诊断装置及相关方法制造方法及图纸

本发明专利技术涉及用于分析包含扩增核酸的液体样品的装置(10；30；50)，所述装置包含：样品垫(16)；为分析核酸样品的不同方面而配置的第一(18)和第二(19)样品分析条，其中所述区段包含与靶标核酸(其存在与否被分析)的预定序列互补的核酸序列；和围绕所述样品垫和至少两个细长样品分析条的外壳(11)，其中分析结果从外壳的外部，从所述第一和第二分析条的对齐区段的组合可以探测到。本发明专利技术还涉及一种使用依据本发明专利技术的装置，结合预定序列，确定来自受试者的样品中靶标核酸存在与否的方法，提供证实的结果。

Diagnostic devices and related methods

The present invention relates to a device (10; 30; 50) for analysing liquid samples containing amplified nucleic acids, comprising: sample pads (16); first (18) and second (19) sample analysis bars configured to analyse different aspects of nucleic acid samples, wherein the segments contain nucleic acid sequences complementary to predetermined sequences of target nucleic acids (their presence or absence being analyzed); and a pad and at least around the samples. The results of analysis can be detected from the outer part of the shell and from the combination of alignment sections of the first and second analysis strips. The invention also relates to a method for determining the presence or absence of target nucleic acid in a sample from a subject by using a device according to the invention in conjunction with a predetermined sequence and providing a confirmed result.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】诊断装置及相关方法专利
本公开内容涉及一种分析液体样品的装置，和使用所述装置的诊断方法。背景传染性疾病每年造成超过五千六百万人死亡(每天>153000人)，而其余几十亿受影响的人患有感染后发病状态，如营养不良、身心发育不良、认知发育受损等。流行性感染如腹泻、HIV和结核(TB)占总死亡率的一半以上，需要立即医疗护理。依据世界卫生组织(WHO)和UNICEF，约20亿人患有腹泻病，且每年190万名年龄小于5岁的儿童死亡。这占所有儿童死亡的18%(每天>5000例死亡)。在2014年，报告约三千六百九十万人患有HIV，其中二百六十万人是儿童。虽然发达国家的死亡率最低，但从非洲和东南亚地区的发展中国家报道了约50-80%，在这些国家中人群缺乏良好的医疗保健设施和适当的传染性疾病诊断。作为一个实例，TB每年影响超过9百万人，造成150万例死亡。TB的致病因子结核分枝杆菌(MTB)，一般通过获得染色体中的序列突变而产生抗性。突变的MTB菌株对至少两种主要的第一线抗-TB药物异烟肼(INH)和利福平(RIF)产生抗药性，被分类为多重耐药性TB(MDR-TB)。MTB中另外的突变对大多数剩余抗生素产生广泛的抗药性(XDR-TB)，其对于诊断和治疗提出了挑战。首先，MTB通过涂片显微术检测出来，但这种技术无法识别耐药菌株。由于MTB的缓慢生长，基于培养的药物易感性测试(DST)方法既费力又耗时(数周至数月才获得正确结果)。相比之下，基于聚合酶链反应(PCR)的核酸扩增试验(NAAT)通过各种自动和半-自动技术，提供检测耐药性MTB菌株的快速结果。例如，基于实时PCR的GeneXpertMTB/RIF(Cepheid,Sunnyvale,CA,USA)测定在不到2h内通过直接分析痰样品提供结果。GeneTypeMTBDRPlus探针-杂交测定(HainLifescienceGmbH,Nehren,Germany)能够平行检测多个抗性标记，但估计该系统仅分别检出95%和74%的RIF和INH抗性菌株。