空间邻近化学发光法检测降钙素原的试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术涉及一种空间邻近化学发光法检测降钙素原的试剂盒及其检测方法。试剂盒包括：酶标记物、发光标记物、辅助剂、触发剂和校准品；其中，校准品包括不同浓度PCT抗原的校准品和0.1M磷酸盐稀释液；酶标记物的组分包括过氧化物酶标记的PCT检测抗体和0.05M磷酸盐缓冲液；发光标记物的组分包括9,10‑二氢吖啶标记的PCT捕获抗体和0.05M Tris缓冲液；辅助剂的组分包括发光辅助剂和枸橼酸盐缓冲液；触发剂选用0.05M Tris缓冲液。本发明专利技术提供的检测方法作为一种真正意义上的均相化学发光技术，无需载体，没有包被、洗涤过程，试剂盒组分少，且灵敏度高、重复性好、操作简单。

【技术实现步骤摘要】
空间邻近化学发光法检测降钙素原的试剂盒及其检测方法
本专利技术涉及生物
，具体涉及一种空间邻近化学发光法检测降钙素原的试剂盒及其检测方法。
技术介绍
降钙素原(PCT)由氨基酸组成，属于无激素活性的降钙素前肽物质，稳定性良好，半衰期长达25～30h。PCT一般产生于甲状腺素细胞，由特异性的蛋白水解形成降钙素。病理状态下，PCT经炎症细胞因子和细菌毒素刺激和诱导，分泌产生于甲状腺素外额度组织和器官。据报道，其水平在非感染性炎症反应中一般不会上升。大量学者一致认为：PCT水平在细菌感染时呈上升状，在局部炎症反应和病毒感染疾病时维持低水平状，此变化稳定且迅速，是鉴别细菌感染和病毒感染的最佳指标之一。降钙素原在健康人的血清中含量极低，但细菌感染时，除甲状腺滤泡细胞外，单核细胞、巨噬细胞、淋巴细胞、内分泌样细胞等都可以分泌PCT。PCT在感染2h后即可以明显升高，抗生素有效治疗后血中的PCT会下降，且免疫力低下患者同样适用；因此，PCT是监测细菌感染和治疗效果、以及预后判断的重要标志物之一。脓毒症最新定义为针对感染的宿主反应失调引起的致命性器官功能障碍，其发病机制涉及复杂的全身炎症网络效本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种降钙素原的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：酶标记物、发光标记物、辅助剂、触发剂和校准品；其中，所述酶标记物的原料组分包括过氧化物酶标记的PCT检测抗体，所述发光标记物的原料组分包括9,10‑二氢吖啶标记的PCT捕获抗体。

【技术特征摘要】
1.一种降钙素原的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：酶标记物、发光标记物、辅助剂、触发剂和校准品；其中，所述酶标记物的原料组分包括过氧化物酶标记的PCT检测抗体，所述发光标记物的原料组分包括9,10-二氢吖啶标记的PCT捕获抗体。2.根据权利要求1所述的降钙素原的检测试剂盒，其特征在于：所述酶标记物的原料组分还包括0.05M磷酸盐缓冲液；优选地，制备方法包括：称取5mgHRP溶解于1mL蒸馏水中，之后加入0.2mL新配的0.1M过碘酸钠溶液，室温下避光搅拌20min，将上述溶液装入透析袋中，对1mMpH4.4的醋酸钠缓冲液透析，4℃过夜；加入20μL0.2MpH9.5碳酸盐缓冲液，然后立即加入1mg抗PCT单克隆抗体室温避光轻轻搅拌2h，加新配的4mg/mL硼氢化钠液，混匀，于4℃放置2h，将上述液装入透析袋中，对0.15MpH7.4PBS透析，4℃过夜；取出透析物，加适量甘油后置于-20℃冰箱保存。3.根据权利要求1所述的降钙素原的检测试剂盒，其特征在于：所述发光标记物的原料组分还包括0.05MTris缓冲液；优选地，制备方法包括：将发光底物Acridan用500μL的DMF溶解；吸取溶解的Acridan41.3μL，加入0.05M硼酸钠缓冲液708.7μL，再加入250μL抗PCT单克隆抗体，翻转混匀4～5次，室温静置30min；将标记反应管置于摇床上，于2～8℃下混合过夜，取出加入适量甘油后置于-20℃冰箱保存。4.根据权利要求1所述的降钙素原的检测试剂盒，其特征在于：所述辅助剂的组分包括发光辅助剂和pH6.0的枸橼酸盐缓冲液；优选地，制备方法包括：称取枸橼酸1.82g，枸橼酸钠10.45g，加纯水溶解并定容至1000mL，在枸橼酸盐缓冲液...

【专利技术属性】
技术研发人员：奚伟红，张平，廖鸳鸯，朱丹丹，
申请(专利权)人：无锡壹闪生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32