甘油磷脂酰胆碱的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种甘油磷脂酰胆碱的制备方法，其中，所述制备方法包括：1)将大豆卵磷脂与水混合，制得混合液M1；2)向混合液M1中加入磷脂酶A1、磷脂酶A2、氯化钙和氯化锌后置于温度为30‑45℃的条件下反应，制得混合液M2；3)将混合液M2离心后取上清液顺次经硅胶柱、离子交换树脂柱，得到混合液M3；4)将混合液M3置于温度为‑5～0℃的条件下放置40‑60h，得到晶体；5)将上述晶体蒸发浓缩，制得甘油磷脂酰胆碱。实现了制备方法简单，合成率高，且能在水性环境下进行操作的效果。

【技术实现步骤摘要】
甘油磷脂酰胆碱的制备方法
本专利技术涉及甘油磷脂酰胆碱的生产制备领域，具体地，涉及甘油磷脂酰胆碱的制备方法。
技术介绍
甘油磷脂酰胆碱是磷脂酰胆碱(PC)分子上的两个脂肪酰基完全被水解掉的产物，它具有显著的稳定脑部认知能力的作用，甚至可以修复早期老年失智症患者部分已受损的认知能力。不像那些抑制乙酰胆碱分解的药物，GPC是刺激机体产生新的磷脂酰胆碱。动物研究显示，GPC可以预防记忆力的丧失。在实验条件控制的对照组比较之后发现，被喂食GPC鼠龄较大的老鼠，其脑部专司记忆力及学习能力的海马区域中，神经连接的损失较少。科学家KiddPM根据一篇对于13个临床实验报告的回顾评论，归纳得出：在针对4,054个老年记忆力丧失，或中风或轻微中风，所引起的血管性失智的病患上，GPC可以持续改善脑部的记忆及注意力，即使在多种的实验测试环境，它仍能显著的改善病人的临床症状。此外，GPC通过对神经生长因子的作用，可以保护及增进神经间的传导。神经生长因子接受器会因老化而减少，而GPC可以促进其生长，修复，而且可以增加神经生长因子接受器在小脑皮质(CerebellarCortex，它是脑中控制动作协调的区域)中的表现。GPC通过不同的机制激发神经传导物质GABA(γ-aminobutyricacid，γ氨基丁酸)的释放，使脑细胞得到更多的GABA。而老年人脑部的GABA含量的下降，会造成认知能力受损，导致失智症，抑郁症，以及精神病等常见的脑部退化症状的发生，如阿兹海默症和亨丁顿舞蹈症。现有技术中制备甘油磷脂酰胆碱往往是采用化学合成等方式进行，使得制备路线工艺复杂，且中间体成本较高。因此，提供一种制备方法简单，合成率高，且能在水性环境下进行操作的甘油磷脂酰胆碱的制备方法是本专利技术亟需解决的问题。
技术实现思路
针对上述现有技术，本专利技术的目的在于提供一种制备方法简单，合成率高，且能在水性环境下进行操作的甘油磷脂酰胆碱的制备方法。为了实现上述目的，本专利技术提供了一种甘油磷脂酰胆碱的制备方法，其中，所述制备方法包括：1)将大豆卵磷脂与水混合，制得混合液M1；2)向混合液M1中加入磷脂酶A1、磷脂酶A2、氯化钙和氯化锌后置于温度为30-45℃的条件下反应，制得混合液M2；3)将混合液M2离心后取上清液顺次经硅胶柱、离子交换树脂柱，得到混合液M3；4)将混合液M3置于温度为-5～0℃的条件下放置40-60h，得到晶体；5)将上述晶体蒸发浓缩，制得甘油磷脂酰胆碱。优选地，步骤1)中，相对于10g的所述大豆卵磷脂，所述水的用量为20-50mL。优选地，步骤2)中，相对于1mL的所述混合液M1，所述磷脂酶A1的用量为15-20U，所述磷脂酶A2的用量为20-25U，所述氯化钙的用量为3-8mg，所述氯化锌的用量为1-3mg。优选地，步骤2)中，反应过程为置于搅拌条件下反应2-3h。优选地，步骤2)中，搅拌过程的搅拌速率为100-300r/min。优选地，步骤3)中还包括在经硅胶柱前先流经三氧化二铝柱。优选地，步骤5)中，蒸发浓缩过程为置于薄膜蒸发器中进行蒸发浓缩。通过上述技术方案，本专利技术以水作为溶剂，向大豆卵磷脂中加入磷脂酶A1、磷脂酶A2、氯化钙和氯化锌后在一定条件下进行反应，得到混合液，有效提高其产物的产率，而后将上述混合液离心后取上清液经硅胶柱和离子交换树脂柱进行洗脱，再进一步置于一定温度条件下放置后得到晶体，而后将上述晶体蒸发浓缩，从而进一步提高制得的甘油磷脂酰胆碱的纯度。本专利技术的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。具体实施方式以下对本专利技术的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本专利技术，并不用于限制本专利技术。在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。