用于诱导胆管癌细胞凋亡的复方抑瘤饮及其制备方法技术

本发明专利技术提出一种用于诱导胆管癌细胞凋亡的复方抑瘤饮及其制备方法，属于中药制剂技术领域，能够平衡胆管癌细胞的增殖与凋亡速度，通过有效诱导胆管癌细胞的凋亡抑制肿瘤的生长。该复方抑瘤饮由下列重量份的原料组成：附子2‑40g、白花蛇舌草3‑60g、西洋参1‑20g、黄芪2‑40g、灵芝1‑20g、苦杏仁1‑20g、桔梗1‑20g、光果甘草2‑20g。本发明专利技术能够作为胆管癌的有效治疗手段。

Compound Yiliu Yin for Inducing Apoptosis of Cholangiocarcinoma Cells and Its Preparation Method

The invention provides a compound anti-tumor drink for inducing apoptosis of cholangiocarcinoma cells and a preparation method thereof, belonging to the technical field of traditional Chinese medicine preparations, which can balance the proliferation and apoptosis speed of cholangiocarcinoma cells and inhibit the growth of tumors by effectively inducing apoptosis of cholangiocarcinoma cells. The compound anti-tumour drink consists of the following ingredients: aconite 2 40g, Hedyotis diffusa 3 60g, American ginseng 1 20g, Astragalus 2 40g, Ganoderma lucidum 1 20g, bitter almond 1 20g, Platycodon grandiflorum 1 20g, glabra licorice 2 20g. The invention can be used as an effective treatment method for cholangiocarcinoma.

