The invention discloses a mouse cryopreserved sperm resuscitation fluid complex and its preparation method and application, and its constituents include base fluid, methyl B cyclodextrin MBCD and polyvinyl alcohol PVA. In the preparation method, methyl B cyclodextrin MBCD and polyvinyl alcohol PVA are dissolved in the basic solution, and then filtered through a bacterial filter to obtain the cryopreserved sperm resuscitation solution of the mouse. By adding methyl B cyclodextrin MBCD and polyvinyl alcohol PVA to sperm resuscitation solution, the invention promotes sperm capacitation process, enhances sperm energy acquisition ability, increases the number of sperm with fertilization ability, thereby increases the fertilization probability with eggs and improves fertilization rate. It is beneficial to the successful preservation of mouse sperm resources and the reconstruction of mouse strain resources.
【技术实现步骤摘要】
一种小鼠冻存精子复苏液复合物及其配制方法和应用
本专利技术属动物学实验动物学综合领域，具体涉及一种小鼠冻存精子复苏液复合物及其配制方法和应用。
技术介绍
小鼠精子冻存是目前保存基因工程小鼠品系最经济有效的方法，一些封闭群和杂交F1代小鼠的精子冻存复苏后的体外受精率较高，能够达到品系重建的目的，但C57BL/6冻融后精子的体外受精率较低，而该品系是基因工程小鼠的主要背景品系，为此，提高基因工程小鼠品系精子冻融后的体外受精率非常重要。小鼠自然交配情况下，精子需要经过雌性小鼠生殖道到达输卵管伞端，生殖道中的各种活性物质与精子作用使之超活化具备受精能力，该过程称为精子获能；现有的冻融精子的体外受精技术中，往往使用体外受精液(HTF)进行复苏精子，而冻存的小鼠精子复苏后，由于冻存、复苏操作的损伤，活力降低，从而受精能力降低，因而，如何提高冻融小鼠精子的受精率是种质资源保存过程中需要解决的难题。
技术实现思路
为了克服上述现有技术的缺陷，本专利技术提出了一种小鼠冻存精子复苏液复合物，其组成成分包含基础液、甲基B环糊精MBCD和聚乙烯醇PVA。本专利技术复苏液复合物中，所述基础液、...
【技术保护点】
1.一种小鼠冻存精子复苏液复合物，其特征在于，其组成成分包含基础液、甲基B环糊精MBCD和聚乙烯醇PVA；所述基础液为不含有钙镁离子的磷酸盐缓冲液DPBS。
【技术特征摘要】
1.一种小鼠冻存精子复苏液复合物，其特征在于，其组成成分包含基础液、甲基B环糊精MBCD和聚乙烯醇PVA；所述基础液为不含有钙镁离子的磷酸盐缓冲液DPBS。2.如权利要求要求1所述的小鼠冻存精子复苏液复合物，其特征在于，所述基础液、甲基B环糊精MBCD、聚乙烯醇PVA之间的用量比为100ml：(80-140)毫克：(20-100)毫克。3.如权利要求要求1所述的小鼠冻存精子复苏液复合物，其特征在于，进一步包括ATP。4.一种小鼠冻存精子复苏液复合物的配制方法，其特征在于，其具体步骤如下：将甲基B环糊精MBCD和聚乙烯醇PVA溶解于基础液中，待充分溶解后，通过细菌过滤器过滤，得到如权利要求1所述的小鼠冻存精子复苏液复合物；...
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