鸡胸软骨肽及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属于制药领域，公开了一种鸡胸软骨肽及其制备方法与应用。本发明专利技术所述鸡胸软骨肽Ⅱ型胶原蛋白含量≥50％，硫酸软骨素含量≥20％。我国为畜禽消费大国，消费总量几乎达到世界畜禽消费总量的1/4。鸡胸软骨为肉鸡加工中的主要副产物之一。本发明专利技术利用生物控制酶解技术制备富含Ⅱ型胶原蛋白肽以及硫酸软骨素的鸡胸软骨肽。实验表明本发明专利技术制得的鸡胸软骨肽具有良好的抗炎作用可用于制备治疗骨关节炎的药物。因此本发明专利技术不仅可以提高鸡胸软骨的附加值，更能拓宽其应用范围，具有积极的社会意义和广阔的市场前景。

【技术实现步骤摘要】
鸡胸软骨肽及其制备方法和应用
本专利技术属于制药领域，具体涉及鸡胸软骨肽及其制备方法和用途，尤其是在制备治疗骨关节炎的药物中的应用。
技术介绍
骨关节炎(osteoarthritis，OA)为一种退行性病变，系由于增龄、肥胖、劳损、创伤、关节先天性异常、关节畸形等诸多因素引起的关节软骨退化损伤、关节边缘和软骨下骨反应性增生，又称骨关节病、退行性关节炎、老年性关节炎、肥大性关节炎等。临床表现为缓慢发展的关节疼痛、压痛、僵硬、关节肿胀、活动受限和关节畸形等。骨关节炎的主要病理改变为软骨退行性变性和消失，以及关节边缘韧带附着处和软骨下骨质反应性增生形成骨赘，并由此引起关节疼痛、僵直畸形和功能障碍。该病在临床上，可分为原发性和继发性二类。原发性骨关节炎系指随年龄老化而不和其他疾病相关的关节病变，继发性骨关节炎则由损伤、炎症、遗传及代谢、内分泌等疾病所引起。骨关节炎的患病率随着年龄增长而增加，女性比男性多见。世界卫生组织统计，50岁以上人群中，骨关节炎的发病率为50％，55岁以上的人群中，发病率为80％。我国骨关节炎的发病情况约占总人口的10％，为1亿人左右。1990年，我国只有4000多万骨关节炎患者，而2000年已达到8000万，患者人数达到了1亿多人。目前市面上的骨关节炎药物以非甾体类药物为主。非甾体类抗炎药(NSAIDs)是指一类不含糖皮质激素而具有抗炎、解热、镇痛作用的药物，如阿司匹林，布洛芬，萘普生等。但非甾体类药物在骨关节炎的治疗中仅用于止痛，并不能完全阻止关节的损害及病情的恶化。此外非甾体类药物具有一定副作用，表现为容易产生眩晕、认知障碍、嗜睡、肝肾过敏发硬、恶心及增高血压的情况。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于针对现有技术的问题，提供一种鸡胸软骨多肽及其制备方法与在制备治疗骨关节炎的药物中的应用。为实现本专利技术的目的，本专利技术采用如下技术方案：一种鸡胸软骨肽，Ⅱ型胶原蛋白含量≥50％，硫酸软骨素含量≥20％。本专利技术还提供了一种鸡胸软骨肽的制备方法，鸡胸软骨粉碎，加水，调节pH至7.0，加热至55℃，加入碱性蛋白酶和风味蛋白酶酶解，灭酶后离心取上清液绢布过滤后取透过液即得鸡胸软骨肽溶液。其中，作为优选，所述加水量为鸡胸软骨骨渣质量的2-3倍。作为优选，所述碱性蛋白酶的添加量为鸡胸软骨骨渣质量的0.2％～0.3％；所述风味蛋白酶的添加量为鸡胸软骨骨渣质量的0.3％～0.5％；作为优选，所述碱性蛋白酶和风味蛋白酶的质量比为1:1～5:3。在一些实施方案中，所述碱性蛋白酶的添加量为鸡胸软骨骨渣质量的0.2％，所述风味蛋白酶的添加量为鸡胸软骨骨渣质量的0.5％；在一些实施方案中，所述碱性蛋白酶的添加量为鸡胸软骨骨渣质量的0.3％，所述风味蛋白酶的添加量为鸡胸软骨骨渣质量的0.3％。作为优选，本专利技术所述鸡胸软骨肽的制备方法中所述酶解条件为55℃下保温3小时。酶解后需要对碱性蛋白酶和风味蛋白酶进行灭酶。本领域技术人员可以采用本领域公知的方法进行灭酶。在一些实施方案中，所述灭酶具体为95℃下加热15min。本专利技术所述鸡胸软骨肽的制备方法在灭酶后通过离心取上清液绢布过滤后取透过液即得鸡胸软骨肽溶液。其中作为优选，所述离心为8000r/min下离心15min。作为优选，所述绢布过滤为过200目绢布。进一步，本专利技术所述的制备方法还包括浓缩、干燥的步骤。在一些实施方案中，所述浓缩、干燥具体为真空浓缩至固形物约为40％，喷雾干燥。本专利技术还提供了上述制备方法制得的鸡胸软骨肽。在某一具体实施方案中，本专利技术检测了制得的鸡胸软骨肽对MMP-1抑制活性、对关节炎小鼠血清炎症因子水平的影响以及组织病理切片观察对大鼠骨关节炎的影响，结果显示制得的鸡胸软骨肽均有很好的MMP-1抑制活性，可达70％以上，对关节炎小鼠血清炎症因子水平均低于模型组，组织病理切片也显示了明显改善，表明本专利技术所述鸡胸软骨肽具有良好的抗炎作用。