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一种成纤维细胞的培养基及利用其培养成纤维细胞的方法技术

技术编号:20216897 阅读:35 留言:0更新日期:2019-01-28 17:17
本发明专利技术涉及一种成纤维细胞的培养基及利用其培养成纤维细胞的方法,包括基础培养基、NH4HCO3、丝氨酸、维生素C、茶多酚和胰岛素,所述基础培养基包括IMDM培养基和F12培养基。特异性提高了成纤维细胞的增长速度,在短时间内得到一定量的细胞,节省了时间和原料,且能保证所得到成纤维细胞的活性,有利于其在后续利用中充分发挥作用。

【技术实现步骤摘要】
一种成纤维细胞的培养基及利用其培养成纤维细胞的方法
本专利技术涉及细胞培养领域,尤其涉及一种成纤维细胞的培养基及利用其进行培养成纤维细胞的方法。
技术介绍
成纤维细胞(fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞(mesenchymalcell)分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损以及骨创伤的修复有着十分重要的作用,因此体外培养成纤维细胞在组织工程、美容、医疗等领域具有广泛的应用。制备的自体成纤维细胞可以供治疗女性尿失禁和消除皱纹及凹陷性疤痕的细胞移植之用。移植到尿道周围组织、皱纹和疤痕处的皮肤真皮层内后,在人体内是一种自然生理性的修复,不会产生免疫排斥等副作用。目前体外培养成纤维细胞的培养基只由基本培养基组成,对成纤维细胞的培养没有针对性,因此这类培养基存在如下缺点:1.成纤维细胞得不到特异性营养,生长速度收到制约,想要得到一定量的成纤维细胞所需时间长。2.传代培养细胞基数增大,会有营养竞争,使得细胞活力降低,影响得到的成纤维细胞的品本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种成纤维细胞的培养基,其特征在于,包括基础培养基、NH4HCO3、丝氨酸、维生素C、茶多酚和胰岛素,所述基础培养基包括IMDM培养基和F12培养基。

【技术特征摘要】
1.一种成纤维细胞的培养基,其特征在于,包括基础培养基、NH4HCO3、丝氨酸、维生素C、茶多酚和胰岛素,所述基础培养基包括IMDM培养基和F12培养基。2.根据权利要求1所述一种成纤维细胞的培养基,其特征在于,所述IMDM培养基和F12培养基的体积比为2.5:1。3.根据权利要求2所述一种成纤维细胞的培养基,其特征在于,所述基础培养基、NH4HCO3、丝氨酸、维生素C、茶多酚和胰岛素的用量比为1.4ml:90-120μg:200-250μg:20-60μg:20-40μg:10-20μg。4.根据权利要求3所述一种成纤维细胞的培养基,其特征在于,所述培养基还包括乙醇胺和胆碱。5.根据权利要求4所述一种成纤维细胞的培养基,其特征在于,所述基础培养基、乙醇胺和胆碱的用量比为1ml:50-80μg:90-150μg。6.一种成纤维细胞培养方法,其特征在于,包括如下步骤,步骤1:获取受术者皮肤组织放入培养皿中,在生物安全柜中用生理盐水冲洗所述皮肤组织,并将所述皮肤组织剪成组织块,再用生理盐水冲洗所述组织块;步骤2:将所述步骤1中所述组织块夹取至培养皿中,每个所述培养皿中加入如权利要求1至5任一项所述培养基,将所述培养皿放入培养箱静置,然后取出所述培养皿放入生物安全柜中,将所述培养皿中的所述培养基倒出,再加入新的所述培养基后放回所述培养箱中,三天后进行半换液,之后每两天半换液,直至细胞从组织中爬出量超过底板的60%,换新的所述培养基,得到原代培养皿;步骤3:将所述步骤2中所述原代培养皿在所述培养箱培养3天后倒入胰蛋白酶,静置后用胰酶抑制剂...

【专利技术属性】
技术研发人员:郑育洪
申请(专利权)人:郑育洪
类型:发明
国别省市:广东,44

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