板上、和捕获体2，其有对所述受试物质的结合性、并且含标记，将至少一部分的所述捕获体2配置在基板上；第1解离工序，在所述第1接触工序之后，使含所述捕获体2的物质的一部分从基板上解离而游离到液中；第2接触工序，其在所述第1解离工序之后，使下列物质在液中接触：所述受试物质、捕获体1，其有对所述受试物质的结合性、并且固定在基板上、和捕获体2，其有对所述受试物质的结合性、并且含标记，将至少一部分的所述捕获体2配置在基板上；第2解离工序，在所述第2接触工序之后，使含所述捕获体2的物质的一部分从基板上解离而游离到液中；及检测工序，对在所述第1解离工序中的解离后的基板上的标记来源信号配置图案和在所述第2解离工序中的解离后的基板上的标记来源信号配置图案进行比较，将基本上同位置的信号检测为显示受试物质的信号。

【技术特征摘要】
2017.07.19 JP 2017-1401491.检测受试物质的方法，其包括：第1接触工序，其使下列物质在液中接触：所述受试物质、捕获体1，其有对所述受试物质的结合性、并且固定在基板上、和捕获体2，其有对所述受试物质的结合性、并且含标记，将至少一部分的所述捕获体2配置在基板上；第1解离工序，在所述第1接触工序之后，使含所述捕获体2的物质的一部分从基板上解离而游离到液中；第2接触工序，其在所述第1解离工序之后，使下列物质在液中接触：所述受试物质、捕获体1，其有对所述受试物质的结合性、并且固定在基板上、和捕获体2，其有对所述受试物质的结合性、并且含标记，将至少一部分的所述捕获体2配置在基板上；第2解离工序，在所述第2接触工序之后，使含所述捕获体2的物质的一部分从基板上解离而游离到液中；及检测工序，对在所述第1解离工序中的解离后的基板上的标记来源信号配置图案和在所述第2解离工序中的解离后的基板上的标记来源信号配置图案进行比较，将基本上同位置的信号检测为显示受试物质的信号。2.检测受试物质的方法，其包括：第1接触工序，其使下列物质在液中接触：所述受试物质、捕获体1，其有对所述受试物质的结合性、并且固定在基板上、和捕获体2，其有对所述受试物质的结合性、并且含标记，将至少一部分的所述捕获体2配置在基板上；第1解离工序，在所述第1接触工序之后，使含所述捕获体2的物质的一部分从基板上解离而游离到液中；第2接触工序，其在所述第1解离工序之后，使下列物质在液中接触：所述受试物质、捕获体1，其有对所述受试物质的结合性、并且固定在基板上、和捕获体2，其有对所述受试物质的结合性、并且含标记，将至少一部分的所述捕获体2配置在基板上；及检测工序，对在所述第1接触工序中的接触后的基板上的标记来源信号配置图案和在所述第2接触工序中的接触后的基板上的标记来源信号配置图案进行比较，将基本上同位置的信号检测为显示受试物质的信号。3.权利要求1所述的方法，其中在所述解离工序中，通过调整对于配置在基板上的所述捕获体2的外力的强度，使所述捕获体2从基板解离。4.权利要求1所述的方法，其中所述外力是引力，并且在所述解离工序中，通过对于配置在基板上的所述捕获体2赋予引力，使所述捕获体2从基板解离。5.权利要求4所述的方法，其中在所述接触工序中，是赋予比所述解离工序中赋予的引力弱的引力的状态、或未赋予引力的状态。6.权利要求3所述的方法，其中所述外力是由选自磁力、库仑力、离心力、流体力、光、及声波的至少1种引起的外力。7.权利要求3所述的方法，其中所述外力是由选自磁力、库仑力、及声波的至少1种引起的外力。8.权利要求1所述的方法，其中所述捕获体2含选自与所述受试物质结合的抗体、抗原、核酸、受体、配体、及适体的至少1种和载体粒子。9.权利要求8所述的方法，其中所述载体粒子是选自磁性粒子、及荷电粒子的至少1种。10.权利要求1所述的方法，其中所述捕获体1含选自与所述受试物质结合的抗体、抗原、核酸、受体、配体、及适体的至少1种。11.权利要求1所述的方法，其中在所述第1接触工序和所述第1解离工序之间不包括B/F分离工序。12.权利要求1～11之任一项所述的方法，其中在所述第2接触工序和所述第2解离工序之间不包括B/F分离工...

【专利技术属性】
技术研发人员：赤间健司，桐村浩哉，
申请(专利权)人：希森美康株式会社，
类型：发明
国别省市：日本,JP