蜂王浆近红外定量校正模型的构建方法及蜂王浆的检测方法技术

本发明专利技术涉及红外检测领域，特别涉及蜂王浆近红外定量校正模型的构建方法及蜂王浆的检测方法。该方法具体为：选取已知10‑羟基癸烯酸含量蜂王浆，备用；采集蜂王浆近红外光谱数据；选取特征波段下的光谱信息与已知的所述蜂王浆的10‑羟基癸烯酸含量进行关联，采用偏最小二乘法、交叉‑验证法建立定量标准模型；对未知的蜂王浆样品进行近红外光谱扫描，并选取特征波段下的光谱信息，导入建立的定量校正模型中，得到未知蜂王浆样品的10‑羟基癸烯酸含量。利用近红外预测模型在用于蜂王浆中10‑羟基癸烯酸含量的检测，具有操作简单、分析速度快、预测结果准确性高等优点，本发明专利技术为蜂王浆品质的测定检验提供了实验基础，具有显著的应用价值和市场前景。

【技术实现步骤摘要】
蜂王浆近红外定量校正模型的构建方法及蜂王浆的检测方法
本专利技术涉及红外检测领域，特别涉及蜂王浆近红外定量校正模型的构建方法及蜂王浆的检测方法。
技术介绍
蜂王浆是集营养、食疗及保健多位一体的天然物质，具有抑菌、抗氧化、抗衰老、降血糖、降血脂、抗肿瘤、调节免疫及护肤美容等其他多方面生理作用。主要含有蛋白质、氨基酸、有机酸以及维生素等方面，还有少量植物甾醇、乙酰胆碱、磷酸腺苷等成分。蜂王浆中含有丰富的10-羟基癸烯酸(10-HDA)，这种成分其他物质所没有，故被称作王浆酸。10-HDA近年来称为研究的重点，已经成为蜂王浆的标志性成分。目前最常用于检测蜂王浆中10-HDA的方法为高效液相色谱法，这类方法具有实验周期长、操作繁琐、药品消耗大、污染环境等缺点。因此寻找一种新的可以快速、简便、安全环保、无损的检测方法是非常有必要的。近红外光谱(NearInfraredReflectanceSpectroscopy，NIR)是利用不同化学基团吸收特定的光谱从而形成特异的吸收峰来检测样品中各组分浓度或机构的技术。相较于传统的一些化学检测手段，近红外光谱具有很多优点，比如预测速度快，分析效率高；无损分析，无污染；分析精度好，重现性好；分析成本低等。现有技术未有采用近红外光谱技术快速测定蜂王浆中10-HDA含量的相关报道。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供一种蜂王浆近红外定量校正模型的构建方法及蜂王浆的检测方法。该近红外测定方法，用于快速测定蜂王浆中10-HDA含量。该方法操作简便，分析速度快，并且预测结果准确性较高。可为蜂王浆成分的快速检测评估及产品质量控制提供理论依据和分析手段。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：本专利技术提供了一种蜂王浆近红外定量校正模型的构建方法，取蜂王浆，以10-羟基癸烯酸作为关键质控指标，经高效液相色谱检测和近红外光谱检测，获得相应的高效液相色谱检测结果和近红外光谱结果，经偏最小二乘法、交叉-验证法获得蜂王浆近红外定量校正模型。在本专利技术的一些具体实施方案中，10-羟基癸烯酸采用高效液相色谱法测定，所述高效液相色谱的条件为：色谱柱为ACE-C18(250mm×4.6mm，5μm)；以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸(45:55:0.2)为流动相；检测波长为210～250nm；流速0.5～1.5ml/min；柱温20～40℃；优选检测波长为235nm；流速1ml/min；柱温30℃；理论板数按10-羟基癸烯酸峰计算应不低于2000。在本专利技术的一些具体实施方案中，所述高效液相色谱检测中10-羟基葵烯酸对照品溶液的制备方法为：取10-羟基癸烯酸对照品，加甲醇制成溶液，即得。优选的，取10-羟基癸烯酸对照品，加甲醇制成每1ml含10-羟基癸烯酸200μg的溶液，即得。在本专利技术的一些具体实施方案中，所述高效液相色谱检测中供试品溶液的制备方法为：取蜂王浆，加甲醇，摇匀，放置过夜，滤过，取续滤液，即得。在本专利技术的一些具体实施方案中，所述近红外光谱检测包括光谱采集、光谱预处理的步骤；所述光谱采集为：取蜂王浆，在25℃±5℃条件下，采用漫反射内置光源采集近红外光谱，以空气为参比背景，扫描次数为200～400，扫描光谱范围为1100～2300nm，扫描间隔为1～3nm。在本专利技术的一些具体实施方案中，所述光谱预处理为：将所述光谱采集的原始光谱，通过反射比到吸光度的格式转化，再进行一阶微分9点平滑法处理。在本专利技术的一些具体实施方案中，所述获得蜂王浆近红外定量校正模型具体为：用Unscrambler定量分析软件，采用偏最小二乘法、交叉-验证法，将预处理后光谱数据与样品HPLC含量数据关联，建立各指标的校正模型。在本专利技术的一些具体实施方案中，所述获得蜂王浆近红外定量校正模型还包括采用光谱影响值Leverage和化学值误差Residual等统计量检验，剔除NIR光谱与测定结果的异常值，确定最终NIR定量校正模型。在本专利技术的一些具体实施方案中，蜂王浆中10-HDA含量模型，内部验证直线方法为Y＝0.9870X+0.019，外部验证直线方程为Y＝0.9506X+0.072，其中X为化验值，Y为预测值，内部验证决定系数R2＝0.9935，外部验证决定系数R2＝0.9755，RMSEP＝0.0109。表明参与建模的10-HDA含量与其NIR光谱相关性较好，所建立的NIR检测模型性能良好。本专利技术还提供了一种蜂王浆的检测方法，按照本专利技术所述的构建方法获得蜂王浆近红外定量校正模型，将蜂王浆待测样品的近红外光谱数据导入所述蜂王浆近红外定量校正模型，获得所述待测样品中10-羟基癸烯酸的含量。本专利技术公开了一种蜂王浆中10-羟基癸烯酸含量的近红外快速测定方法。采用方法具体为：(1)选取已知10-羟基癸烯酸含量蜂王浆，备用；(2)采集蜂王浆近红外光谱数据；(3)选取特征波段下的光谱信息与已知的所述蜂王浆的10-羟基癸烯酸含量进行关联，采用偏最小二乘法、交叉-验证法建立定量标准模型；(4)按照步骤(2)的方法对未知的蜂王浆样品进行近红外光谱扫描，并选取特征波段下的光谱信息，导入建立的定量校正模型中，得到未知蜂王浆样品的10-羟基癸烯酸含量。本专利技术获得的近红外预测模型在用于蜂王浆中10-羟基癸烯酸含量的预测，具有操作简单、分析速度快、预测结果准确性高等优点，本专利技术为蜂王浆品质的测定检验提供了实验基础，具有显著的应用价值和市场前景。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。图1示实施例所述蜂王浆近红外原始吸收光谱图；图2示实施例所述蜂王浆近红外预处理光谱图；图3示实施例所述蜂王浆10-HDA含量建模结果图；图4示实施例所述蜂王浆10-HDA含量测定的对照品色谱图；图5示实施例所述蜂王浆10-HDA含量测定的样品色谱图。具体实施方式本专利技术公开了一种蜂王浆近红外定量校正模型的构建方法及蜂王浆的检测方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术。本专利技术的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。本专利技术提供了一种蜂王浆中10-羟基癸烯酸含量的近红外快速测定方法，采用如下步骤：(1)采集蜂王浆样品近红外光谱：取蜂王浆样品约8g，于15ml离心管中，将近红外探头深入液面以下，并保证蜂王浆完全包裹探头，以空气为参比，扣除背景后采集近红外光谱，得到样品近红外光谱图。(2)高效液相色谱法测定样品中10-羟基癸烯酸含量：取10-羟基癸烯酸对照品，加甲醇制成每1ml含10-羟基癸烯酸200μg的溶液，即得。取本品约0.1～1(优选0.15)g，精密称定，置25ml量瓶中，加甲醇约20ml，摇匀，放置过夜，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。所制备的样品，利用HPLC测定蜂王浆中10-羟基癸烯酸含量，得到样品中10-羟基癸烯酸含量的化学值。(3)在1100～2300nm扫描，扫描间隔为1.0～3.0nm，扫描平均次数为200～400次。每个样本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种蜂王浆近红外定量校正模型的构建方法，其特征在于，取蜂王浆，以10‑羟基癸烯酸作为关键质控指标，经高效液相色谱检测和近红外光谱检测，获得相应的高效液相色谱检测结果和近红外光谱结果，经偏最小二乘法、交叉‑验证法获得蜂王浆近红外定量校正模型。

