样品中亚硝酸盐的检测方法技术

本发明专利技术提出了一种样品中亚硝酸盐的检测方法，所述方法包括：(1)在碱性条件下，将所述样品与蛋白沉淀剂进行混合处理，产生沉淀，以便得到沉淀液；(2)向所述沉淀液中加入活性炭，进行脱色处理，以便得到混合液；(3)将所述混合液进行过滤处理，收集滤液；以及(4)在酸性条件下，使所述滤液与显色剂发生显色反应，测定显色反应产物的吸光值，基于所述吸光值确定所述样品中亚硝酸盐含量。本发明专利技术的检测方法准确性高，灵敏度好，操作简便，适于规模化应用。

【技术实现步骤摘要】
样品中亚硝酸盐的检测方法
本专利技术涉及检测领域，具体地，本专利技术涉及样品中亚硝酸盐的检测方法。
技术介绍
亚硝酸盐广泛存在于人类环境中，是自然界中最普遍的含氮化合物。亚硝酸盐在酸性条件下为强氧化剂，进入人体或动物体后，可使血中低铁血红蛋白氧化成高铁血红蛋白，失去运氧的功能，致使组织缺氧，出现青紫而中毒。使用含有过量亚硝酸盐的食品或饲料会导致中毒，严重过量将导致死亡，所以需要对食品或饲料中亚硝酸盐进行检测。然而，目前测定亚硝酸盐含量的方法仍有待改进。
技术实现思路
本专利技术旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题至少之一。需要说明的是，本专利技术是基于专利技术人的下列发现而完成的：目前，常用的检测亚硝酸盐的方法是采用在弱碱性条件下除去蛋白质，在弱酸性条件下试样中的亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应，生成重氮化合物，再与N-1-萘基乙二胺偶合形成紫红色化合物，进行比色测定。然而，样品本身的颜色，尤其是颜色较深的样品，本身的色素物质会干扰后续对显色反应后溶液的比色，从而影响检测结果的准确性。有鉴于此，专利技术人预先将待进行显色反应的溶液采用活性炭脱色，从而能够有效地避免样品本身的颜色对显色反应的影响。进一步地，为了尽量减少活性炭脱色过程中对亚硝酸根离子的吸附，导致检测结果偏低，专利技术人对脱色处理时间、温度以及活性炭的用量进行研究，得到较优检测条件，由此，能够保证检测结果的准确性和灵敏度，并且操作简便，适于规模化应用。为此，在本专利技术的一个方面，本专利技术提出了一种样品中亚硝酸盐的检测方法。根据本专利技术的实施例，所述方法包括：(1)在碱性条件下，将所述样品与蛋白沉淀剂进行混合处理，产生沉淀，以便得到沉淀液；(2)向所述沉淀液中加入活性炭，进行脱色处理，以便得到混合液；(3)将所述混合液进行过滤处理，收集滤液；以及(4)在酸性条件下，使所述滤液与显色剂发生显色反应，测定显色反应产物的吸光值，基于所述吸光值确定所述样品中亚硝酸盐含量。为了避免样品本身的颜色对于显色反应及后续吸光值检测造成干扰，利用活性炭将经蛋白沉淀所得到的沉淀液进行脱色，由此，能够保证检测结果的准确性和灵敏度，并且操作简便，适于规模化应用。根据本专利技术的实施例，上述样品中亚硝酸盐的检测方法还可以具有下列附加技术特征：根据本专利技术的实施例，所述活性炭的粒径为60～120目。根据本专利技术的实施例，所述脱色处理是在超声条件下进行的。根据本专利技术的实施例，所述脱色处理是在20～60℃水浴中超声10～50min。根据本专利技术的实施例，基于1g所述样品，所述活性炭的用量为0.1～0.8g。根据本专利技术的实施例，所述酸性条件是通过向所述滤液中加入氯化铵缓冲液和乙酸溶液实现的。根据本专利技术的实施例，所述蛋白沉淀剂选自硫酸锌溶液，所述显色剂选自对氨基苯磺酸和N-1-萘基乙二胺。根据本专利技术的实施例，所述混合处理包括：将所述样品与水进行混合，并用氢氧化钠溶液调节混合液的pH值至8～9，加入硫酸锌溶液进行混合，再加入氢氧化钠溶液调节混合液的pH值至11～12。根据本专利技术的实施例，步骤(4)中，进一步包括：在所述酸性条件下，将所述滤液与水进行混合处理，测定所得到的混合液的吸光值，记作空白吸光值，基于所述显色反应产物的吸光值和空白吸光值，确定所述样品中亚硝酸盐含量。根据本专利技术的实施例，所述样品选自食品和/或饲料。本专利技术的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本专利技术的实践了解到。附图说明本专利技术的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：图1显示了根据本专利技术一个实施例的样品中亚硝酸盐的检测方法的流程示意图；图2显示了根据本专利技术一个实施例的标准曲线图；图3显示了根据本专利技术一个实施例的活性炭用量影响的分析示意图；图4显示了根据本专利技术一个实施例的超声温度影响的分析示意图；以及图5显示了根据本专利技术一个实施例的超声时间影响的分析示意图。具体实施方式下面详细描述本专利技术的实施例。下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本专利技术，而不能理解为对本专利技术的限制。需要说明的是，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。