厌氧血液储存和病原体失活方法技术

一种在病原体储存期间减少血液溶解和微粒形成的方法。氧气减少的血液组合物包含具有降低的溶血作用的SAGM和核黄素。氧气减少的血液组合物包含具有减少的微粒的SAGM和核黄素。氧气和病原体减少的血液组合物包含具有降低的溶血作用的CPAD和核黄素。氧气和病原体减少的血液组合物包含具有减少的微粒的SAGM和核黄素。

Anaerobic Blood Storage and Pathogen Inactivation

A method of reducing hemolysis and particulate formation during the storage of pathogens. Oxygen-depleted blood compositions contain SAGM and riboflavin with reduced hemolysis. Oxygen-depleted blood compositions contain SAGM and riboflavin with reduced particles. Blood compositions with reduced oxygen and pathogens contain CPAD and riboflavin with reduced hemolysis. Blood compositions with reduced oxygen and pathogens contain SAGM and riboflavin with reduced particles.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】厌氧血液储存和病原体失活方法相关申请的交叉引用本申请要求2016年5月27日提交的美国临时申请No.62/342,756和2017年1月11日提交的美国临时申请No.62/445,081的优先权。所有上述申请通过引用整体并入本文。
本公开涉及用于改善用于输血医学的血液和血液产品的质量和安全性的方法。
技术介绍
血液和血液成分用于输血是目前医学中的常见做法，但是对于暴露于免疫原性和致病性污染物的潜在可能性给患者带来风险。将收集的血液和血液成分储存长达数周的做法加剧了这种风险。通常通过过滤处理全血以除去白细胞(白细胞减少)，然后离心以分离血浆、血小板和红细胞的3种主要血液成分。然后将白细胞减少的包装红细胞(LRpRBC)悬浮在添加剂溶液中，例如美国的AS-1AS-3AS-5和AS-7或欧盟的SAGGM或PAGGSM，以延长冷藏期间的存储寿命长达42天。血浆通常在静脉切开和分离后24小时内冷冻(“新鲜冷冻血浆”--FFP或FP24)。FFP在使用前解冻，必须在解冻后5天内使用。通过单采血液成分术或通过汇集从多个全血单位分离的PLT级分来收集血小板(PLT)。通过单采血液成分术收集的PLT通常悬浮在添加剂溶液中，例如欧盟(尚未在美国)的PAS-C或PAS-FPLT在室温下保持搅拌以防止PLT活化，并且必须在收集后5至7天内使用。虽然由于储存条件，所有血液成分都易受供体病毒和细菌污染，但PLT比其他血液成分更容易受到细菌污染和增殖的影响。本领域的最新进展已经提供了通过利用UV光在储存之前用光敏剂照射血液成分来灭活细菌和病毒病原体(参见例如基于补骨脂素的系统、基于核黄素的系统)，也没有光敏剂(UV-Platelet系统)。这些系统交联并灭活致病物种中的DNA，从而降低它们对患者造成的风险。系统使用氨托沙林HCl(一种合成的补骨脂素)和UV-A光，以3J/cm2的辐射照射交联以交联病原体DNA，并在处理后去除或减少残留的氨托沙林和光产物。系统使用核黄素和位于313nm附近的UV光来靶向核黄素-核苷酸复合物的吸收。没有光敏剂的系统通常使用254nm的UV-C光。一些光敏剂和光产物在这些系统中的长期影响仍有待确定。本领域的其他进步包括使用S-303(CerusCorporation、Concord、CA)，一种基于奎纳克芥子气的烷基化剂，其包括易碎的锚定基团、交联核酸并灭活感染性细菌和其他病原体(参见Henschler等人“DevelopmentoftheS-303pathogeninactivationtechnologyforredbloodcellconcentrates，”TransfusMedHemother38：33-42(2011)(“Henschler2011”))。