一种基于TWS119的NK细胞培养方法技术

本发明专利技术提供了一种基于TWS119的NK细胞培养方法，包括：取静脉血，制备混合补体；对所述混合补体进行分离，得到所述混合补体中的单个核细胞；取单个核细胞与TWS119进行共培养，得到共培养液；对所述共培养液进行细胞重悬，并加入TWS119进行二次培养，即得到NK细胞。本发明专利技术在培养过程中，加入了TWS119进行诱导，提高了NK细胞的增殖率和纯度。

【技术实现步骤摘要】
一种基于TWS119的NK细胞培养方法
本专利技术属于细胞培养
，具体而言，涉及一种基于TWS119的NK细胞培养方法。
技术介绍
自然杀伤细胞(naturalkillercell,NK)是机体重要的免疫细胞，主要分布于外周血中，占PBMC的5％-10％，淋巴结和骨髓中也有NK活性，但水平较外周血低。NK细胞是一群异质性、多功能的免疫细胞，是人类的众多免疫细胞中的一种，表现为自然细胞毒活性的杀伤细胞。主要作用消灭攻击人类身体的病毒、细菌、癌细胞等。发挥作用的方式分为：直接杀伤、释放穿孔素、NK细胞毒因子和TNF等。每个人的身体里至少有50亿个NK细胞，多则达到1000亿个。但NK细胞的数量和其活动力不是成正比的。即使NK细胞显示有足够的数量，但是不激活他们，他们的工作效率也是非常低的。目前，国内外已经有大量的研究者进行了人NK细胞的培养和生物治疗方面的研究，但多数研究都是单纯利用IL-2和IL-12等白介素类细胞因子去培养，但是这样获得的结果往往有两个弊端，要么是数量上不去，达不到治疗性回输所需的量，要么是纯度上不去，达不到应有的效果。因为白介素类细胞因子都不是强烈的NK细胞活本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于TWS119的NK细胞培养方法，其特征在于，包括：取静脉血，制备混合补体；对所述混合补体进行分离，得到所述混合补体中的单个核细胞；取单个核细胞与TWS119进行共培养，得到共培养液；对所述共培养液进行细胞重悬，并加入TWS119进行二次培养，即得到NK细胞。

【技术特征摘要】
1.一种基于TWS119的NK细胞培养方法，其特征在于，包括：取静脉血，制备混合补体；对所述混合补体进行分离，得到所述混合补体中的单个核细胞；取单个核细胞与TWS119进行共培养，得到共培养液；对所述共培养液进行细胞重悬，并加入TWS119进行二次培养，即得到NK细胞。2.如权利要求1所述基于TWS119的NK细胞培养方法，其特征在于，所述“取静脉血，制备混合补体”，包括：采集肝素抗凝的静脉血；向两个50mL的离心管中加入15mL的淋巴细胞分离液，并贴壁缓慢加入30mL的所述静脉血，离心得离心液；对所述离心液取其上层血浆，即得到所述混合补体。3.如权利要求2所述基于TWS119的NK细胞培养方法，其特征在于，离心液的离心条件为，转速400-800g，离心20分钟。4.如权利要求2所述基于TWS119的NK细胞培养方法，其特征在于，所述“对所述离心液取其上层血浆，即得到所述混合补体”之后，还包括：对所述混合补体进行灭活；其中，灭活过程包括：取所述混合补体至于50mL离心管中；56℃加热25分钟，即充分灭活所述混合补体。5.如权利要求1所述基于TWS119的NK细胞培养方法，其特征在于，所述“对所述混合补体进行分离，得到所述混合补体中的单个核细胞”包括：提取出所述混合补体的单个核细胞层；用0.01M的PBS洗涤3次，即得到所述混合补体中的单个核细胞；其中，用0.01M的PBS洗涤3次包括：加入0.01M的PBS进行吹打洗涤，并在200g的转速条件下离心5分钟，重复3次。6.如权利要求1所述基于TWS119的NK细胞培养方法，其特征在于，所述“取单个核细胞与TWS119进行共...

【专利技术属性】
技术研发人员：甘鸿杰，高守泉，
申请(专利权)人：湖南未名三胞转化医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南,43