在普通培养箱中培养双歧杆菌的方法及专用的培养基、对应的计数方法技术

本发明专利技术提供了一种在普通培养箱中培养双歧杆菌的方法及专用的培养基、对应的计数方法，其中，专用的培养基包括MRS‑乳糖固体培养基和果胶固体培养基，MRS‑乳糖固体培养基铺于平板底层且与菌液混合，果胶固体培养基铺于MRS‑乳糖固体培养基之上，平板倒置，37℃普通恒温培养箱中培养。本发明专利技术的有益之处在于：本发明专利技术提供的专用培养基，双层铺设，使得双歧杆菌在普通的恒温培养箱中培养成为可能；本发明专利技术提供的双歧杆菌的培养方法，采用普通的恒温培养箱即可实施，无需使用厌氧培养箱、厌氧培养罐、亨盖特滚管等，不仅在设备和药剂方面投入的资金降低，而且操作简单，普通化验员经过简单培训即可进行操作。

Method of cultivating Bifidobacterium in ordinary incubator, special medium and corresponding counting method

The invention provides a method for cultivating bifidobacteria in a common incubator, a special culture medium and a corresponding counting method. The special culture medium includes MRS lactose solid culture medium and pectin solid culture medium, MRS lactose solid culture medium is laid on the bottom of the plate and mixed with the bacterial solution, pectin solid culture medium is laid on the MRS lactose solid culture medium, and the plate is inverted. The cells were cultured in a normal constant temperature incubator at 37 C. The advantages of the present invention lie in: the special culture medium provided by the present invention and double laying make it possible for Bifidobacterium to be cultured in a common constant temperature incubator; the cultivation method of Bifidobacterium provided by the present invention can be implemented in a common constant temperature incubator without the use of an anaerobic incubator, an anaerobic incubator, a Hungate roll tube, etc., and not only in terms of equipment and pharmaceuticals, but also in the application of equipment and pharmaceuticals. The input funds are reduced, and the operation is simple. The ordinary laboratory technician can operate after simple training.

【技术实现步骤摘要】
在普通培养箱中培养双歧杆菌的方法及专用的培养基、对应的计数方法
本专利技术涉及一种培养细菌的方法、专用的培养基和对应的计数方法，具体涉及一种在普通培养箱中培养双歧杆菌的方法及专用的培养基、对应的计数方法，属于微生物

技术介绍
双歧杆菌(bifidobacterium)是人和动物肠道内重要的生理性细菌，它的存在直接影响消化道的健康状况。双歧杆菌作为主要的原籍菌，直接参与了宿主的消化、营养、代谢、吸收、免疫和抗感染过程。随着对双歧杆菌的生物特性和微生态学意义研究的不断深入，双歧杆菌的微生态制剂大量应运而生，使用双歧杆菌制备的益生菌制剂既用于人类疾病的预防和治疗，也用于动物疾病的预防和治疗，还用于保健品(如抗衰老的保健品)。双歧杆菌的微生态制剂是活菌制剂。作为活菌制剂，活菌数的多少是产品质量的一个重要指标。双歧杆菌是一种严格的厌氧菌，对氧非常敏感，因此其培养、计数必须采用厌氧培养技术。目前，双歧杆菌主要是用厌氧培养箱、厌氧培养罐、亨盖特滚管等来培养的。采用厌氧培养技术培养双歧杆菌，不仅在设备和药剂方面投入的资金较多，而且操作繁琐，需要操作人员具备较高的操作技能。因设备和人员技能不本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种在普通培养箱中培养双歧杆菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：Step1：配制培养基MRS‑乳糖固体培养基：乳糖20g，蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉5g，无水乙酸钠5g，吐温‑80 1ml，柠檬酸氢二铵2g，磷酸氢二钾2g，七水硫酸镁0.58g，一水硫酸锰0.19g，L‑半胱氨酸盐酸盐1g，琼脂10g，加水1000ml，pH6.2～6.5，分装到三角瓶中，115℃灭菌20min；果胶固体培养基：果胶30g，琼脂7g，加水1000ml，放入水浴锅中加热，充分搅拌均匀，115℃灭菌20min；Step2：配制稀释溶液NaCl‑蛋白胨溶液：氯化钠4.3g，蛋白胨1.0g，加水1000ml...

【技术特征摘要】
1.一种在普通培养箱中培养双歧杆菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：Step1：配制培养基MRS-乳糖固体培养基：乳糖20g，蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉5g，无水乙酸钠5g，吐温-801ml，柠檬酸氢二铵2g，磷酸氢二钾2g，七水硫酸镁0.58g，一水硫酸锰0.19g，L-半胱氨酸盐酸盐1g，琼脂10g，加水1000ml，pH6.2～6.5，分装到三角瓶中，115℃灭菌20min；果胶固体培养基：果胶30g，琼脂7g，加水1000ml，放入水浴锅中加热，充分搅拌均匀，115℃灭菌20min；Step2：配制稀释溶液NaCl-蛋白胨溶液：氯化钠4.3g，蛋白胨1.0g，加水1000ml，搅拌至充分溶解，调节至pH7.0，121℃灭菌15min；Step3：稀释在无菌操作条件下，称取乳酸菌菌粉样品或量取乳酸菌发酵液样品，用稀释溶液稀释到所需的稀释梯度，选择若干个适宜的稀释梯度，吸取1ml菌液移入灭菌的平板中；Step4：倒平板将冷却到45℃的MRS-乳糖固体培养基均匀的倒入平板中，与菌液混合均匀，冷却到凝固；MRS-乳糖固体培养基凝固后，在MRS-乳糖固体培养基的表面倒入冷却到45℃的果胶固体培养基；Step5：培养果胶固体培养基完全凝固后，将平板倒置，放入37℃普通恒温培养箱中培养。2.在普通培养箱中培养双歧杆菌专用的培养基，其特征在于，所述专用的培养基包括：MRS-乳糖固体培养基：乳糖20g，蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉5g，无水乙酸钠5g，吐温-801ml，柠檬酸氢二铵2g，磷酸氢二钾2g，七水硫酸镁0.58g，一水硫酸锰0.19g，L-半胱氨酸盐酸盐1g，琼脂10g，加水1000ml，pH6.2～...

【专利技术属性】
技术研发人员：文学，
申请(专利权)人：善恩康生物科技苏州有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32