不受理论限制，认为有两种反应形成S-303病原体灭活过程的基础。第一反应是通过与S-303分子反应形成共价DNA和RNA加合物。该第一反应在约30分钟内完成。第二反应是将过量的S-303降解为毒性较小的副产物S-300。该分解与加合物反应同时发生，并在16-18小时内完成。虽然不限于任何特定理论，但认为与S-303形成共价DNA和RNA加合物是基于分子与核酸聚合物(例如DNA或RNA)的嵌入。如目前所理解的，当将S-303加入到RBC中时，由于其两亲性特征，它迅速(在数秒至数分钟内)通过膜，包括细胞和病毒包膜的膜，并插入核酸的螺旋区域。假设分子上易碎锚的存在通过分子上带正电的胺基吸引DNA或RNA的核酸链中的负电荷而有助于插入过程。紧密接近的S-303分子允许快速发生热环加成反应，将S-303分子共价键合到DNA或RNA上。据信共价连接阻止了复制或翻译过程的发生，并进一步阻止了其他病原体的产生。在形成共价加合物的过程中，通过水解除去易碎锚，产生毒性较小的化合物S-300。S-303自发分解为毒性较低的S300是病原体灭活过程中的第二反应。通常将过量的S-303(约0.2mM)加入到RBC中以提供足够的试剂以与样品中的所有DNA和RNA完全反应。但是，S-303是一种有毒化合物，因此为了安全地输送所得产品，必须除去残留的S-303。在Cerus病原体灭活过程中，这主要通过使S-303降解为S-300(一种毒性显着较低的化合物)来实现。降解过程通过水解发生；当S-303试剂最初与RBC混合时，S-303的水解由pH从低变高到高触发。残留S-303的分解动力学在高于10nM/L的浓度下快速，半衰期为约20分钟。如目前所理解的，S-303还具有与RBC单元中的其他亲核试剂反应的潜力，包括诸如磷酸盐、水和诸如蛋白质的大分子的小分子。虽然不限于任何特定理论，但为了减少与蛋白质的这些非特异性相互作用，在病原体灭活过程中将20mM谷胱甘肽(GSH)同时添加到RBC中。(见Henschler2011)。谷胱甘肽(GSH)是天然存在的抗氧化剂，存在于大多数细胞中，细胞内浓度为约5mM。如目前所理解的，GSH仅在细胞外血浆空间中分布，而S-303在膜上扩散并在细胞内外平衡。这允许GSH淬灭S-303的细胞外反应而对病原体灭活没有显着影响(参见Olcina等人的HypoxiaandtheDNAdamageresponse.HypoxiaandCancerinCancerDrugDiscoveryandDevelopment2014；Chapter2：21-30；MelilloG(ed))。本领域的最新进展还包括在添加剂溶液中使用厌氧储存的包装红细胞以减少通常与使用较老血液相关的储存损伤的量(参见Bitensky等人，US5,789,152；Bitensky等人，US6,162,396；和Bitensky等人，US8,071,282)。这些储存损伤被认为是源于在没有循环系统的正常生理环境的情况下储存血液所产生的代谢过程和副产物，并且去除或减少储存的血液中的有效氧可减少储存期间红细胞内有害氧化物质的产生。溶血被认为是血液质量和安全性的重要指标。在储存期间，溶血水平随着时间的推移而增加，并且游离血红蛋白的存在表明血液已经超过其保质期。由此，制定了法规和指南，限制了可用于输血的血液产品单元的可接受存储时间。溶血对血液安全的重要性使欧洲在必须丢弃血液之前设定了0.8％的上限。FDA建议溶血水平不超过1.0％。因此，减少溶血的方法延长了血液的安全保质期，降低了成本并增加了血液可用性。存储的血液健康和安全性的另一个指标是微粒。参见Cognasse等人，“Theroleofmicroparticlesininflammationandtransfusion：Aconcisereview，”Transfus.Apher.Sci.53(2)：159-167(2015)。微粒(Mps)由红细胞、白细胞、血小板和内皮细胞产生。认为微粒是由于正常的生理学、细胞凋亡或细胞损伤而产生的。通常，它们被描述为小于1000nm的颗粒。