一种提高白腐真菌产酶酶活的发酵培养基及其应用制造技术

技术编号:19875112 阅读:19 留言:0更新日期:2018-12-22 16:47
本发明专利技术涉及微生物技术领域,公开了一种提高白腐真菌产酶酶活的发酵培养基及其应用。本发明专利技术所述发酵培养基包括葡萄糖、苎麻秸秆、(NH4)2SO4、尿素、蛋白胨、KH2PO4、CaCl2、MgSO4、FeSO4、MnSO4、ZnSO4、CoCl2、Tween和水。本发明专利技术相较于常规发酵培养基使用苎麻、蛋白胨、吐温以及尿素作为新的组分,和其他无机盐联合组成适合于白腐真菌发酵产酶的培养基,能够明显提高白腐真菌所产纤维素酶、半纤维素酶以及木质素降解酶的酶活。

【技术实现步骤摘要】
一种提高白腐真菌产酶酶活的发酵培养基及其应用
本专利技术涉及微生物
,具体涉及一种提高白腐真菌产酶酶活的发酵培养基及其应用。
技术介绍
2017年,我国农业生产中各类秸秆年产量约为10亿吨,这些农业废弃物中蕴含着丰富的可再生资源。充分利用这些秸秆生产饲料、肥料以及生物能源(乙醇、沼气等)是目前秸秆木质纤维素定向生物转化利用的研究热点。木质纤维素主要成分为纤维素、半纤维素和木质素。制约秸秆高值化综合利用的主要瓶颈是木质纤维素的有效降解。到目前为止,木质素降解方法主要包括物理法、化学法、物理化学法以及生物降解法。其中,生物降解作为绿色环保的木质素处理方法而成为研究热点。生物降解主要有微生物降解法和酶降解法。但是微生物降解方法存在时间长(一般需要21-60天)以及生长条件要求苛刻(无菌,排除外界杂菌的干扰)的问题,因此限制了其在实际生产中的商业化应用。因此,研究人员将重点转移到酶降解上。因此,提高微生物纤维素、半纤维素和木质素降解酶活性成为研究重点。白腐真菌在微生物中常被用来发酵生产纤维素酶、半纤维素酶和木质素降解酶,但是目前的发酵培养基并不适合白腐真菌,例如专利CN104419692A中公开的一种发酵培养基,用于白腐真菌发酵产酶,会出现酶活较低的问题,由此需要对现有发酵培养基进行调整,以便适合白腐真菌的发酵产酶。
技术实现思路
有鉴于此,本专利技术的目的在于提供一种提高白腐真菌产酶酶活的发酵培养基,使得所述培养基能够同时提高白腐真菌生产的纤维素酶、半纤维素酶和木质素降解酶的酶活;本专利技术的另外一个目的在于提供上述发酵培养基在白腐真菌发酵产酶中的相关应用。为了实现上述目的,本专利技术提供如下技术方案:一种提高白腐真菌产酶酶活的发酵培养基,所述发酵培养基包括葡萄糖、苎麻秸秆、(NH4)2SO4、尿素、蛋白胨、KH2PO4、CaCl2、MgSO4、FeSO4、MnSO4、ZnSO4、CoCl2、Tween和水。针对目前缺少适合白腐真菌发酵产酶的培养基,本专利技术通过优化调整培养基组分,使其能够促进白腐真菌产酶并提高酶活。其中作为优选,所述发酵培养基为:葡萄糖0.5-2g/L、苎麻秸秆15-60g/L、(NH4)2SO41.1-4.4g/L、尿素0.25-1g/L、蛋白胨0.5-2g/L、KH2PO41-4g/L、CaCl20.15-0.6g/L、MgSO40.04-0.16g/L、FeSO40.0025-0.01g/L、MnSO40.0008-0.0032g/L、ZnSO40.0007-0.0028g/L、CoCl20.00185-0.0074g/L、Tween1-4滴/L,余量水。在本专利技术具体实施方式中,所述发酵培养基为如下之一:(1)葡萄糖0.5g/L、苎麻秸秆60g/L、(NH4)2SO41.1g/L、尿素1g/L、蛋白胨0.5g/L、KH2PO44g/L、CaCl20.15g/L、MgSO40.16g/L、FeSO40.0025g/L、MnSO40.0032g/L、ZnSO40.0007g/L、CoCl20.0074g/L、Tween1滴/L,余量水;(2)葡萄糖1g/L、苎麻秸秆30g/L、(NH4)2SO42.2g/L、尿素0.5g/L、蛋白胨1g/L、KH2PO42g/L、CaCl20.3g/L、MgSO40.08g/L、FeSO40.005g/L、MnSO40.0016g/L、ZnSO40.0014g/L、CoCl20.0037g/L、Tween2滴/L,余量水;(3)葡萄糖2g/L、苎麻秸秆15g/L、(NH4)2SO44.4g/L、尿素0.25g/L、蛋白胨2g/L、KH2PO41g/L、CaCl20.6g/L、MgSO40.04g/L、FeSO40.01g/L、MnSO40.0008g/L、ZnSO40.0028g/L、CoCl20.00185g/L、Tween4滴/L,余量水;(4)葡萄糖1.5g/L、苎麻秸秆45g/L、(NH4)2SO43g/L、尿素0.5g/L、蛋白胨1.5g/L、KH2PO43g/L、CaCl20.2g/L、MgSO40.1g/L、FeSO40.006g/L、MnSO40.0025g/L、ZnSO40.001g/L、CoCl20.0025g/L、Tween3滴/L,余量水。采用本专利技术发酵培养基和现有专利CN104419692A中公开的发酵培养基在相同发酵环境下进行发酵产酶,结果显示,所获得的各酶酶活明显要高于现有专利中的常规发酵培养基。基于此优异的技术效果,本专利技术提供出了所述发酵培养基在白腐真菌发酵产酶中或在制备白腐真菌发酵产酶培养基中的应用。作为优选,所述白腐真菌为杏鲍菇、平菇、黄孢原毛平革菌以及白囊耙齿菌中的一种或两种以上。杏鲍菇、平菇、黄孢原毛平革菌、白囊耙齿菌均可通过CICC或中国普通微生物菌种保藏管理中心处获得。根据上述应用,本专利技术还对应提供了一种白腐真菌发酵产酶的方法,将白腐真菌接种到本专利技术所述发酵培养基中进行发酵。其中,发酵处于黑暗环境中,所述发酵的温度为25-30℃。在具体实施过程中温度可以选择为25℃、26℃、27℃、28℃、29℃或30℃,也可在25-30℃范围内波动。由以上技术方案可知,本专利技术相较于常规发酵培养基使用苎麻、蛋白胨、吐温以及尿素作为新的组分,和其他无机盐联合组成适合于白腐真菌发酵产酶的培养基,能够明显提高白腐真菌所产纤维素酶、半纤维素酶以及木质素降解酶的酶活。具体实施方式本专利技术公开了一种提高白腐真菌产酶酶活的发酵培养基及其应用,本领域技术人员可以借鉴本文内容,适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是,所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的,它们都被视为包括在本专利技术。本专利技术所述发酵培养基及其应用已经通过较佳实施例进行了描述,相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的发酵培养基及其应用进行改动或适当变更与组合,来实现和应用本专利技术技术。在白腐真菌接种发酵培养基之前,一般会先接种至种子培养基活化,制成种子液接种,例如可以采用PDA培养基加葡萄糖作为种子培养基,如下:配置PDA培养基(取去皮马铃薯200g,切成小块,加1000mL水煮沸20min。滤去马铃薯块,并将滤液补足至1000mL。添加葡萄糖20g,溶化后分装,115℃,灭菌30min),接种白腐真菌斜面菌种(20-30mm2每块,接种2-3块,150-170r/min,25-30℃摇床上培养1-2天。本专利技术还提供了一种种子培养基,即葡萄糖0.5-2g/L、玉米粉15-60g/L、(NH4)2SO41.1-4.4g/L、尿素0.25-1g/L、蛋白胨0.5-2g/L、KH2PO41-4g/L、CaCl20.15-0.6g/L、MgSO40.04-0.16g/L、FeSO40.0025-0.01g/L、MnSO40.0008-0.0032g/L、ZnSO40.0007-0.0028g/L、CoCl20.00185-0.0074g/L、Tween1-4滴/L,余量水;然后接种白腐真菌斜面菌种(20-30mm2每块,接种2-3块,150-170r/min,25-30℃摇床上培养1-2天。将所制备的种子液以10-20%的接种量接种至发酵培养基发酵产酶。在本专利技术各项本文档来自技高网
...