本专利技术提供了一种甘油磷脂酰胆碱的制备方法，其中，所述制备方法包括：1)将大豆卵磷脂与水混合，制得混合液M1；2)向混合液M1中加入磷脂酶A1、磷脂酶A2、氯化钙和氯化锌后置于温度为30-45℃的条件下反应，制得混合液M2；3)将混合液M2离心后取上清液顺次经硅胶柱、离子交换树脂柱，得到混合液M3；4)将混合液M3置于温度为-5～0℃的条件下放置40-60h，得到晶体；5)将上述晶体蒸发浓缩，制得甘油磷脂酰胆碱。本专利技术以水作为溶剂，向大豆卵磷脂中加入磷脂酶A1、磷脂酶A2、氯化钙和氯化锌后在一定条件下进行反应，得到混合液，有效提高其产物的产率，而后将上述混合液离心后取上清液经硅胶柱和离子交换树脂柱进行洗脱，再进一步置于一定温度条件下放置后得到晶体，而后将上述晶体蒸发浓缩，从而进一步提高制得的甘油磷脂酰胆碱的纯度。在本专利技术的一种优选的实施方式中，步骤1)中，相对于10g的所述大豆卵磷脂，所述水的用量为20-50mL。上述原料的用量可以在宽的范围内选择，例如，在本专利技术的一种更为优选的实施方式中，步骤2)中，相对于1mL的所述混合液M1，所述磷脂酶A1的用量为15-20U，所述磷脂酶A2的用量为20-25U，所述氯化钙的用量为3-8mg，所述氯化锌的用量为1-3mg。进一步优选的实施方式中，步骤2)中，反应过程为置于搅拌条件下反应2-3h。在本专利技术的另一优选的实施方式中，步骤2)中，搅拌过程的搅拌速率为100-300r/min。一种更为优选的实施方式中，步骤3)中还包括在经硅胶柱前先流经三氧化二铝柱。进一步优选的实施方式中，步骤5)中，蒸发浓缩过程为置于薄膜蒸发器中进行蒸发浓缩。以下将通过实施例对本专利技术进行详细描述。实施例11)将10g大豆卵磷脂与20mL水混合，制得混合液M1；2)向10mL混合液M1中加入150U磷脂酶A1、200U磷脂酶A2、30mg氯化钙和10mg氯化锌后置于温度为30℃的条件下以100r/min的搅拌速率搅拌反应2h，制得混合液M2；3)将混合液M2离心后取上清液顺次经三氧化二铝柱、硅胶柱、离子交换树脂柱，得到混合液M3；4)将混合液M3置于温度为-5℃的条件下放置40h，得到晶体；5)将上述晶体置于薄膜蒸发器中蒸发浓缩，制得甘油磷脂酰胆碱A1。(产率为72.6％，纯度为93.5％)实施例21)将10g大豆卵磷脂与50mL水混合，制得混合液M1；2)向10mL混合液M1中加入200U磷脂酶A1、250U磷脂酶A2、80mg氯化钙和30mg氯化锌后置于温度为45℃的条件下以300r/min的搅拌速率搅拌反应3h，制得混合液M2；3)将混合液M2离心后取上清液顺次经三氧化二铝柱、硅胶柱、离子交换树脂柱，得到混合液M3；4)将混合液M3置于温度为0℃的条件下放置60h，得到晶体；5)将上述晶体置于薄膜蒸发器中蒸发浓缩，制得甘油磷脂酰胆碱A2。(产率为71.5％，纯度为94.2％)实施例31)将10g大豆卵磷脂与30mL水混合，制得混合液M1；2)向10mL混合液M1中加入180U磷脂酶A1、220U磷脂酶A2、50mg氯化钙和20mg氯化锌后置于温度为40℃的条件下以200r/min的搅拌本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种甘油磷脂酰胆碱的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：1)将大豆卵磷脂与水混合，制得混合液M1；2)向混合液M1中加入磷脂酶A1、磷脂酶A2、氯化钙和氯化锌后置于温度为30‑45℃的条件下反应，制得混合液M2；3)将混合液M2离心后取上清液顺次经硅胶柱、离子交换树脂柱，得到混合液M3；4)将混合液M3置于温度为‑5～0℃的条件下放置40‑60h，得到晶体；5)将上述晶体蒸发浓缩，制得甘油磷脂酰胆碱。

【技术特征摘要】
1.一种甘油磷脂酰胆碱的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：1)将大豆卵磷脂与水混合，制得混合液M1；2)向混合液M1中加入磷脂酶A1、磷脂酶A2、氯化钙和氯化锌后置于温度为30-45℃的条件下反应，制得混合液M2；3)将混合液M2离心后取上清液顺次经硅胶柱、离子交换树脂柱，得到混合液M3；4)将混合液M3置于温度为-5～0℃的条件下放置40-60h，得到晶体；5)将上述晶体蒸发浓缩，制得甘油磷脂酰胆碱。2.根据权利要求1所述的制备方法，其中，步骤1)中，相对于10g的所述大豆卵磷脂，所述水的用量为20-50mL。3.根据权利要求1或2所述的制备方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄宁民，
申请(专利权)人：芜湖福民生物药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽,34