一种生产虫草菌粉的固体培养基及生产虫草菌粉的方法技术

本发明专利技术提供了一种生产虫草菌粉的固体培养基及生产虫草菌粉的方法，属于虫草菌粉生产技术领域，所述生产虫草菌粉的方法包括以下步骤：将虫草菌初始接种体接种至液体培养基中进行基础培养，获得基础培养液；取基础培养液转接至另一液体培养基中进行二次基础培养，获得发酵种子液；取发酵种子液接种至固体培养基中进行扩大培养，收集获得虫草菌粉；所述虫草菌为中国被毛孢菌。本发明专利技术利用玉米粉作为培养基主要原料的生产虫草菌粉的方法，易于大规模工业化生产，可快速、高效、绿色安全的生产虫草菌粉，并且，利用本发明专利技术中的方法生产得到的虫草菌粉对于治疗支气管炎、肾肺两虚引起的咳嗽具有良好的效果。

【技术实现步骤摘要】
一种生产虫草菌粉的固体培养基及生产虫草菌粉的方法
本专利技术涉及虫草菌粉生产
，尤其涉及一种生产虫草菌粉的固体培养基及生产虫草菌粉的方法。
技术介绍
冬虫夏草为麦角菌科真菌冬虫夏草菌，又名虫草菌，是寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座和幼虫尸体的干燥复合体。冬虫夏草主要分布在我国西藏、青海、四川、云南和甘肃各省区、以及印度、尼白尔、不丹等海拔3000米以上、雪线以下的地区。冬虫夏草中含有多种活性成分，其药用价值已引起广泛关注，但冬虫夏草的人工培育难度极大，野生资源稀缺。天然冬虫夏草产量有限且价格昂贵，生长缓慢，培养条件苛刻，故难以大规模人工培养应用。人工冬虫夏草菌丝体具有与天然冬虫夏草相近的药效物质和药理活性，受到人们的广泛关注。为了利用冬虫夏草的药用价值，对冬虫夏草真菌进行人工扩繁，是当前冬虫夏草开发的重要途径之一。现有技术中公开的虫草菌发酵方法存在技术方案单一、原料利用率低、以及产品品质不稳定的缺陷，为了克服上述缺陷，目前急需一种新的虫草菌粉的发酵方法以满足大规模生产的要求。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种生产虫草菌粉的固体培养基及生产虫草菌粉的方法，利用玉米粉作为培养基主要原料的生产虫草菌粉的方法，易于大规模工业化生产，可快速、高效、绿色安全的进行生产虫草菌粉。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：本专利技术提供了一种生产虫草菌粉的固体培养基，包括以下重量份的组分：葡萄糖8～12份、蛋白胨2～3份、酵母粉0.5～1份、磷酸二氢钾0.2～0.3份、硫酸镁0.2～0.3份、玉米颗粒480～490份和水490～510份。优选的，所述玉米颗粒的颗粒直径为0.5～3mm。优选的，所述固体培养基中还包括琼脂，所述琼脂为0.8～1.2份。本专利技术提供了上述生产虫草菌粉的固体培养基的制备方法，包括以下步骤：将葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、磷酸二氢钾、硫酸镁、玉米颗粒和水混合后，进行两次灭菌，获得固体培养基。本专利技术提供了上述生产虫草菌粉的固体培养基的制备方法，包括以下步骤：I)将葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、磷酸二氢钾、硫酸镁和水混合溶解，获得混合溶液；Ⅱ)将所述混合溶液与玉米颗粒、琼脂混合后灭菌，获得固体培养基。本专利技术提供了利用权利要求1～4任意一项所述的固体培养基生产虫草菌粉的方法，包括以下步骤：1)将虫草菌初始接种体接种至液体培养基中进行20～32d的基础培养，获得基础培养液；2)取步骤1)中的基础培养液转接至另一液体培养基中进行20～32d的二次基础培养，获得发酵种子液；3)取步骤2)中的发酵种子液接种至固体培养基中进行55～65d的扩大培养，收集获得虫草菌粉；所述基础培养、二次基础培养和扩大培养的培养温度独立为15～18℃；所述虫草菌为中国被毛孢菌。优选的，所述步骤2)中发酵种子液中的虫草菌的菌丝体直径为1.5～2mm。优选的，所述步骤2)中发酵种子液与固体培养基的接种比例为(100～200)mL：(400～600)g。本专利技术提供了一种虫草微粉的制备方法，包括以下步骤：a)将上述方案中获得的虫草菌粉烘干，获得烘干菌粉；b)将步骤a)中的烘干菌粉进行细胞破碎，获得虫草菌粉微粉。本专利技术提供了上述方案制备得到的虫草菌粉或者制备得到的虫草微粉在制备治疗支气管炎、肾肺两虚引起的咳嗽的药物中的应用。本专利技术的有益效果：1.本专利技术利用玉米粉作为培养基主要原料生产虫草菌粉，易于大规模工业化生产，可快速、高效、绿色安全的进行生产虫草菌粉；2.利用本专利技术中方法生产得到的虫草菌粉对于治疗支气管炎、肾肺两虚引起的咳嗽具有良好的效果。具体实施方式本专利技术提供了一种生产虫草菌粉的固体培养基，包括以下重量份的组分：葡萄糖8～12份、蛋白胨2～3份、酵母粉0.5～1份、磷酸二氢钾0.2～0.3份、硫酸镁0.2～0.3份、玉米颗粒480～490份和水490～510份，优选的包括以下重量份的组分：葡萄糖10份、蛋白胨2.5份、酵母粉0.75份、磷酸二氢钾0.25份、硫酸镁0.25份、玉米颗粒485份和水500份。在本专利技术中，所述固体培养基中还包括琼脂，所述琼脂为0.8～1.2份，优选为1份。在本专利技术中，所述玉米颗粒的颗粒直径为0.5～3mm，优选为1～2.5mm，更优选为1.5～2mm。在本专利技术的实施过程中，所述玉米颗粒为购自于云南省陆良县三岔河镇青源粮食加工厂的3号玉米颗粒。在本专利技术中，所述蛋白胨、酵母粉、磷酸二氢钾、硫酸镁来源于市售，其中蛋白胨是将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后干燥而成的外观呈淡黄色的粉剂，能为微生物提供C源、N源、生长因子等营养物质；酵母膏又称酵母浸膏，富含完全蛋白质，均衡的必需氨基酸以及B族维生素、核苷酸、微量元素等，可以大大提高菌种的生产速率及发酵产品得率；磷酸二氢钾可以调节培养基的pH值，并可以作为菌种的培养剂和强化剂；硫酸镁中的镁元素是许多酶的活化剂，能促进菌种的生长繁殖、核酸的合成及磷酸盐的转化等。在本专利技术中，所述水优选为纯净饮用水，来源于市售。水作为良好的溶剂可以帮助原料溶解混合，此外经过高温处理可以实现玉米颗粒的熟化。本专利技术提供了上述方案中生产虫草菌粉的固体培养基(包括琼脂粉)的制备方法，在本专利技术中，将葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、磷酸二氢钾、硫酸镁和水混合溶解，获得混合溶液；所述溶解的温度优选为80～100℃，更优选为100℃；所述溶解的时间为优选为2～5min，更优选为3min。本专利技术中，将所述混合溶液与玉米颗粒、琼脂混合后灭菌；所述混合溶液与玉米颗粒、琼脂粉的混合容器优选为90mm平皿；所述灭菌的方式优选为高温湿热灭菌；所述灭菌的时间优选为15～25min，更优选为20min；所述灭菌的温度优选为110～130℃，优选为121℃。在本专利技术中，经过灭菌处理的培养基，冷却后得到固体培养基。本专利技术对冷却的温度没有限制。在本专利技术中，在无菌条件下将获得的固体培养基取出部分或整体倒放至新的无菌培养皿中，获得待接种固体培养基。本专利技术提供了另一种上述方案中生产虫草菌粉的固体培养基(不包括琼脂粉)的制备方法，在本专利技术中，将葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、磷酸二氢钾、硫酸镁、玉米颗粒和水混合后，进行两次高温湿热灭菌；所述灭菌的时间优选为15～25min，更优选为20min；所述灭菌的温度优选为110～130℃，优选为121℃；所述两次灭菌的间隔时间优选为22～26h，更优选为24h。在本专利技术中，经过灭菌处理的培养基，冷却后得到固体培养基。本专利技术对冷却的温度没有限制。本专利技术提供了一种生产虫草菌粉的方法，在本专利技术中，所述虫草菌为中国被毛孢菌。在本专利技术中，将虫草菌用接种钩取1*1cm琼脂块菌种，5块接种斜面培养基，进行纯化培养，获得虫草菌初始接种体；所述虫草菌为中国被毛孢菌；所述斜面培养基优选为改良固体PDA培养基，包括以下重量份的组份：马铃薯18～22份、葡萄糖1～3份、蛋白胨0.5～1.5份、酵母粉0.3～1份、KH2PO40.03～1份、MgSO40.03～1份琼脂0.5～1.5份，更优选为马铃薯20份、葡萄糖2份、蛋白胨1份、酵母粉0.5份、KH2PO40.05份、MgSO40.05份、琼脂1份；所述纯化培养的温度优选为15～18°，更优选为18°；所述纯化培养的时间优选为15～18°，更优选为18°。在本专利技术中，将虫草菌初始本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种生产虫草菌粉的固体培养基，包括以下重量份的组分：葡萄糖8～12份、蛋白胨2～3份、酵母粉0.5～1份、磷酸二氢钾0.2～0.3份、硫酸镁0.2～0.3份、玉米颗粒480～490份和水490～510份。