此外，这两项试验很难在资源有限的实验室进行，因为需要训练有素的实验室人员和基础设施。因此，在资源有限的环境中，对目前可用的核酸扩增试验(NAAT)的仪器和技术人员的能力和要求阻碍了对MDR-TB的迅速检测。正确和可靠地鉴定致病微生物及其引起耐药性的遗传模式仍然是一个挑战，尤其是在外围临床设置中。因此，在各种细菌感染的诊断领域中，对改进的诊断装置和方法有持续的需要。特别是，需要一种可与熟练的分子方法结合使用的简单可靠的装置，其能够应对细菌感染(例如MDR-TB)的技术以及临床检测挑战，为外围资源有限的医疗保健环境提供合适的解决方案。意欲用于测试样品的不同类型的装置的实例公开于WO2010/079479和WO2013/163353中，其可以从一个样品靶标以顺序的方式提供一个信号。然而，这些结果是半定性的，并且不能提供确定的答案，尤其影响抗生素治疗。因此，需要更好和用户友好的装置，其能够对样品取得多个结果，并且提供确定的试验结果以开始适当的治疗，甚至从第一次临床接触时。专利技术简述本公开内容的一个目的是提供一种分析包含扩增核酸的液体样品的新装置。本公开内容的一个目的是提供一种克服从现有技术已知的缺点的装置。本公开内容的一个目的是提供一种能够同时检测多个预定核酸序列的装置。本公开内容的一个目的是提供一种简单、便于使用并提供可靠的结果的装置。此外，本公开内容的目的是提供一种适合外围和资源有限的实验室环境的装置。提供检测多个预定核酸序列的组合方法也是本公开内容的一个目的。提供一种检测受试者中耐药和/或耐抗生素细菌靶向基因突变的存在的方法也是本公开内容的一个目的。从本公开内容来看，对技术人员来说是显而易见的这些和其它目的，由所附权利要求书要求的和一般如本文公开的本专利技术的不同方面满足。因此，在本公开内容的第一个方面，提供一种分析包含扩增核酸的液体样品的装置，所述装置包含：样品垫；为分析核酸样品的不同方面而配置的第一和第二样品分析条，其中第一和第二条是细长的并从样品垫延伸，且所述第一和第二条各自包含一个基本上直的分析部分，其被分成若干区段，每个被配置以指示具有预定序列的靶标核酸是否存在于所述样品中，所述具有预定序列的靶标核酸与检测分子直接或间接偶联，和其中所述第一和第二样品分析条的分析部分包含由具有至少0.1mm厚度的透明层覆盖的背衬膜，所述分析部分被配置以分析具有不同的预定序列的核酸的存在与否，第一和第二样品分析条的所述分析部分具有基本相同的长度且被并排排列，以致分析结果可从出现在所述第一和第二分析条的对齐区段的透明层中的三维标记的组合检测到，其中所述区段包含与分析其存在与否的靶标核酸的预定序列互补的核酸序列；和围绕所述样品垫和至少两个细长样品分析条的外壳，所述外壳包含前侧，在其中形成样品入口通道，以致样品垫可从外壳的外部接近，和至少一个开口，以致从外壳的外部可以检测到分析结果。本公开内容的装置可例如利用侧向流动核酸生物传感器(LFNAB)。在LFNAB中，包含与预定核酸序列互补的核酸序列的标记被固定在膜上，例如硝酸纤维素膜或尼龙膜。当样品通过分析条时，包含预定核酸序列的核酸分子将与它们互补的固定序列结合。依据本专利技术的装置使得在不需要其它先进医疗分析装置的情况下分析样品成为可能，这在医疗分析装置的获得受限的地理区域是非常有用的。所述装置，由于其特征性设计，提供有利于正确有效的药物治疗、避免经验治疗的详细结果。因此，它对于患者是非常有利的，且有助于避免不必要的不利影响并减少在不治疗患者的情况下处方药物的数量。样品垫和分析部分由外壳保护，且不需要任何准备即可使用。特别地，本公开内容的装置提供一种在诊断的早期阶段提供例如有关药物易感性模式的信息的方式，其当然可以帮助临床医师开始传染性疾病的适当治疗。此外，本专利技术的装置适用于外围实验室环境。此外，包含由透明层覆盖的背衬膜的分析部分的不同区段产生一个出现在指示区段的透明层中的非常独特的三维标记，其有助于阅读结果，并确保正确地阅读结果。如本文所用的，术语“传染性疾病”指由微生物例如细菌、病毒、寄生虫或真菌引起的生理疾病。传染性疾病可在人和动物之间或之中直接或间接地传播。如本文所用的，术语“核酸”指任何形式的脱氧核糖核酸(DNA)，其由携带遗传密码的碱基如腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶和胸腺嘧啶组成并决定任何活的生物体的生物学作用。由腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶和尿嘧啶形成的类似于DNA但用途更广泛的核糖核酸(RNA)转移遗传密码并传递信息。因此，术语核酸指任何形式的DNA或RNA和它们的相关物。