一种区分同一类型不同产地茶叶的方法技术

本申请公开了采用全自动顶空固相微萃取(headspace solid‑phase microextraction，HS‑SPME)法来萃取茶叶中的香气成分，并结合气相色谱‑质谱(gas chromatography‑mass spectrometry，GC‑MS)来分离和鉴定茶叶的香气成分，利用鉴定出来的茶叶香气成分相对含量，结合化学计量学方法(CA和PCA)来构建聚类和主成分模型，从而把同一类型不同产地的茶叶区分开。本发明专利技术为茶叶的品质审评鉴定(特别是基于香气成分的产地判别)提供了一种新的有效的评估和控制的方法。本发明专利技术方法操作简单易行、成本低、环保，能对茶叶的质量评估和控制提供一种高效、客观、规范化的方法。

A Method of Distinguishing Tea from Different Origins of the Same Type

This application discloses the use of fully automated headspace solid phase microextraction (HS SPME) to extract aroma components in tea, and the combination of gas chromatography mass spectrometry (GC MS) to isolate and identify aroma components in tea, using the relative content of identified aroma components in tea, combined with chemometrics. Methods (CA and PCA) were used to construct clustering and principal component models to distinguish the same type of tea from different origins. The present invention provides a new and effective evaluation and control method for tea quality evaluation and identification, especially for origin discrimination based on aroma components. The method has the advantages of simple operation, low cost and environmental protection, and can provide an efficient, objective and standardized method for tea quality evaluation and control.