【技术特征摘要】
1.一种生产虫草菌粉的固体培养基，包括以下重量份的组分：葡萄糖8～12份、蛋白胨2～3份、酵母粉0.5～1份、磷酸二氢钾0.2～0.3份、硫酸镁0.2～0.3份、玉米颗粒480～490份和水490～510份。2.根据权利要求1所述的固体培养基，其特征在于，所述玉米颗粒的直径为0.5～3mm。3.根据权利要求1所述的固体培养基，其特征在于，所述固体培养基中还包括琼脂，所述琼脂为0.8～1.2份。4.权利要求1所述固体培养基的制备方法，包括以下步骤：将葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、磷酸二氢钾、硫酸镁、玉米颗粒和水混合后，进行两次高温湿热灭菌，获得固体培养基。5.权利要求3所述固体培养基的制备方法，包括以下步骤：I)将葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、磷酸二氢钾、硫酸镁和水混合溶解，获得混合溶液；Ⅱ)将所述混合溶液与玉米颗粒、琼脂混合后灭菌，获得固体培养基。6.利用权利要求1～3任意一项所述的固体培养基生产虫草菌粉的方法，包括以下步骤：1)将虫草菌初始接种体接种至液体培养基中进行20～32d的基础培养，获得基础培...

【专利技术属性】
技术研发人员：沙涛，张亚平，
申请(专利权)人：云南大学，
类型：发明
国别省市：云南,53