因此本专利技术还提供了所述鸡胸软骨肽在制备治疗骨关节炎的药物中的应用。由上述技术方案可知，本专利技术提供了一种鸡胸软骨肽及其制备方法与应用。本专利技术所述鸡胸软骨肽Ⅱ型胶原蛋白含量≥50％，硫酸软骨素含量≥20％。我国为畜禽消费大国，消费总量几乎达到世界畜禽消费总量的1/4。鸡胸软骨为肉鸡加工中的主要副产物之一。本专利技术利用生物控制酶解技术制备富含Ⅱ型胶原蛋白肽以及硫酸软骨素的鸡胸软骨肽。实验表明本专利技术制得的鸡胸软骨肽具有良好的抗炎作用可用于制备治疗骨关节炎的药物。因此本专利技术不仅可以提高鸡胸软骨的附加值，更能拓宽其应用范围，具有积极的社会意义和广阔的市场前景。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。图1示正常组膝关节切片图；图2示模型组膝关节切片图；图3示鸡胸软骨肽A组膝关节切片图；图4示鸡胸软骨肽B组膝关节切片图。具体实施方式本专利技术公开了鸡胸软骨肽及其制备方法和应用。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术。本专利技术的方法及产品已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的方法进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。为了进一步理解本专利技术，下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例，本专利技术的实施方式不限于此。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。如无特殊说明，本专利技术实施例中所涉及的试剂均为市售产品，均可以通过商业渠道购买获得。实施例1一种具有抗关节炎作用的鸡胸软骨肽的制备方法，包括以下步骤：(1)鸡胸软骨洗净后沥干、绞碎；(2)加入2倍水，调节体系pH值至7.0，水浴搅拌加热至55℃，加入鸡胸软骨肉糜质量0.2％的碱性蛋白酶(诺维信公司)和0.5％风味蛋白酶(诺维信公司)55℃下保温3小时，95℃下加热15min灭酶，8000r/min下离心15min，取上清液过200目绢布进行分离，取透过液，得到鸡胸软骨肽液；(3)将鸡胸软骨肽液真空浓缩至固形物约为40％，喷雾干燥得鸡胸软骨肽A(其中包57.46％的Ⅱ型胶原蛋白及21.29％的硫酸软骨素)。实施例2一种具有抗关节炎作用的鸡胸软骨肽的制备方法，包括以下步骤：(1)鸡胸软骨洗净后沥干、绞碎；(2)加入3倍水，调节体系pH值至7.0，水浴搅拌加热至55℃，加入鸡胸软骨肉糜质量0.3％的碱性蛋白酶(诺维信公司)和0.3％风味蛋白酶(诺维信公司)55℃下保温4小时，95℃下加热15min灭酶，8000r/min下离心15min，取上清液过200目绢布进行分离，取透过液，得到鸡胸软骨肽液；(3)将鸡胸软骨肽液真空浓缩至固形物约为40％，喷雾干燥得鸡胸软骨肽B(其中包54.83％的Ⅱ型胶原蛋白及22.08％的硫酸软骨素)。试验例：一、方法：(1)MMP-1(胶原酶)抑制活性测定试剂配制：磷酸盐缓冲液：称取磷酸氢二钠1.4499g，加入磷酸二氢钠0.1482g，加入去离子水500mL，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种鸡胸软骨肽，其中Ⅱ型胶原蛋白含量≥50％，硫酸软骨素含量≥20％。

【技术特征摘要】
1.一种鸡胸软骨肽，其中Ⅱ型胶原蛋白含量≥50％，硫酸软骨素含量≥20％。2.一种鸡胸软骨肽的制备方法，鸡胸软骨粉碎，加水，调节pH至7.0，加热至55℃，加入碱性蛋白酶和风味蛋白酶酶解，灭酶后离心取上清液绢布过滤后取透过液即得鸡胸软骨肽溶液。3.根据权利要求2所述的制备方法，所述加水量为鸡胸软骨骨渣质量的2-3倍。4.根据权利要求2或3所述的制备方法，所述碱性蛋白酶的添加量为鸡胸软骨骨渣质量的0.2％～0.3％；所述风味蛋白酶的添加量为鸡胸软骨骨渣质量的0.3％～0.5％。5.根据权利要求2-4任意一项所述的制备方法，所述碱性蛋白酶和风味蛋白酶...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁刘刚，周勇，岳中宝，何丹霖，
申请(专利权)人：无限极中国有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44