一种快速分离植物叶片角质层的方法技术

一种快速分离植物叶片角质层的方法，本发明专利技术属于生物技术领域，具体涉及一种分离植物叶片角质层领域。本发明专利技术的快速分离植物叶片角质层的方法按以下步骤进行：一、表皮的撕取；二、角质层内表面的定位；三、叶肉细胞的去除：首先配制酶解液，将步骤二中得到的定位表皮结构加入到上述酶解液中进行酶解反应，并且保证所述的定位表皮结构的内表面向上放置，酶解温度为23℃‑27℃，酶解时间为2h‑4h；四、角质层内表面的清洗得到清洗样品；五、样品的干燥：将步骤四得到的样品进行干燥，得到分离的角质层结构。通过本发明专利技术的方法分离植物叶片角质层具有操作快速、简便、酶解效率高并且分离效果好的优势。

【技术实现步骤摘要】
一种快速分离植物叶片角质层的方法
本专利技术属于生物
，具体涉及一种分离植物叶片角质层领域。
技术介绍
植物角质层(角质膜)覆盖在高等植物的茎、叶、花和果实上，主要由角质和蜡质组成。角质层具有耐酸碱、耐氧化、不易透水和透气的特性，因而作为植物体与外界环境的第一道保护屏障，可抵抗外界环境因子，如机械损伤、紫外线和干旱等胁迫，也可避免外界微生物侵染。角质层可以调节植物体表温度、调节水的渗透性，从而对植物体自身的各种生理活动起调节作用。研究人员发现角质层不仅在植物保护发育中有着重要作用，叶角质层内表面的凸缘特征在属和属下分类上与用生殖器官所依据的性状分类结果大体一致，在分类学上也具有重要意义。另外，角质层运输特征的研究在生态学、环境和农用化学等方面都具有非常重要的意义，完好地分离角质层是进行这方面研究的前提。根据已有的报道，通过物理撕取的方法，分离出的角质层内表面结构模糊，表皮细胞大量粘附。因而经典的分离和观察角质层内表面的方法一般都是化学的方法，主要有：(1)用加热的果酸和果酸铵混合溶液浸泡植物组织，腐烂后分离角质层；(2)切碎后用20％三氧化铬(CrO3)水溶液浸泡4-8小时，用本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种快速分离植物叶片角质层的方法，其特征在于：该方法按以下步骤进行：一、表皮的撕取：选取新鲜嫩绿的植物叶子，用镊子撕取叶子的表皮；二、角质层内表面的定位：将步骤一撕取的表皮的上下表面利用尼龙膜覆盖，将表皮的内表面向上放置，得到定位表皮结构；三、叶肉细胞的去除：首先配制酶解液，按重量分数分别称取0.5％‑3％的纤维素酶、0.005％‑0.015％的聚乙烯吡咯烷酮、0.5％‑3％的牛血清白蛋白和50％‑60％的渗透缓冲液倒入培养皿中，混合得到酶解液，所述的酶解液pH为5‑6；将步骤二中得到的定位表皮结构加入到上述酶解液中进行酶解反应，并且保证所述的定位表皮结构的内表面向上放置，酶解温度为23℃...

【技术特征摘要】
1.一种快速分离植物叶片角质层的方法，其特征在于：该方法按以下步骤进行：一、表皮的撕取：选取新鲜嫩绿的植物叶子，用镊子撕取叶子的表皮；二、角质层内表面的定位：将步骤一撕取的表皮的上下表面利用尼龙膜覆盖，将表皮的内表面向上放置，得到定位表皮结构；三、叶肉细胞的去除：首先配制酶解液，按重量分数分别称取0.5％-3％的纤维素酶、0.005％-0.015％的聚乙烯吡咯烷酮、0.5％-3％的牛血清白蛋白和50％-60％的渗透缓冲液倒入培养皿中，混合得到酶解液，所述的酶解液pH为5-6；将步骤二中得到的定位表皮结构加入到上述酶解液中进行酶解反应，并且保证所述的定位表皮结构的内表面向上放置，酶解温度为23℃-27℃，酶解时间为2h-4h；四、角质层内表面的清洗：用镊子夹住步骤三得到酶解后的定位表皮结构的尼龙膜，然后利用渗透缓冲液清洗数次，直至清洗溶液变成无色，得到清洗样品；五、样品的干燥：将步骤四得到的样品进行干燥，得到分离的角质层结构。2.根据权利要求1所述的一种快速分离植物叶片角质层的方法，其特征在于：所述的渗透缓冲液按摩尔浓度由0.1M/L-1M/L的CaCl2、0.1M/L-1M/L的MgCl2、1M/L-10M/L的2-(N-吗啉)乙磺酸一水合物和按质量分数的山梨糖醇9％-10％组成，所述渗透缓冲液的pH为5-6。3.根据权利要求1或2所述的一种...

【专利技术属性】
技术研发人员：林金星，何丽娜，吴鸿洋，
申请(专利权)人：北京林业大学，
类型：发明
国别省市：北京,11