一种基于纳米金信号放大检测天蚕素B的方法技术

技术编号:19851490 阅读:43 留言:0更新日期:2018-12-22 10:04
本发明专利技术公开了一种基于纳米金信号放大检测天蚕素B的方法,包括以下步骤:1)将上玻片及下玻片浸泡,然后冲洗后吹干;2)将上玻片浸泡,再冲洗后吹干;同时将下玻片浸泡,然后冲洗后吹干;3)将天蚕素B抗体溶液滴加到下玻片表面,并温育,再冲洗后吹干;4)将待检测的纳米金复合的天蚕素B溶液滴加到下玻片上,再温育,然后冲洗后吹干;5)将上玻片放置于下玻片上,然后将液晶5CB从该开口处注入到所述凸型空腔内,使得液晶5CB注满整个凸型空腔,再冷却至室温,得液晶池,然后观察液晶池光学信号的颜色及亮度,以实现对天蚕素B的检测,该方法能够实现天蚕素B的检测,且检测成本低,检测灵敏度高,受客观环境影响较小,且检测速度快。

【技术实现步骤摘要】
一种基于纳米金信号放大检测天蚕素B的方法
本专利技术属于抗菌肽检测
,涉及一种基于纳米金信号放大检测天蚕素B的方法。
技术介绍
纳米金是一类粒径在1~100nm范围内的颗粒金,作为一种新型的材料,由于其合成过程简单、性能稳定、表面积大、与生物分子具有很好的亲和性等优点近年来被广泛应用与生物检测。FaulkWP等将纳米金溶液与兔抗沙门氏菌血清复合,用以检测沙门氏菌的表面抗原,开创了纳米金标记技术。Spielberg等研究以纳米金为标记物用于检测艾滋病病毒抗体的渗滤试验,确立了纳米金免疫渗滤试验的基本技术。GarciaG等利用纳米金作为电化学标记物用以检测免疫反应。天蚕素是最早被发现和研究的一种阳离子抗菌肽。天蚕素B对革兰氏阳性菌、部分革兰氏阴性菌均具有很强的杀伤力,而对真菌和真核细胞没有毒,而在动植物抗病基因工程、植物育种、生物饲料添加剂等领域有着巨大的潜在应用价值。然而,现有的检测手段,现有多肽检测方法有电位滴定法、高效液相色谱法、液晶生物传感器法等,电位滴定法滴定终点难以判定,且受客观环境影响大;高效液相色谱法的分析成本高,耗时长。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服上述现有本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于纳米金信号放大检测天蚕素B的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)将玻片切割为上玻片及下玻片,再将上玻片及下玻片用Piranha溶液于80℃‑100℃的温度下浸泡,然后冲洗后吹干;2)将上玻片浸入DMOAP水溶液中进行浸泡,再冲洗后吹干;同时将下玻片放置于50℃‑70℃的醋酸‑醋酸钠溶液中浸泡,然后冲洗后吹干,其中,醋酸‑醋酸钠溶液中TEA与DMOAP体积比为3:1;3)将天蚕素B抗体溶液滴加到下玻片表面,并放置在37℃‑50℃的温度下温育2.5‑4h,再冲洗后吹干;4)将待检测的纳米金复合的天蚕素B溶液滴加到下玻片上,再放置于37℃‑50℃的温度下温育1.5‑3h,然后冲洗后吹干;...

【技术特征摘要】
1.一种基于纳米金信号放大检测天蚕素B的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)将玻片切割为上玻片及下玻片,再将上玻片及下玻片用Piranha溶液于80℃-100℃的温度下浸泡,然后冲洗后吹干;2)将上玻片浸入DMOAP水溶液中进行浸泡,再冲洗后吹干;同时将下玻片放置于50℃-70℃的醋酸-醋酸钠溶液中浸泡,然后冲洗后吹干,其中,醋酸-醋酸钠溶液中TEA与DMOAP体积比为3:1;3)将天蚕素B抗体溶液滴加到下玻片表面,并放置在37℃-50℃的温度下温育2.5-4h,再冲洗后吹干;4)将待检测的纳米金复合的天蚕素B溶液滴加到下玻片上,再放置于37℃-50℃的温度下温育1.5-3h,然后冲洗后吹干;5)将上玻片放置于下玻片上,其中,上玻片与下玻片之间用Mylar聚酯片隔开,Mylar聚酯片的中部开设有凸型空腔,该凸型空腔的一侧开口,再将液晶5CB加热使液晶5CB呈各向同性的液态,然后将液晶5CB从该开口处注入到所述凸型空腔内,使得液晶5CB注满整个凸型空腔,再冷却至室温,得液晶池,然后利用偏光显微镜观察液晶池光学信号的颜色及亮度,以实现对天蚕素B的检测。2.根据权利要求1所述的基于纳米金信号放大检测天蚕素B的方法,其特征在于,步骤1)中分别通过乙醇及去离子水进行清洗,然后用N2吹...

【专利技术属性】
技术研发人员:苏秀霞徐佳张婧张海宁张姣霍文静胡金龙晏春苗
申请(专利权)人:陕西科技大学
类型:发明
国别省市:陕西,61

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