空间邻近化学发光法检测血清淀粉样蛋白A的试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术涉及一种空间邻近化学发光法检测血清淀粉样蛋白A的试剂盒及其检测方法。试剂盒包括：酶标记物、发光标记物、辅助剂、触发剂和校准品；其中，校准品包括不同浓度SAA抗原的校准品和0.1M磷酸盐稀释液；酶标记物包括过氧化物酶标记的SAA检测抗体和0.05M磷酸盐缓冲液；发光标记物包括9,10‑二氢吖啶标记的SAA捕获抗体和0.05M Tris缓冲液；辅助剂包括发光辅助剂和枸橼酸盐缓冲液。本发明专利技术采用试剂空间邻近发光分析检测技术，其作为一种真正意义上的均相化学发光技术，无需清洗、无需载体，没有包被过程，检测灵敏度高，特异性强，使得检测结果更真实可信；同时优化了反应时间和反应步骤，使操作更简单。

【技术实现步骤摘要】
空间邻近化学发光法检测血清淀粉样蛋白A的试剂盒及其检测方法
本专利技术涉及生物
，具体涉及一种空间邻近化学发光法检测血清淀粉样蛋白A的试剂盒及其检测方法。
技术介绍
感染性疾病是临床常见病和多发病，主要是由细菌、病毒和/或真菌等病原体入侵体内引起的炎性反应，多数伴有发热症状。抗菌药物治愈和挽救了众多患者生命的同时，其不合理应用和滥用也导致了众多不良后果，如细菌出现广泛、严重的耐药性。血清淀粉样蛋白是由104个氨基酸组成的多肽，其在天然状态时的相对分子质量约为12000～14000，血清的基因位于第11号染色体是近年发现的一种敏感的炎症标志物，是一种急性期反应蛋白，在急慢性炎性反应时，浓度明显升高，可达正常的1000倍以上；同时，在细菌和病毒感染的早期均可明显升高，创伤、烧伤等应激状态下也会快速增高。血清淀粉样蛋白A(SAA)是一种与心血管疾病发生有密切联系的细胞炎症因子，水平的升高与心血管疾病的发生呈正相关，并且能够早期预测心血管疾病终末事件。已有研究表明：在细菌、真菌、病毒感染、动脉粥样硬化、心血管疾病、急性移植排斥反应、肿瘤等疾病中均可检测到血清SAA升高。与C-反应蛋白(本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种血清淀粉样蛋白A的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：酶标记物、发光标记物、辅助剂、触发剂和校准品；其中，所述酶标记物的原料组分包括过氧化物酶标记的SAA检测抗体，所述发光标记物的原料组分包括9,10‑二氢吖啶标记的SAA捕获抗体。

【技术特征摘要】
1.一种血清淀粉样蛋白A的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：酶标记物、发光标记物、辅助剂、触发剂和校准品；其中，所述酶标记物的原料组分包括过氧化物酶标记的SAA检测抗体，所述发光标记物的原料组分包括9,10-二氢吖啶标记的SAA捕获抗体。2.根据权利要求1所述的血清淀粉样蛋白A的检测试剂盒，其特征在于：所述酶标记物的原料组分还包括0.05M磷酸盐缓冲液；优选地，制备方法包括：称取5mgHRP溶解于1mL蒸馏水中，之后加入0.2mL新配的0.1M过碘酸钠溶液，室温下避光搅拌20min，将上述溶液装入透析袋中，对1mMpH4.4的醋酸钠缓冲液透析，4℃过夜；加入20μL0.2MpH9.5碳酸盐缓冲液，然后立即加入1mg抗SAA单克隆抗体室温避光轻轻搅拌2h，加新配的4mg/mL硼氢化钠液，混匀，于4℃放置2h，将上述液装入透析袋中，对0.15MpH7.4PBS透析，4℃过夜；取出透析物，加适量甘油后置于-20℃冰箱保存。3.根据权利要求1所述的血清淀粉样蛋白A的检测试剂盒，其特征在于：所述发光标记物的原料组分还包括0.05MTris缓冲液；优选地，制备方法包括：将发光底物Acridan用500μL的DMF溶解；吸取溶解的Acridan41.3μL，加入0.05M硼酸钠缓冲液708.7μL，再加入250μL抗SAA单克隆抗体，翻转混匀4～5次，室温静置30min；将标记反应管置于摇床上，于2～8℃下混合过夜，取出加入适量甘油后置于-20℃冰箱保存。4.根据权利要求1所述的血清淀粉样蛋白A的检测试剂盒，其特征在于：所述辅助剂的组分包括发光辅助剂和pH6.0的枸橼酸盐缓冲液；优选地，制备方法包括：称取枸橼酸1.82g，枸橼酸钠10.45g，加纯水溶解并定容至1000mL，在枸橼酸盐缓...

【专利技术属性】
技术研发人员：奚伟红，史兵伟，廖鸳鸯，朱丹丹，
申请(专利权)人：无锡壹闪生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32