【技术实现步骤摘要】
一种区分同一类型不同产地茶叶的方法
本专利技术属于茶叶
，具体而言，涉及一种利用全自动顶空固相微萃取结合气相色谱质谱和化学计量学方法来区分同一类型不同产地茶叶的方法。
技术介绍
茶是世界上最受欢迎的饮料之一，被全世界2/3以上的人所消费。消费者对茶叶的青睐程度主要取决于茶叶的品质和滋味。茶叶的品质，一般是指茶叶的色、香、味、形与叶底。茶叶作为一种饮料，就饮用需要而言，茶汤的香气和滋味是茶叶品质的核心，其中香气是觉得茶叶品质好坏的一个很重要的因素，也是捕获和培养消费者忠诚度最重要的因素，是决定茶叶价格的重要因子。此外，茶叶中复杂的化学成分及其多维的贡献是决定茶叶品质的关键因素。自古以来，对茶叶的品质审评都是由一些经过训练或经验丰富的感官评审专家来评估的。这种茶叶感官评价，是以人的嗅觉、味觉、视觉、触觉等感官察觉审视茶叶外形和叶底的粗细、匀整度、嫩度以及色泽，嗅杯中叶底的香气，鉴别茶汤的色泽，品尝其滋味和香气从而进行综合评价的一种方法。尽管感官审评法具有快速、简单等优点而被广泛使用但它毕竟是一项经验活动，主观色彩较强，评审结果容易受到经验、外部环境和评审员自身条件的影响，而且感官审评法对茶叶香气的审评还具有无量化的标准、无法进行实时在线监控、无法做到标准化和真正客观化的等缺点。并且，茶叶香气成分容易受很多因素影响，比如：产地、茶树品种、栽培条件、采摘季节及质量、制茶工艺及储藏条件等。因此，采用感官审评法来评价茶叶品质这种方法会得到不一致和不准确的结果。急需建立一种更标准和有效的方法来客观的评估茶叶的品质。HS-SPME是一种集萃取、浓缩和进样为一体且无需任何溶剂的样品前处理技术。且HS-SPME结合GC-MS已经被成功用于很多茶叶的香气成分鉴定。然而，HS-SPME结合GC-MS法分析鉴定茶叶香气成分并进一步通过化学计量学方法(CA和PCA)来量化评价茶叶品质和区分同一类型不同产地茶叶的方法鲜有报道。中国专利申请号201510652180.6公开了一种利用近红外光谱技术鉴别茶叶品种的方法，该方法用近红外光谱仪获取茶叶样本的近红外漫反射光谱，并对所述光谱进行数学处理。但是，该方法不能获取茶叶成分，特别是香气的具体信息，对不同茶叶的香气成分无法鉴别。中国专利申请号201710164063.4公开了一种快速、无损的茶叶产地鉴定方法，其采用质子转移反应－飞行时间质谱仪对茶叶进行无损分析，并对质谱数据进行分析，建立识别模型，以鉴定茶叶产地。中国专利申请号201711042224.9公开了一种茶叶元素指纹图谱的构建方法，其用于鉴别茶叶产地，包括用微波消解仪消解茶叶，并用电感耦合等离子体质谱测定茶叶样品中元素含量，进一步将茶叶元素组成转化为元素指纹图谱，用以鉴定茶叶产地。但是，该方法也不涉及茶叶香味成分的鉴定。中国专利申请号201711321322.6公开了通过GC×GC-TOF/MS技术建立茶叶中香精的高通量筛查检测方法，并建立茶叶中香精快速筛查数据库以及茶叶中香气成分数据库。该专利申请不涉及茶叶产地鉴定方法，也没有公开对香气成分进行化学计量。顶空固相微萃取(HS-SPME)是一种绿色环保型样品分析前处理技术，具有灵敏、快速、操作简单、样品用量少、不用溶剂的优点，可实现选择性萃取，富集到的目标物能在气相色谱-质谱仪(GC-MS)上直接进行分析，目前已广泛应用在各种食品和药品挥发性成分的研究中。然而，利用茶叶的香气成分信息，结合化学计量学方法(CA和PCA)来区分同一类型不同产地茶叶的方法鲜有报道。鉴于以上原因，特提出本专利技术。
技术实现思路
针对上述现有技术存在的问题及不足，本专利技术提供一种利用全自动顶空固相微萃取结合气相色谱质谱和化学计量学方法来区分同一类型不同产地茶叶的方法，本专利技术方法采用HS-SPME结合GC-MS法来客观的定性和定量分析茶叶香气成分，可解决传统的感官评价茶叶品质的不足之处。同时在采用茶叶指纹图谱结合CA和PCA进一步分析可将同一类型不同产区的茶叶区分开来。这一方法的建立为茶叶品质评估提供了准确和可靠的审评依据，为茶叶的生产、加工以及消费者提供控制和评鉴的依据。本专利技术为茶叶的品质审评鉴定(特别是基于香气成分的产地判别)提供了一种新的有效的评估和控制的方法。本专利技术方法操作简单易行、成本低、环保，能对茶叶的质量评估和控制提供一种高效、客观、规范化的方法。在一个实施方案中，本申请涉及一种区分同一类型不同产地茶叶的方法，包括以下步骤：(1)将同一类型不同产地的茶叶样品粉碎为茶粉并进一步制备为用于顶空固相微萃取的样品；(2)用全自动顶空固相微萃取法(HS-SPME)，使用PDMS/DVB/CAR萃取纤维头萃取茶粉中的香气成分；(3)将萃取头中的香气成分解吸附，并通过气相色谱-质谱法(GC-MS)进行分离和鉴定，得到质谱数据；(4)将所述质谱数据在标准谱库中进行检索，进行定性和定量分析，得到香气成分各组分的相对含量；(4)利用所述香气成分各组分的相对含量，并结合香气成分各组分的CA和PCA化学计量学方法，将同一类型不同产地的茶叶区分开。在另一个的实施方案中，在步骤(2)中萃取30－90分钟，优选60分钟。在另一个的实施方案中，所述PDMS/DVB/CAR萃取纤维头是65μm的聚二甲硅氧烷/二乙烯基苯/碳烯萃取纤维头，生产厂家为美国Supelco公司。在一个的实施方案中，在步骤(3)中解吸附2－4分钟，优选3.5分钟。在一个的实施方案中，所述标准谱库是NIST08.L标准谱库，通过质谱匹配度和各组分的RI值进行定性，采用面积归一化法进行定量。该NIST08.L标准谱库为购买厂家仪器安装时自带。CA和PCA化学计量学方法所使用的软件为SIMCA-P15(Umetrics公司)，该方法是把将所有茶叶的香气成分的相对含量作为变量导入化学计量学软件中进行分析。具体实施方法为基于GC-MS的分析结果，将所分析茶叶样品的香气成分含量矩阵表(A样品×B种组分)输入多元统计学软件SIMCA-P15中进行分析。其中PCA是在尽可能保留原始变量信息的基础上，降低维数，通过由原始变量线性组合的主成分来最大程度提取有用的信息。通过PCA可以看出样品与样品之间的关系，变量(香气成分)和变量之间的关系，在化学模式识别中用于分类和聚类。聚类分析(CA)，是根据“物以类聚”的道理，对样品或指标进行分类的一种多元统计分析方法，它讨论的对象是大量的样品，要求能合理地按各自的特性来进行分类，没有任何模式可供参考或依循，即是在没有先验知识的情况下进行的。在一个实施方案中，在所述CA和PCA化学计量学方法中，采用小波光谱滤波法对所述香气成分各组分的相对含量进行预处理，以清除无效数据，得到一系列变量。在进一步的实施方案中，对所述变量进行降维处理，以产生新的变量用于进一步的分析。在另一实施方案中，在所述CA和PCA化学计量学方法中，采用小波光谱滤波法对所述香气成分各组分的相对含量进行预处理，以清除无效数据，得到一系列变量，并对所述变量进行降维处理，以产生新的变量用于进一步的分析。在另一个实施方案中，在所述CA化学计量学方法中涉及距离的计算，该计算采用欧式距离算法进行。在CA和PCA化学计量学方法中对数据进行的上述预处理，降维分析，以及欧式距离算法本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种区分同一类型不同产地茶叶的方法，包括以下步骤：(1)将各产地茶叶样品粉碎为茶粉并进一步制备为用于顶空固相微萃取的样品；(2)用全自动顶空固相微萃取法，使用PDMS/DVB/CAR萃取纤维头萃取茶粉中的香气成分；(3)将萃取头中的香气成分解吸附，并通过气相色谱‑质谱法(GC‑MS)进行分离和鉴定，得到质谱数据；(4)将所述质谱数据在标准谱库中进行检索，进行定性和定量分析，得到香气成分各组分的相对含量；(5)利用所述香气成分各组分的相对含量，并结合香气成分各组分的CA和PCA化学计量学方法，将同一类型不同产地的茶叶区分开。