这样的相关物的非限制性例子包括cDNA、mRNA、tRNA、rRNA、snRNA、miRNA、siRNA、piRNa、rnRNA、scaRNA、长ncRNA、细胞外DNA和细胞外RNA。如本文所用的，术语“外围实验室环境”指任何临床实验室，例如医疗设施非常有限的农村卫生保健中心和医疗营地，例如缺乏标准设备、敷料和药物、抗生素，以及具有有限的或甚至缺乏受过培训以提供诊断和治疗的卫生保健人员。在如本文公开的装置的一个实施方案中，第一和第二样品分析部分被配置以分析液体样品是否包含基因或部分基本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.分析包含扩增核酸的液体样品的装置(10；30；50)，所述装置包含：样品垫(16)；为分析核酸样品的不同方面而配置的第一(18)和第二(19)样品分析条，其中所述第一和第二条是细长的和从样品垫延伸，并且所述第一和第二条各自包含一个基本上直的分析部分(20)，其被分成若干区段(22)，每个被配置以指示具有预定序列的靶标核酸是否存在于所述样品中，所述具有预定序列的靶标核酸与检测分子直接或间接偶联，和其中所述第一和第二样品分析条的分析部分包含由具有至少0.1 mm厚度的透明层覆盖的背衬膜，所述分析部分被配置以分析具有不同预定序列的核酸的存在与否，第一和第二样品分析条的所述分析部分具有基本相同的长度且被并排排列，以致分析结果可从出现在所述第一和第二分析条的对齐区段的透明层中的三维标记的组合检测到，其中所述区段包含与分析其存在与否的靶标核酸的预定序列互补的核酸序列；和围绕所述样品垫和至少两个细长样品分析条的外壳(11)，所述外壳包含前侧(12)，在其中形成样品入口通道(15)，以致样品垫可从外壳的外部接近，和至少一个开口(17)，以致从外壳的外部可以检测到分析结果。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.02.15 SE 1650197-51.分析包含扩增核酸的液体样品的装置(10；30；50)，所述装置包含：样品垫(16)；为分析核酸样品的不同方面而配置的第一(18)和第二(19)样品分析条，其中所述第一和第二条是细长的和从样品垫延伸，并且所述第一和第二条各自包含一个基本上直的分析部分(20)，其被分成若干区段(22)，每个被配置以指示具有预定序列的靶标核酸是否存在于所述样品中，所述具有预定序列的靶标核酸与检测分子直接或间接偶联，和其中所述第一和第二样品分析条的分析部分包含由具有至少0.1mm厚度的透明层覆盖的背衬膜，所述分析部分被配置以分析具有不同预定序列的核酸的存在与否，第一和第二样品分析条的所述分析部分具有基本相同的长度且被并排排列，以致分析结果可从出现在所述第一和第二分析条的对齐区段的透明层中的三维标记的组合检测到，其中所述区段包含与分析其存在与否的靶标核酸的预定序列互补的核酸序列；和围绕所述样品垫和至少两个细长样品分析条的外壳(11)，所述外壳包含前侧(12)，在其中形成样品入口通道(15)，以致样品垫可从外壳的外部接近，和至少一个开口(17)，以致从外壳的外部可以检测到分析结果。2.依据权利要求1的分析包含扩增核酸的液体样品的装置，其中第一样品分析条的分析部分包含至少一个区段，所述区段至少含有野生型基因的部分核酸序列，并且第二样品分析条的分析部分包含至少一个区段，所述区段含有所述基因的突变体的相应核酸序列，所述相应核酸序列包含至少一个突变。3.依据权利要求2的分析包含扩增核酸的液体样品的装置，其中所述基因包含至少一种抗生素抗性标记，例如结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis)抗生素抗性标记。4.依据权利要求3的分析包含扩增核酸的液体样品的装置，其中所述至少一种抗生素抗性标记选自rpoB516TAC、rpoB516GTC、katG315ACC、rpoB531TTG、rpoB531TGG、rpoB526TAC、rpoB526GAC、rpoB526CTC、rpoB526ACC、inhA-15T、rrs1401G、gyrA94GGC、gyrA90GTG和rpoB533CCG。5.依据权利要求1-4的任一项的分析包含扩增核酸的液体样品的装置，其中所述分析部分是侧向流动生物传感器。6.依据权利要求1-4的任一项的分析包含扩增核酸的液体样品的装置，其中所述分析部分由透明的纤维素或聚合物材料形成。7.依据前述权利要求的任一项的装置，其中背衬膜(31)和出现在区段中的三维标记具有不同的颜色。8.依据前述权利要求的任一项的装置，其中样品垫和细长样品分析条由吸收性纤维材料形成，样品能够通过重力和/或毛细管运动来流动通过所述吸收性纤维材料。9.依据前述权利要求的...

【专利技术属性】
技术研发人员：P阿萨拉普拉姆，M尼尔森伯尼兹，
申请(专利权)人：安普诊断公司，
类型：发明
国别省市：瑞典,SE