进一步地，在本专利技术的描述中，除非另有说明，“多个”的含义是两个或两个以上。在本专利技术的一个方面，本专利技术提出了一种样品中亚硝酸盐的检测方法。根据本专利技术的实施例，参见图1，该方法包括：S100混合处理在该步骤中，在碱性条件下，将样品与蛋白沉淀剂进行混合处理，产生沉淀，以便得到沉淀液。在蛋白沉淀剂作用下，样品中的蛋白质发生变性沉淀，从而避免其对后续显色反应造成干扰。专利技术人研究发现，若先进行脱色，即将样品与活性炭混合后再进行蛋白沉淀，容易造成蛋白沉淀不完全。根据本专利技术的实施例，蛋白沉淀剂选自硫酸锌溶液。由此，既可以有效地使蛋白变性沉淀，也不影响亚硝酸盐的存在，而某些蛋白沉淀剂在沉淀蛋白过程中，会夹带着少量亚硝酸盐一同沉淀，导致检测结果偏低。根据本专利技术的实施例，混合处理包括：将样品与水进行混合，并用氢氧化钠溶液调节混合液的pH值至8～9，加入硫酸锌溶液进行混合，再加入氢氧化钠溶液调节混合液的pH值至11～12。由此，以便充分使蛋白变性沉淀，避免其对后续显色反应及光学检测造成影响。根据本专利技术的实施例，样品选自食品和/或饲料。S200脱色处理在该步骤中，向沉淀液中加入活性炭，进行脱色处理，以便得到混合液。通过使亚硝酸根离子与显色剂发生显色反应，并对显色反应液进行光学检测，从而确定亚硝酸盐含量。由于样品本身的颜色会对显色反应及后续的光学检测造成影响，尤其是对颜色较深的样品。进而，专利技术人尝试在显色反应之前，对沉淀液进行脱色处理。专利技术人比较了几种脱色剂，例如活性炭、硅藻土、氧化铝、聚丙烯酰胺等，发现活性炭的脱色效果较好，并且对于后续检测影响较小，检测结果的准确性较高。根据本专利技术的实施例，活性炭呈粉末状。专利技术人发现，相比于颗粒状的活性炭，粉末状活性炭的脱色效果较好。根据本专利技术的具体实施例，活性炭的粒径为60～120目。根据本专利技术的实施例，脱色处理是在超声条件下进行的。由此，能够充分提高脱色效率。根据本专利技术的实施例，脱色处理是在20～60℃水浴中超声10～50min。专利技术人发现，活性炭实现脱色目的主要是通过其吸附样品中的色素，但是，在脱色过程中活性炭也容易吸附样品中的亚硝酸盐，从而造成检测结果偏低。进而，专利技术人通过对脱色处理条件进行研究，发现在20～60℃水浴中超声10～50min，不仅可以有效地脱除样品本身颜色，亚硝酸盐的吸附量很小，可以忽略，保证了检测结果的准确性。根据本专利技术的实施例，基于1g样品，活性炭的用量为0.1～0.8g。由此，可以保证检测结果的准确性。S300过滤处理在该步骤中，将混合液进行过滤处理，收集滤液。由此，以便除去蛋白沉淀和活性炭，避免其对后续显色反应及光学检测造成干扰。S400显色反应在该步骤中，在酸性条件下，将滤液与显色剂进行显色反应，测定显色反应产物的吸光值，基于吸光值确定样品中亚硝酸盐含量。根据本专利技术的实施例，显色剂选自对氨基苯磺酸和N-1-萘基乙二胺。亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应，生成重氮化合物本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种样品中亚硝酸盐的检测方法，其特征在于，包括：(1)在碱性条件下，将所述样品与蛋白沉淀剂进行混合处理，产生沉淀，以便得到沉淀液；(2)向所述沉淀液中加入活性炭，进行脱色处理，以便得到混合液；(3)将所述混合液进行过滤处理，收集滤液；以及(4)在酸性条件下，使所述滤液与显色剂发生显色反应，测定显色反应产物的吸光值，基于所述吸光值确定所述样品中亚硝酸盐含量。

【技术特征摘要】
1.一种样品中亚硝酸盐的检测方法，其特征在于，包括：(1)在碱性条件下，将所述样品与蛋白沉淀剂进行混合处理，产生沉淀，以便得到沉淀液；(2)向所述沉淀液中加入活性炭，进行脱色处理，以便得到混合液；(3)将所述混合液进行过滤处理，收集滤液；以及(4)在酸性条件下，使所述滤液与显色剂发生显色反应，测定显色反应产物的吸光值，基于所述吸光值确定所述样品中亚硝酸盐含量。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述活性炭的粒径为60～120目。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述脱色处理是在超声条件下进行的。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述脱色处理是在20～60℃水浴中超声10～50min。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，基于1g所述样品，所述活性炭的用量为0.1～0.8g。6.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋鸽，何娇，李慧娟，丁勇宝，刘海旭，
申请(专利权)人：内蒙古蒙牛乳业集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：内蒙古,15