【技术特征摘要】
1.一种区分同一类型不同产地茶叶的方法，包括以下步骤：(1)将各产地茶叶样品粉碎为茶粉并进一步制备为用于顶空固相微萃取的样品；(2)用全自动顶空固相微萃取法，使用PDMS/DVB/CAR萃取纤维头萃取茶粉中的香气成分；(3)将萃取头中的香气成分解吸附，并通过气相色谱-质谱法(GC-MS)进行分离和鉴定，得到质谱数据；(4)将所述质谱数据在标准谱库中进行检索，进行定性和定量分析，得到香气成分各组分的相对含量；(5)利用所述香气成分各组分的相对含量，并结合香气成分各组分的CA和PCA化学计量学方法，将同一类型不同产地的茶叶区分开。2.权利要求1所述的方法，其中在步骤(2)中萃取30－90分钟，优选60分钟。。3.权利要求2所述的方法，其中所述PDMS/DVB/CAR萃取纤维头是65μm的聚二甲硅氧烷/二乙烯基苯/碳烯萃取纤维头。4.权利要求1所述的方法，其中在步骤(3)中解吸附2－4分钟，优选3.5分钟。5.权利要求1所述的方法，其中所述标准谱库是NIST08.L标准谱库，通过质谱匹配度和各组分的RI值进行所述定性分析，采用面积归一化法进行所述定量分析。6.权利要求1所述的方法，其中茶粉是采用高速多功能粉碎机粉碎的，以40目过筛。7.权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：孟庆雄，
申请(专利权)人：云南清莲生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：云南,53