酶解脱色血球蛋白粉及其制备方法技术

本发明专利技术公开了酶解脱色血球蛋白粉及其制备方法，该蛋白粉低聚肽含量高达96％以上，且为分子量集中在300‑1000Da的小分子混合肽类，易于消化吸收，有效提高了血红蛋白的利用价值；其制备方法包括红血球的制备、一次酶解脱色、二次酶解脱色、浓缩与干燥；一次酶解脱色用水溶液中含的1‑氨基‑1‑脱氧葡萄糖醇和琥珀酸具有增益效果，能够有效分离血红蛋白中的血红素。有益效果为：本发明专利技术制备的酶解脱色血球蛋白粉脱色效果好、蛋白含量高、蛋白消化吸收率高，且制备工艺简单、生产效率高，适于工业化生产。

Enzymatic decolorization of hemoglobulin powder and its preparation method

The present invention discloses enzymatic decolorization of hemoglobin powder and its preparation method. The content of oligopeptide in the protein powder is up to 96%, and the protein powder is a small molecule mixed peptide with molecular weight concentrated at 300 1000Da, which is easy to digest and absorb, and effectively improves the utilization value of hemoglobin. The preparation method includes preparation of red blood cells, primary enzymatic decoloration, secondary enzymatic decoloration, concentration and drying. The 1 amino 1 deoxyglucosol and succinic acid contained in the aqueous solution of secondary enzymatic decolorization have the gain effect and can effectively separate hemoglobin from hemoglobin. The enzymatic decolorization hemoglobin powder prepared by the invention has good decolorization effect, high protein content, high protein digestion and absorption rate, simple preparation process and high production efficiency, and is suitable for industrial production.

