人源调控细胞死亡的C1ORF109重组蛋白及其制备方法与应用技术

技术编号:20215829 阅读:40 留言:0更新日期:2019-01-28 16:45
本发明专利技术公开了人源调控细胞死亡的C1ORF109重组蛋白及其制备方法与应用,涉及的是人源调控细胞死亡的C1ORF109重组蛋白制备技术及其应用方法。首先提取正常人胚肾HEK293细胞的总RNA,通过逆转录PCR的方法合成cDNA,用特异性引物扩增所述的人C1ORF109基因编码序列,进而将该序列插入到真核细胞表达载体,得到含有所述人源调控细胞死亡的蛋白编码序列的重组表达载体,将该重组表达载体导入真核细胞,通过免疫印迹的方法确认了所述的人源调控细胞死亡的重组蛋白的表达。

【技术实现步骤摘要】
人源调控细胞死亡的C1ORF109重组蛋白及其制备方法与应用
本专利技术属于基因工程
,具体地说涉及一种人源调控细胞死亡的重组蛋白,本专利技术也涉及这种人源调控细胞死亡的重组蛋白的制备方法和应用
技术介绍
C1ORF109基因最初从人正常肺上皮细胞中分离获得,研究发现其参与了细胞死亡调控。C1ORF109转录本具有典型的可变剪切和不同的转录起始位点,其编码的蛋白质存在1-62位氨基酸的有或无,以及第214位氨基酸之后的羧基端序列变异,如附图1所示。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种来自于人源的调控细胞死亡的重组蛋白。本专利技术的目的还在于提供这种人源调控细胞死亡的重组蛋白的制备和应用方法。本专利技术的人源调控细胞死亡的重组蛋白,编码序列来源于人胚肾HEK293细胞,它是由280个氨基酸残基组成的蛋白质。它由SEQIDNo.1所示核苷酸序列编码,具有SEQIDNo.2所示的氨基酸序列,其中包含第156-215位可诱导细胞死亡的核心肽段。本专利技术的重组蛋白是采用下列方法来制备的:首先提取人胚肾HEK293细胞的总RNA,通过逆转录PCR的方法合成cDNA,用特异性引物扩增所述本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种人源调控细胞死亡的C1ORF109重组蛋白,其特征是:由SEQ ID No.1所示核苷酸序列编码,具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列,其中包含第156‑215位可诱导细胞死亡的核心肽段。

【技术特征摘要】
1.一种人源调控细胞死亡的C1ORF109重组蛋白,其特征是:由SEQIDNo.1所示核苷酸序列编码,具有SEQIDNo.2所示的氨基酸序列,其中包含第156-215位可诱导细胞死亡的核心肽段。2.一种权利要求1所述的人源调控细胞死亡的C1ORF109重组蛋白的制备方法,其特征是:首先提取人HEK293细胞的总RNA,通过逆转录PCR的方法合成cDNA,用特异性引物扩增所述的人源调控细胞死亡的C1orf109蛋白编码序列,将所述人源调控细胞死亡的蛋白编码序列插入真核细胞表达载体,得到含有所述人调控细胞死亡的蛋白编码序列的重组质粒,将该重组质粒导入真核细胞,通过免疫印迹的方法确认所述的人源调控细胞死亡的蛋白的表达。3.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员:李钰窦鹏慈彦鹏张丹丹
申请(专利权)人:哈尔滨工业大学
类型:发明
国别省市:黑龙江,23

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