一种细胞STR鉴定9位点一步检测的方法技术

本发明专利技术公开了一种细胞STR鉴定9位点一步检测的方法，包括PCR反应体系，所述反应体系如下：DNA样品；100ng、混合引物：2ul；2×PCR mix(不含Taq酶):10ul；Taq酶(1U/ul)：0.5ul；ddH2O:upto20ul；本发明专利技术有益效果在于一次PCR反应就可完成鉴定，这样不但试剂成本大大降低，同时鉴定过程也相应减少，节省时间。

【技术实现步骤摘要】
一种细胞STR鉴定9位点一步检测的方法
本专利技术涉及生物技术中的基因检测领域，具体涉及一种细胞STR鉴定9位点一步检测的方法。
技术介绍
据统计约30％细胞系被交叉污染或错误辨识，因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果……，这浪费大量时间、精力和金钱。因此近年NIH、ATCC、Nature和Science等对此多次发出呼吁，要求研究者对细胞进行鉴定，如2011年美国国家标准学会专门颁布了一份细胞STR鉴定国家标准；2014年12月、2015年2月Science杂志分别发表文章专题阐述细胞交叉污染和错误辨识严重性；2015年4月Nature通知:Nature旗下杂志将从5月开始要求作者鉴定论文中所用细胞系；2015年6月有报道称一科学家由于用错细胞系，撤销Nature论文……。STR基因分型已被ICLAC、ATCC等权威机构作为金标准应用于细胞鉴定，目前越来越多的杂志要求在投稿时提供细胞STR分型数据。细胞系STR鉴定--及时发现细胞是否被交叉污染或错误辨识。已有商用STR鉴定试剂盒是选取D19S433、D5S818、D21S11、D18S51、D6S1043、D3S1358、D13S317、D7S820、D16S539、CSF1PO、PentaD、vWA、D8S1179、TPOX、PentaE、TH01、D12S391、D2S1338和FGA等19个具有高度多态性基因座和一个性别基因位点Amelogenin对人源细胞进行STR分型检测，主要用于法医检测和亲子鉴定。而ATCC,DXMZ,JCRB和RIKEN四大权威网站只发布了九种基因座的STR鉴定数据，分别是D5S818、D13S317、D7S820、D16S539、CSF1PO、vWA、TPOX、TH01和Amelogenin。比对这九种这基因座的STR鉴定数据就可确定细胞是否被交叉污染或错误，所以对于细胞系STR鉴定来说，其它11种基因座的STR鉴定数据是无用的。同时操作步骤繁多，需将20种基因座分成4个组合，每种组合4-6个基因座，分别PCR反应，然后合并在一起分析，这样增加了试剂成本和时间成本。
技术实现思路
鉴于现有技术的迫切需求，本专利技术旨在于提供一种细胞STR鉴定9位点一步检测的方法，进一步的，通过选用公布了数据的九种基因座对人源细胞进行STR分型鉴定，并且只需一次多重荧光PCR反应就可检测出九种基因座的STR分型数据。为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：一种细胞STR鉴定9位点一步检测的方法，包括PCR反应体系，所述反应体系如下：所述反应体系的程序如下：需要说明的是，所述混合引物的比例如下：D5S818:D13S317:D7S820:D16S539:CSF1PO:vWA:TPOX:TH01:Amelogenin＝3:3:4:2:3:5:3:3:1.5。本专利技术有益效果在于一次PCR反应就可完成鉴定，这样不但试剂成本大大降低，同时鉴定过程也相应减少，节省时间。具体实施方式下将结合实施例以本技术方案为前提，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本专利技术的保护范围并不限于本实施例。本专利技术为一种细胞STR鉴定9位点一步检测的方法，包括PCR反应体系，所述反应体系如下：所述反应体系的程序如下：进一步的，本专利技术所提供的混合引物里面有9对引物，具体比例如下：D5S818:D13S317:D7S820:D16S539:CSF1PO:vWA:TPOX:TH01:Amelogenin＝3:3:4:2:3:5:3:3:1.5。更进一步的，D5S818终浓度为1.5uM/L。本专利技术的优势是一次PCR反应就可完成鉴定，这样不但试剂成本大大降低，同时鉴定过程也相应减少，节省时间。对于本领域的技术人员来说，可根据以上描述的技术方案以及构思，做出其它各种相应的改变以及变形，而所有的这些改变以及变形都应该属于本专利技术权利要求的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种细胞STR鉴定9位点一步检测的方法，其特征在于，包括PCR反应体系，所述反应体系如下：

【技术特征摘要】
1.一种细胞STR鉴定9位点一步检测的方法，其特征在于，包括PCR反应体系，所述反应体系如下：所述反应体系的程序如下：2.根据权利要求1所述的细胞STR鉴定9位点一步检测的方法，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：涂继刚，
申请(专利权)人：广州吉妮欧生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44