一种筛选高效固氮溶磷菌的方法技术

本发明专利技术公开了一种筛选高效固氮溶磷菌的方法，首先将土壤与水混合后震荡培养，离心后弃去上清液；按比例向沉淀中加入含外加碳源溶磷培养基,进行培养；所得培养液离心后弃去上清液，按比例加入不含外加碳源固氮培养基，进行培养；所得培养液离心后弃去上清液，按比例加入不含外加碳源溶磷培养基，进行培养；交替进行培养多次后，采用溶磷固氮培养基筛选出目标菌株。通过采用固氮培养基和溶磷培养基两种培养基交替培养的方法进行筛选，接着将驯化培养液稀释后涂布筛选出单株菌。极大的缩短了筛选周期。具有选择性强、工作量小、能大大缩短筛选周期等优点，是一种高效、快速的筛选固氮溶磷菌方法。

A Method for Screening High Efficient Nitrogen-fixing and Phosphorus-solubilizing Bacteria

The invention discloses a method for screening high-efficient nitrogen-fixing and phosphorus-solubilizing bacteria. Firstly, the soil and water are mixed and cultured by shaking after centrifugation, and the supernatant is discarded after centrifugation; then, the supernatant is discarded after centrifugation and the supernatant is discarded after centrifugation according to proportion; and then, the obtained culture liquid is discarded after centrifugation. The clear liquid was proportionally added into the phosphate-soluble medium without additional carbon source for culture; after alternating cultivation for many times, the target strains were screened out by the phosphate-soluble and nitrogen-fixing medium. The strains were screened by alternating culture of nitrogen-fixing medium and phosphorus-dissolving medium, and then the domesticated medium was diluted and coated to screen individual strains. The screening cycle is greatly shortened. It has the advantages of strong selectivity, small workload and shorter screening cycle. It is an efficient and rapid screening method for nitrogen-fixing and phosphorus-solubilizing bacteria.

【技术实现步骤摘要】
一种筛选高效固氮溶磷菌的方法
本专利技术涉及一种环境微生物技术，尤其涉及一种筛选高效固氮溶磷菌的方法。
技术介绍
土壤氮磷元素缺乏是影响粮食作物或其他植物生物量的重要因素，普通通过施加大量的氮肥、磷肥等增加土壤中的氮磷含量。但是这类化肥利用率较低，未被植物及时利用的氮磷化合物，若以不能被土壤胶体吸附，就会随下渗的土壤水转移至土壤深处从而造成污染，可导致河流、湖泊的富营养化等。而从土壤中直接筛选出具有高效固氮溶磷的微生物，即能够起到提高土壤氮磷的作用，还不会对土壤造成污染。所以开发高效经济的固氮溶磷技术具有重要意义。目前，筛选具有固氮或溶磷的富集筛选方法成熟，但是对具有高效聚磷能力的固氮菌株的富集筛选方法较少。目前比较常用的筛选方法是通过固氮培养基富集固氮菌，然后通过固体培养基进行分离纯化，筛选的单菌落进行解磷效果试验。该方法富集时间较长，且筛菌针对性较低，使得筛菌效率大大降低。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种高效、快速的筛选高效固氮溶磷菌的方法。本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的：本专利技术的筛选高效固氮溶磷菌的方法，包括以下步骤：(a)首先将土壤与水混合后震荡培养，离心本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种筛选高效固氮溶磷菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：(a)首先将土壤与水混合后震荡培养，离心后弃去上清液；(b)按比例向沉淀中加入含外加碳源溶磷培养基,进行培养；(c)将步骤(b)所得培养液离心后弃去上清液，按比例加入不含外加碳源固氮培养基，进行培养；(d)将步骤(c)所得培养液离心后弃去上清液，按比例加入不含外加碳源溶磷培养基，进行培养；(e)按照步骤(c)和(d)的方法交替进行培养多次；(f)采用溶磷固氮培养基筛选出目标菌株。

【技术特征摘要】
1.一种筛选高效固氮溶磷菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：(a)首先将土壤与水混合后震荡培养，离心后弃去上清液；(b)按比例向沉淀中加入含外加碳源溶磷培养基,进行培养；(c)将步骤(b)所得培养液离心后弃去上清液，按比例加入不含外加碳源固氮培养基，进行培养；(d)将步骤(c)所得培养液离心后弃去上清液，按比例加入不含外加碳源溶磷培养基，进行培养；(e)按照步骤(c)和(d)的方法交替进行培养多次；(f)采用溶磷固氮培养基筛选出目标菌株。2.根据权利要求1所述的快速筛选高效固氮溶磷菌的方法，其特征在于，所述步骤(a)中按照1：10的体积比将土壤与水混合，在30℃恒温振荡培养24h，离心后弃去上清液。3.根据权利要求1所述的快速筛选高效固氮溶磷菌的方法，其特征在于，所述步骤(b)中按照沉淀＝1：10的体积比向沉淀中加入含外加碳源溶磷培养基，在30℃恒温培养24h。4.根据权利要求1所述的快速筛选高效固氮溶磷菌的方法，其特征在于，所述步骤(c)中按照沉淀＝1：10的体积比向沉淀中加入不含外加碳源固氮培养基，在30℃恒温培养24h。5.根据权利要求1所述的快速筛选高效固氮溶磷菌的方法，其特征在于，所述步骤(d)中按照沉淀＝1：10的体积比向沉淀中加入不含外加碳源溶磷培养基，在30℃恒温培养24h。6.根据权利要求1所述的快速筛选高效固氮溶磷菌的方法，其特征在于，所述步骤(e)中按照步骤(c)和(d)的方法交替进行培养各5-7次。7.根据权利要求1至6任一项所述的快速筛选高效固氮溶磷菌的方法，其特征在于：所述含外加碳源溶磷培养基成分包括：10g/L葡萄糖，5g/LCaPO4，0.1g/L(NH4)2SO4，0.2g/LKCl，0.25g/L...

【专利技术属性】
技术研发人员：邵佳，孙庆业，黄国平，邱峰，
申请(专利权)人：安徽省交通航务工程有限公司，安徽大学，
类型：发明
国别省市：安徽,34