【技术特征摘要】
1.一种蜂王浆近红外定量校正模型的构建方法，其特征在于，取蜂王浆，以10-羟基癸烯酸作为关键质控指标，经高效液相色谱检测和近红外光谱检测，获得相应的高效液相色谱检测结果和近红外光谱结果，经偏最小二乘法、交叉-验证法获得蜂王浆近红外定量校正模型。2.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，10-羟基癸烯酸采用高效液相色谱法测定，所述高效液相色谱的条件为：色谱柱为ACE-C18(250mm×4.6mm，5μm)；以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸(45:55:0.2)为流动相；检测波长为210～250nm；流速0.5～1.5ml/min；柱温20～40℃；理论板数按10-羟基癸烯酸峰计算应不低于2000。3.如权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测中10-羟基葵烯酸对照品溶液的制备方法为：取10-羟基癸烯酸对照品，加甲醇制成溶液，即得。4.如权利要求1至3任一项所述的构建方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测中10-羟基癸烯酸供试品溶液的制备方法为：取蜂王浆，加甲醇，摇匀，放置过夜，滤过，取续滤液，即得。5.如权利要求1至4任一项所述的构建方法，其特征在于，所述近红外光谱检测包括...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜文月，曲佳乐，魏晓雨，张新君，王美慧，边雨，徐杰，崔宪利，胡铭，
申请(专利权)人：吉林省现代中药工程研究中心有限公司，
类型：发明
国别省市：吉林,22