一种鉴别美洲大蠊的DNA条形码标准检测片段、试剂盒及其使用方法技术

本发明专利技术涉及物种鉴定领域，提供一种用于鉴别美洲大蠊的试剂盒，该试剂盒包括阳性对照、正反向引物、PCR反应混合液以及蒸馏水，阳性对照采用如SEQ ID NO.1的DNA条形码标准检测片段，正反向引物的序列如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示。本发明专利技术通过寻找到来源于美洲大蠊的28SrDNA片段(SEQ ID NO.1)，该片段在美洲大蠊物种的同源性在98～100％，而与非美洲大蠊的基因同源性显著降低，进而通过引物设计和PCR扩增可准确区分美洲大蠊与其他类似品种。本发明专利技术提供的试剂盒可用于鉴别粉末状或炮制品的美洲大蠊，检测范围更广，检测准确度更高，鉴别所需时间短。

【技术实现步骤摘要】
一种鉴别美洲大蠊的DNA条形码标准检测片段、试剂盒及其使用方法
本专利技术涉及物种鉴定
，具体涉及一种鉴别美洲大蠊的试剂盒及其使用方法。
技术介绍
美洲大蠊(PeriplanetaamericanaLinn.)是长期应用于民间的动物药药材，常以干燥或鲜成虫入药，主治儿童疳积、扁桃腺炎、身体包块、痈疮肿痛和蜈蚣叮咬等。近年来，研究表明美洲大蠊作为昆虫药物的临床应用记录显示，其具有抗肿瘤、治疗心血管疾病、促进组织修复、抗菌、抗病毒、抗氧化、增强免疫等药理作用，美洲大蠊药物制剂在临床上的应用也越来越广泛，而对美洲大蠊药材的真伪鉴定是入药及进行药理学研究的基础。目前在国际范围内对昆虫的种类鉴定主要是依据成虫的形态学特征，而在中国的药材市场上，美洲大蠊药材通常以粉末或炮制品等形式入药。由于传统的性状鉴别缺乏准确的内部解剖特征或者是在贮藏、加工炮制过程中形态被严重破坏，因此基于形态结构细微差别的归类描述稳定性差、可信度低，导致药用美洲大蠊的鉴定存在很大困难。同时，由于传统的性状鉴别无法准确、快速的鉴定药材市场贩售的美洲大蠊药材，导致有部分伪品(例如药效不及美洲大蠊的澳洲大蠊、德国小蠊、甚或本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于鉴别美洲大蠊的DNA条形码标准检测片段，所述标准检测片段的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。

【技术特征摘要】
1.一种用于鉴别美洲大蠊的DNA条形码标准检测片段，所述标准检测片段的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。2.一种用于鉴别美洲大蠊的引物对，其特征在于，所述引物对用于扩增权利要求1所述DNA条形码标准检测片段，所述引物对中，正向引物的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示，反向引物的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示。3.一种用于鉴别美洲大蠊的试剂盒，包括权利要求2所述的引物对、PCR反应混合液；所述PCR反应混合液包括：0.1UTaq聚合酶、500μmol/LdNTP、20mmol/L且pH＝8.3的Tris-HCl、100mmol/L氯化钾以及3μmol/L的氯化镁。4.根据权利要求3所述用于鉴别美洲大蠊的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括阳性对照，所述阳性对照为权利要求1所述DNA条形码标准检测片段或美洲大蠊成虫。5.根据权利要求3或4所述的用于鉴别美洲大蠊的试剂盒，其特征在于，所述引物对中正反向引物的浓度均为10μmol/L。6.一种利用权...

【专利技术属性】
技术研发人员：李玥，郝振平，徐溧，王朋川，陈壮志，莽朝永，许凯歌，彭芳，
申请(专利权)人：大理大学，
类型：发明
国别省市：云南,53