较低的范围有时表示为50nm，但没有关于下限的明确定义或一致。通常，流式细胞仪结合荧光表面抗体用于定量，但是没有普遍接受的MP测量方法，并且测量可取决于所使用的仪器。参见Poncelet等人“Tipsandtricksforflowcytometry-本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种减少具有减少的溶血的血液病原体方法，包括：从血液产品中除去氧气以制备氧气减少的血液制品；从所述血液产品中减少血液病原体包括：添加核黄素至终浓度为40至60μM；和使用265‑400nm之间的紫外光辐射含有所述核黄素的血液产品。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.05.27 US 62/342,756;2017.01.11 US 62/445,0811.一种减少具有减少的溶血的血液病原体方法，包括：从血液产品中除去氧气以制备氧气减少的血液制品；从所述血液产品中减少血液病原体包括：添加核黄素至终浓度为40至60μM；和使用265-400nm之间的紫外光辐射含有所述核黄素的血液产品。2.权利要求1所述的方法，还包括在厌氧条件下储存所述氧气减少病原体减少的血液产品。3.权利要求1所述的方法，还包括从所述血液产品中减少二氧化碳。4.权利要求1所述的方法，其中溶血在14天时小于0.2％，在21天时小于0.4％，在28天时小于0.5％，在35天时小于0.8％，或在42天时小于1.2％。5.权利要求1所述的方法，其中所述血液产品是全血或白细胞减少的全血。6.权利要求1所述的方法，其中含有所述核黄素的血液产品是氧气减少的血液制品。7.权利要求1所述的方法，其中所述血液产品是在抗凝剂溶液柠檬酸盐磷酸盐葡萄糖(CPD)、柠檬酸盐磷酸盐双葡萄糖(CP2D)或柠檬酸盐磷酸盐右旋糖腺嘌呤(CPDA1)中收集。8.权利要求1所述的方法，其中所述氧气减少病原体减少的血液产品是全血、白细胞减少的全血、或包装红细胞。9.一种减少具有减少的微粒形成的血液病原体的方法，包括：从血液产品中除去氧气以制备氧气减少的血液制品；从所述血液产品中减少血液病原体包括：添加核黄素至浓度为40至60μM；和使用265-400nm的紫外光辐射含有所述核黄素的血液产品。10.权利要求9所述的方法，还包括在厌氧条件下储存所述氧气减少病原体减少的血液产品。11.权利要求9所述的方法，还包括从所述血液产品中减少二氧化碳。12.权利要求11所述的方法，还包括在厌氧和二氧化碳减少的条件下储存所述氧气减少病原体减少的血液产品。13.权利要求9所述的方法，其中相对于在氧气存在下处理的样品，微粒的数量在第14天减少至少两倍，在第21天减少至少2倍，或者在42天减少至少2倍。14.权利要求9所述的方法，其中相对于在氧气存在下处理的样品，微粒的数量在14天时减少至少5倍，在21天时减少至少5倍，或者在42天时减少至少5倍。15.权利要求9所述的方法，其中所述核黄素浓度为约50μM。16.权利要求9所述的方法，其中所述血液产品是在柠檬酸盐磷酸盐葡萄糖(CPD)、柠檬酸盐磷酸盐双葡萄糖(CP2D)或柠檬酸盐磷酸盐右旋糖腺嘌呤(CPDA1)中收集。17.权利要求9所述的方法，其中所述血液产品是全血或白细胞减少的全血。18.权利要求9所述的方法，其中所述氧气减少病原体减少的血液产品是全血、白细胞减少的全血、或包装红细胞。19.氧气减少的全血，包括在CPD中收集的全血，具有400至60μM的核黄素，氧饱和度(SO2)小于25％，并且在37℃具有90mmHg或更低的pCO2，其中所述氧气减少的全血已经使用265至400nm之间的UV光辐射。20.权利要求19所述的氧气减少的全血，其中所述pCO2在37℃为5至90mmHg。21.权利要求19所述的氧气减少的全血，其中所述pCO2在37℃为70mmHg。22.氧气和二氧化碳减少的全血，包括在CPD中收集的全血，具有4...

【专利技术属性】
技术研发人员：塞缪尔·O·索韦米莫科克尔，杰弗里·萨顿，吉田达郎，
申请(专利权)人：新健康科学股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US