【技术实现步骤摘要】
用于诱导胆管癌细胞凋亡的复方抑瘤饮及其制备方法
本专利技术属于中药制剂
，尤其涉及一种用于诱导胆管癌细胞凋亡的复方抑瘤饮及其制备方法。
技术介绍
胆管癌(CCA)是一种原发于不同部位胆管上皮细胞的恶性肿瘤，按其发生位置可分为肝内胆管癌、肝门部胆管癌和肝外胆管癌，相比于其他消化道恶性肿瘤，其生存率较低，是最致命的恶性肿瘤之一，具有局部侵袭性和高转移率，并且预后差。虽然世界范围内发病率和病因学存在差异，但在过去几十年中，胆管癌(CCA)的发病率和死亡率在全球范围内呈不断上升的趋势。当前对胆管癌的治疗最有效的方法是根治性手术切除，而胆管癌的早期进展在很大程度上是无症状的。尽管胆管癌生长缓慢，转移发生较晚，但由于大多数患者明确诊断时已是晚期，已无法行根治性手术，化疗及放疗效果也不佳，因此胆管癌的预后很差，治疗效果不理想，总体5年生存率小于5％。即使进行了完全性手术切除的患者，仍有50％以上最终发生局部复发或远处转移。由于胆管癌对放疗、化疗均不敏感，目前还缺乏系统性治疗手段，其确诊后的平均生存时间仅为12个月，因此迫切需要寻找新的、有效的细胞毒药物来治疗胆管癌患者。随着细胞凋亡的概念被引入肿瘤研究，大量研究表明肿瘤的发生可能与细胞增殖与凋亡的速度平衡失调有关，因此诱导肿瘤细胞凋亡成为了治疗的新方向。我国传统医学中的中医药，已被证实不仅能有效地诱导肿瘤细胞凋亡，特异性地杀伤癌细胞，而且对正常组织和细胞不良反应小，已成为多种肿瘤综合性治疗的主要方式。大量研究证实中医药具有清热解毒、软坚散结、理气健脾、攻毒消积、益气养阴等多重功效，可诱导肿瘤细胞的凋亡。中医药包含许多不同的化学成分，它能协同作用提高治疗效果。因此，结合临床研究以及相关药理分析，提供一种能够平衡肿瘤细胞增殖与凋亡的速度，有效诱导胆管癌细胞凋亡，从而抑制肿瘤生长的中药配方将具有显著意义。
技术实现思路
本专利技术提出一种用于诱导胆管癌细胞凋亡的复方抑瘤饮及其制备方法，该中药配方能够平衡肿瘤细胞增殖与凋亡的速度，通过有效诱导胆管癌细胞的凋亡，从而抑制肿瘤的生长，可作为胆管癌的有效治疗手段。为了达到上述目的，本专利技术提供了一种用于诱导胆管癌细胞凋亡的复方抑瘤饮，由下列重量份的原料组成：附子2-40g、白花蛇舌草3-60g、西洋参1-20g、黄芪2-40g、灵芝1-20g、苦杏仁1-20g、桔梗1-20g、光果甘草2-20g。作为优选，由下列重量份的原料药组成：附子2-20g、白花蛇舌草3-40g、西洋参1-10g、黄芪2-20g、灵芝1-10g、苦杏仁1-10g、桔梗1-10g、光果甘草2-10g。作为优选，所述胆管癌细胞为QBC939细胞。本专利技术还提供了一种如上述技术方案所述的用于诱导胆管癌细胞凋亡的复方抑瘤饮的制备方法，包括以下步骤：将原料组分加6-8倍水充分浸泡，加热至沸腾后，文火煎煮1.5h-2h，过滤，取2倍原料组分的煎煮液，于60-65℃减压浓缩至所需浓度，得到复方抑瘤饮。作为优选，所述复方抑瘤饮结合剂型工艺及医用辅料要求的不同通过配入适量医用辅料即可制成医药上可接受的任何剂型。与现有技术相比，本专利技术的优点和积极效果在于：本专利技术提供的复方抑瘤饮君、臣、佐、使配伍严谨，除桔梗以外，其它各味药物均有直接或间接的抗肿瘤作用，可治疗寒热阴阳各种体质各证型的癥坚积聚肿瘤疾病，达到标本兼治、扶阳通脉、解毒益气、化瘀散结之功效，切合癥坚积聚肿瘤的共性病机。该复方抑瘤饮能够平衡肿瘤细胞增殖与凋亡的速度，通过有效诱导胆管癌细胞的凋亡，从而抑制肿瘤的生长，可作为胆管癌的有效治疗手段。附图说明图1为本专利技术实施例所提供的随复方抑瘤饮浓度的增加和时间的延长，胆管癌细胞的增殖抑制示意图；图2为本专利技术实施例所提供的复方抑瘤饮对胆管癌QBC939细胞增殖的影响示意图，其中与24h比较，*P＜0.05；各组间比较(24h，P＜0.05；48h，P＜0.05)；图3为本专利技术实施例所提供的复方抑瘤饮抑瘤饮对胆管癌QBC939细胞的克隆形成能力的影响示意图，其中与PBS组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001，上图中1为PBS对照组，2、3、4、5分别为4、6、8、12mg/ml抑瘤饮药物组的细胞集落数；图4为本专利技术实施例所提供的Hochest33258染色观察抑瘤饮对胆管癌细胞形态的影响示意图，箭头所指为典型的凋亡细胞，其中1为PBS对照组，2为12mg/ml抑瘤饮药物组400倍下观察的Hochest33258染色情况；图5为本专利技术实施例所提供的不同浓度抑瘤饮处理胆管癌QBC939细胞的早期凋亡和晚期凋亡示意图，其中与PBS组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001，上图中1为PBS对照组，2、3、4分别为6、8、12mg/ml抑瘤饮药物组，经流式细胞仪检测所得出的散点图，横轴为Annexin-V染色，纵轴为PI染色；图6为本专利技术实施例所提供的对照组和复方抑瘤饮药物组分别对PARP、Caspase-9、Caspase-12、Bcl-2和Bax蛋白的相对表达量示意图，其中，与PBS组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。具体实施方式下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。本专利技术实施例提供了一种用于诱导胆管癌细胞凋亡的复方抑瘤饮，由下列重量份的原料组成：附子2-40g、白花蛇舌草3-60g、西洋参1-20g、黄芪2-40g、灵芝1-20g、苦杏仁1-20g、桔梗1-20g、光果甘草2-20g。上述配方中附子、白花蛇舌草为君药，西洋参、黄芪、灵芝为臣药，杏仁、桔梗为佐药，光果甘草为使药，各原料功效如下：制附子，味辛、甘，性大热；有毒；回阳救逆、补火助阳，散寒止痛；气雄行散，可升可降，走而不守，可通行人体十二经三百六十五络，消除一切沉寒痼冷、寒痰死血，瘀毒积聚肿瘤等。《神农本草经》记载：“附子，味辛性温。主风寒咳逆邪气，温中，金创，破癥坚积聚、血瘕，寒湿拘挛、膝痛不能行走”中提到，破癥坚积聚、血瘕，就是现代医学的肿瘤等疾患。白花蛇舌草，甘、淡，凉；清热解毒，利湿消痈，抗癌，用于恶性肿瘤。附子与白花蛇舌草配伍，一热、一凉，一温、一清，清可袪毒而不生寒，温可抚阳而不助火，二药配伍，标本兼治，扶阳通脉，解毒散结，适于任何寒热体质证型的肿瘤病人。西洋参性凉，味甘、微苦，大补元气，安神益智；黄芪，味甘、性温，补气固表，升补托毒；灵芝，味甘，性平。益气血，安心神，健脾胃。三药配伍，大补元气，补五脏六腑表里内外之气，安神定志、内敛元气，与附子配伍，辛甘化阳，大补元阳之气，元阳之气旺盛，可帮助君药，消除体内的一切阴晦之气，一切寒痰死血、内凝瘀毒，故西洋参、黄芪、灵芝三药臣药，缺一不可。杏仁，味苦，微温，有小毒，宣肃肺气，以降为主；桔梗，味苦、辛，性平，舟楫之药，宣肃肺气，以升为主；肺主气，杏仁、桔梗，一降一升，调整人体的升降气机，万事万物非升降无以生、长、壮、老、已，非出入无以生、长、化、收、藏；杏仁、桔梗调畅气机，气行则血行，气行则津液行，故可本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于诱导胆管癌细胞凋亡的复方抑瘤饮，其特征在于，由下列重量份的原料组成：附子2‑40g、白花蛇舌草3‑60g、西洋参1‑20g、黄芪2‑40g、灵芝1‑20g、苦杏仁1‑20g、桔梗1‑20g、光果甘草2‑20g。

【技术特征摘要】
1.用于诱导胆管癌细胞凋亡的复方抑瘤饮，其特征在于，由下列重量份的原料组成：附子2-40g、白花蛇舌草3-60g、西洋参1-20g、黄芪2-40g、灵芝1-20g、苦杏仁1-20g、桔梗1-20g、光果甘草2-20g。2.根据权利要求1所述的复方抑瘤饮，其特征在于，由下列重量份的原料药组成：附子2-20g、白花蛇舌草3-40g、西洋参1-10g、黄芪2-20g、灵芝1-10g、苦杏仁1-10g、桔梗1-10g、光果甘草2-10g。3.根据权利要求1或2...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱呈瞻，朱世高，董冰子，杨振杰，吕静，
申请(专利权)人：青岛大学附属医院，
类型：发明
国别省市：山东,37