【技术保护点】
1.一种提高白腐真菌产酶酶活的发酵培养基,其特征在于,所述发酵培养基包括葡萄糖、苎麻秸秆、(NH4)2SO4、尿素、蛋白胨、KH2PO4、CaCl2、MgSO4、FeSO4、MnSO4、ZnSO4、CoCl2、Tween和水。

【技术特征摘要】
1.一种提高白腐真菌产酶酶活的发酵培养基,其特征在于,所述发酵培养基包括葡萄糖、苎麻秸秆、(NH4)2SO4、尿素、蛋白胨、KH2PO4、CaCl2、MgSO4、FeSO4、MnSO4、ZnSO4、CoCl2、Tween和水。2.根据权利要求1所述发酵培养基,其特征在于,所述发酵培养基为:葡萄糖0.5-2g/L、苎麻秸秆15-60g/L、(NH4)2SO41.1-4.4g/L、尿素0.25-1g/L、蛋白胨0.5-2g/L、KH2PO41-4g/L、CaCl20.15-0.6g/L、MgSO40.04-0.16g/L、FeSO40.0025-0.01g/L、MnSO40.0008-0.0032g/L、ZnSO40.0007-0.0028g/L、CoCl20.00185-0.0074g/L、Tween1-4滴/L,余量水。3.根据权利要求2所述发酵培养基,其特征在于,所述发酵培养基为如下之一:(1)葡萄糖0.5g/L、苎麻秸秆60g/L、(NH4)2SO41.1g/L、尿素1g/L、蛋白胨0.5g/L、KH2PO44g/L、CaCl20.15g/L、MgSO40.16g/L、FeSO40.0025g/L、MnSO40.0032g/L、ZnSO40.0007g/L、CoCl20.0074g/L、Tween1滴/L,余量水;(2)葡萄糖1g/L、苎麻秸秆30g/L、(NH4)2SO42.2g/L、尿素0.5g/L、蛋白胨1g/L、KH2PO...

【专利技术属性】
技术研发人员:彭源德谢纯良朱作华龚文兵周映君严理胡镇修
申请(专利权)人:中国农业科学院麻类研究所
类型:发明
国别省市:湖南,43

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1