【技术实现步骤摘要】
酶解脱色血球蛋白粉及其制备方法
本专利技术涉及血球蛋白
，尤其是涉及酶解脱色血球蛋白粉及其制备方法。
技术介绍
猪血是一种含有较高营养价值的食品工业副产品，蛋白质含量高达18.0％，其中含有20种天然氨基酸，8种必需氨基酸含量占44.3％，且氨基酸含量均衡，尤其是赖氨酸、色氨酸含量高，是一种优质而廉价的蛋白质资源。猪血蛋白大部分为血红蛋白(Hemoglobin)，存在于红血球中,由血红素和珠蛋白组成，占总蛋白质的80％。猪血红蛋白直接食用适口性差且难以消化吸收，此外,在酶解过程中释放大量的血红素，血红素中的二价铁可迅速被氧化成三价铁，使酶解液呈现出深褐色，影响产品的纯度和成色，微量添加就会加速食品中的油脂氧化，引起食品色泽和风味的劣变。目前由于没有适合商业化的成熟脱色技术，猪血红蛋白主要被加工成血粉作为动物饲料使用，严重制约了猪血红蛋白的开发利用。因此，脱色是猪血红蛋白有效利用的关键技术之一。通过脱色可改观猪血血球蛋白难以被接受的颜色，同时获得高品质的食品级的血球蛋白肽类产物，大幅度提升血红蛋白的附加值。近几十年来，为了研究从血红蛋白中分离血红素制备获得高品质蛋白产物的方法，世界各国的科技工作者做了各种尝试，取得了很大的进步。总体来说，可以分为溶剂脱色法、吸附剂脱色法、氧化剂氧化脱色法、酸化氧化脱色法、酶解吸附等方法。由蛋白质酶解获得的活性肽，是目前功能性动物营养研究最活跃的领域之一。充分利用猪血中的丰富蛋白质资源，利用现代生物酶解技术可以将猪血中的珠蛋白转化为小分子的蛋白质片段和具有生物活性的小肽。小分子血红蛋白肽不仅有很好的溶解性、低粘度、抗凝胶形成性，而且在体内消化吸收快，蛋白质利用率高，具有低抗原性，不会产生过敏反应。生物酶解技术反应条件温和、易操作、能耗低，可避免因剧烈操作所造成营养成分的损失，并且提高了必需氨基酸及呈味氨基酸的含量，改善了蛋白质的适口性，提高了消化率。因此，将猪血细胞中的血红蛋白酶解成具有生物活性的肽类物质，将极大满足牲畜对功能性饲料添加剂的需求，提高蛋白质资源的利用率。现有技术如授权公告号为CN104256045B的中国专利技术专利，公开了一种猪血利用方法，尤其涉及一种猪血球蛋白粉的制备方法；该方法通过前处理初步脱色、分段酶解二次脱色、活性炭脱色和后处理多级脱色处理和提纯工艺，充分脱除血球蛋白多肽粉的颜色和血腥味，最终制得颜色接近乳白色的血球蛋白多肽粉，然而该方法脱色工艺较复杂，不利于扩大工业化生产。
技术实现思路
本专利技术的目的之一在于提供一种脱色效果好，蛋白含量高、适口性优良、蛋白消化吸收率高的酶解脱色血球蛋白粉。本专利技术的目的之二在于提供一种酶解脱色血球蛋白粉的制备方法，该方法工艺简单、生产效率高，适于工业化生产。本专利技术针对上述技术中提到的问题，采取的技术方案为：本专利技术的酶解脱色血球蛋白粉为一种浅黄色蛋白粉，该蛋白粉中低聚肽含量高达96％以上，且为分子量集中在300-1000Da的小分子混合肽类，易于消化吸收，有效提高了血红蛋白的利用价值。酶解脱色血球蛋白粉的制备方法，包括以下步骤：红血球的制备：新鲜猪血中加入质量为1-5％的柠檬酸钠，用工业用管式离心机高速离心分离，得到新鲜的红血球；柠檬酸钠可以使猪血抗凝和防变性，提高其热稳定性，保证营养成分不流失；一次酶解脱色：在新鲜的红血球中加入1-5倍体积的水，水溶液中含1-氨基-1-脱氧葡萄糖醇和琥珀酸，搅拌2-3h，调节pH为2.5-3.0，同时加入酸性蛋白酶，酶浓度与红血球浓度之比为1000-10000U/g，在37-40℃条件下恒温酶解6-8h，离心，除去离心沉淀部分得到一次酶解脱色液；二次酶解脱色：一次酶解脱色液加入中性蛋白酶,并依次加入聚丙烯酰胺和枯草芽孢杆菌，酶浓度与红血球浓度之比为1000-10000U/g，在37-40℃条件下恒温酶解6-8h；然后加入很少量的无害无残留氧化脱色剂后升温至55-60℃保温2-3h可得到二次酶解脱色液；浓缩与干燥：将二次酶解液经超滤膜除杂、纳滤膜浓缩、冷冻干燥得到浅黄色的酶解蛋白粉。作为优选，一次酶解脱色的水溶液中含0.5-1.5％的1-氨基-1-脱氧葡萄糖醇和3-8％的琥珀酸；1-氨基-1-脱氧葡萄糖醇和琥珀酸发挥协同作用，一方面能够促进酸性蛋白酶在强酸环境中，加速红血球裂解，释放出血红蛋白，同时一定程度上削弱血红素与珠蛋白α链的结合力，使得血红素从血红蛋白中分离，被释放的血红素絮凝形成沉淀，最终使得血红素沉淀和细胞碎屑以及其它的固体物质一起离心被除掉；另一方面，相比常规使用的有机溶剂，绿色环保，价格低廉，能够满足循环使用的需求，具有较高的工业应用价值。作为优选，中性蛋白酶、聚丙烯酰胺和枯草芽孢杆菌的质量比为1:0.3-0.5:0.2；聚丙烯酰胺和枯草芽孢杆菌的特殊存在，有利于加强中性蛋白酶的活性，使得血红蛋白水解成多肽、低聚肽、氨基酸等，尤其是促进分子量集中在300-1000Da的小分子混合肽类的生成，使得该蛋白粉易于消化吸收，有效提高了血红蛋白的利用价值；此外，能够使珠蛋白变性，从而使一次酶解液中残留的小部分血红素更易受到氧化，加强了氧化脱色剂对血红素的捕捉进而氧化，最终使得二次酶解脱色液中血红素的含量大大减少，改善了血球蛋白粉的纯度和成色。作为优选，超滤膜为截留分子量为3000Da的超滤膜，纳滤膜为截留分子量为500Da的纳滤膜。作为优选，采用分光光度法测定一次酶解脱色液和二次酶解脱色液中的血红素含量，评价其脱色效果。与现有技术相比，本专利技术的优点在于：本专利技术采用二次酶解法制备得脱色血球蛋白粉，工艺简单、生产效率高；该蛋白粉脱色效果好，颜色为浅黄色，其感官性状大幅改善；血球蛋白溶解度好，蛋白含量高，尤其富含大量的小分子低聚肽，并且提高了多种氨基酸的含量，能改善产品适口性、提高蛋白消化吸收率，大大提升了猪血红蛋白的经济附加值。具体实施方式下面通过实施例对本专利技术方案作进一步说明：实施例1：本专利技术的酶解脱色血球蛋白粉为一种浅黄色蛋白粉，该蛋白粉中低聚肽含量高达96％以上，且为分子量集中在300-1000Da的小分子混合肽类，易于消化吸收，有效提高了血红蛋白的利用价值。酶解脱色血球蛋白粉的制备方法，包括以下步骤：(1)红血球的制备：新鲜猪血中加入质量为1％的柠檬酸钠，用工业用管式离心机高速离心分离，得到新鲜的红血球；柠檬酸钠可以使猪血抗凝和防变性，提高其热稳定性，保证营养成分不流失；(2)一次酶解脱色：在新鲜的红血球中加入1倍体积的水，水溶液中含0.5％的1-氨基-1-脱氧葡萄糖醇和3％的琥珀酸，搅拌2h，调节pH为2.5，同时加入酸性蛋白酶，酶浓度与红血球浓度之比为1000U/g，在37℃条件下恒温酶解6h，离心，除去离心沉淀部分得到一次酶解脱色液；1-氨基-1-脱氧葡萄糖醇和琥珀酸发挥协同作用，一方面能够促进酸性蛋白酶在强酸环境中，加速红血球裂解，释放出血红蛋白，同时一定程度上削弱血红素与珠蛋白α链的结合力，使得血红素从血红蛋白中分离，被释放的血红素絮凝形成沉淀，最终使得血红素沉淀和细胞碎屑以及其它的固体物质一起离心被除掉；另一方面，相比常规使用的有机溶剂，绿色环保，价格低廉，能够满足循环使用的需求，具有较高的工业应用价值；(3)二次酶解脱色：一次酶解脱色液加入中性蛋白酶本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.酶解脱色血球蛋白粉及其制备方法，包括红血球的制备、一次酶解脱色、二次酶解脱色、浓缩与干燥，其特征在于：所述一次酶解脱色用水溶液中含1‑氨基‑1‑脱氧葡萄糖醇和琥珀酸。

