The invention discloses a preparation method of oral lysozyme particle preparation, which comprises the following steps: 1) preparation of one layer assembly microcapsule; 2) preparation of two layer assembly microcapsule. Layer-by-layer self-assembly technique was used to immobilize lysozyme. The assembly material is carboxymethyl starch sodium and chitosan. First, lysozyme and carboxymethyl starch sodium are assembled to form a layer of assembly microcapsules by electrostatic force, and then one layer of assembly microcapsules and chitosan are assembled to form two layers of assembly microcapsules. This layer-by-layer deposition method relies on weak interaction between polymer molecules, which makes the spontaneous association between layers form stable, complete structure and possess. Supramolecular structures or molecular aggregates with specific functions. The preparation process is mild and simple, and the matrix material used has wide application range and strong adaptability.
【技术实现步骤摘要】
一种口服溶菌酶微粒制剂的制备方法
本专利技术属于生物医药制备
,具体涉及一种口服溶菌酶微粒制剂的制备方法。
技术介绍
溶菌酶(lysozyme)是一种能水解细菌细胞壁肽聚糖的水溶性碱性蛋白酶。该酶广泛存在于多种组织中,其中以蛋清含量最为丰富。从鸡蛋清中提取分离的溶菌酶是由18种129个氨基酸残基构成的单一肽链。它富含碱性氨基酸,有4对二硫键维持酶构型,其N端为赖氨酸,C端为亮氨酸。主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键,使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽,导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。该酶还可与带负电荷的病毒蛋白直接结合,与DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐,使病毒失活;可分解溶壁微球菌、巨大芽孢杆菌、黄色八叠球菌等革兰氏阳性菌。因此,该酶具有抗菌、消炎、抗病毒等作用。溶菌酶是一种天然蛋白质,不会产生残留的问题,而且作为非特异性免疫因子不会使病原菌产生耐药性,是一种安全性很高的饲料酶制剂,有很好的前景。溶菌酶作为饲料添加剂对养殖动物的生长和免疫都有一定的影响。溶菌酶自身的抗菌、抗病毒的特性会提高动物的免疫性能, ...
【技术保护点】
1.一种口服溶菌酶微粒制剂的制备方法,其特征在于由以下步骤组成:1)一层组装微囊的制备称取一定量的羧甲基淀粉钠和溶菌酶,充分溶解在pH=1.2‑12的磷酸缓冲液中,按照一定比例将溶菌酶溶液缓慢滴入到CMS中,在一定温度下反应2小时,取适量组装液在10000rpm的转速下离心10 min,离心物用去离子水洗涤3次后再用无水乙醇洗涤,收集洗涤液和上清液并计算其中未组装上的溶菌酶含量,离心物即为一层组装微囊;2)二层组装微囊的制备配制一定浓度的壳聚糖溶液,将步骤1)制得的一层组装微囊用pH=1.2‑12的磷酸缓冲液溶解,缓慢滴入到CS溶液中,室温下反应2 h,在4000rpm的转 ...
【技术特征摘要】
1.一种口服溶菌酶微粒制剂的制备方法,其特征在于由以下步骤组成:1)一层组装微囊的制备称取一定量的羧甲基淀粉钠和溶菌酶,充分溶解在pH=1.2-12的磷酸缓冲液中,按照一定比例将溶菌酶溶液缓慢滴入到CMS中,在一定温度下反应2小时,取适量组装液在10000rpm的转速下离心10min,离心物用去离子水洗涤3次后再用无水乙醇洗涤,收集洗涤液和上清液并计算其中未组装上的溶菌酶含量,离心物即为一层组装微囊;2)二层组装微囊的制备配制一定浓度的壳聚糖溶液,将步骤1)制得的一层组装微囊用pH=1.2-12的磷酸缓冲液溶解,缓慢滴入到CS溶液中,室温下反应2h,在4000rpm的转速下离心3min,离心物用去离子水洗涤3次后再用丙酮洗涤,收集洗涤液和上清液并计算其中未组装上的溶菌酶含量,离心物即为二层组装微囊。2.如权利要求1所述的一种口服溶菌酶微粒制剂的制备方法,其特征在于步...
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