【技术特征摘要】
1.酶解脱色血球蛋白粉及其制备方法，包括红血球的制备、一次酶解脱色、二次酶解脱色、浓缩与干燥，其特征在于：所述一次酶解脱色用水溶液中含1-氨基-1-脱氧葡萄糖醇和琥珀酸。2.根据权利要求1所述的酶解脱色血球蛋白粉及其制备方法，其特征在于：所述红血球的制备步骤为：新鲜猪血中加入质量为1-5％的柠檬酸钠，离心分离，得到新鲜的红血球。3.根据权利要求1所述的酶解脱色血球蛋白粉及其制备方法，其特征在于：所述一次酶解脱色步骤为：在新鲜的红血球中加入水、1-氨基-1-脱氧葡萄糖醇和琥珀酸，搅拌2-3h，调节pH为2.5-3.0，同时加入酸性蛋白酶，酶浓度与红血球浓度之比为1000-10000U/g，在37-40℃条件下恒温酶解6-8h，离心，除去离心沉淀部分得到一次酶解脱色液。4.根据权利要求1或3所述的酶解脱色血球蛋白粉及其制备方法，其特征在于：所述一次酶解脱色步骤中水的加入量为红血球体积的1-5倍，1-氨基-1-脱氧葡萄糖醇和琥珀酸的加入量为水体积的0.5-1.5％和3-8％。5.根据权利要求1所述的酶解脱色血球...

【专利技术属性】
技术研发人员：李健，
申请(专利权)人：兰溪市哥特生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33