【技术实现步骤摘要】
一种大肠杆菌H血清型分型检测试剂盒及检测方法
本专利技术涉及一种对大肠杆菌53个H血清型进行检测分型的试剂盒及检测方法，属于生物检测
技术介绍
大肠杆菌的O抗原分型和H抗原分型是致病性大肠杆菌流行病学研究中最为常用的分型策略。其中H抗原有鞭毛蛋白构成，可以分为DO、D1、D2和D3，4个主要的区域：D0和D1区分别形成鞭毛的内管和外管，D2和D3区分布于鞭毛菌丝表面。D0和D1的蛋白高度保守，而D2和D3的蛋白是高变的，从而导致H抗原的多样性。所以应用H抗原的特异性抗血清，可以与对应H抗原的菌株发生凝集反应，从而实现对H血清型的分型鉴定。应用这种方法，目前国际上已发现53种大肠杆菌的H血清型，编号为H1～H56(H13，H22和H50除外)。虽然利用抗血清对大肠杆菌H抗原进行检测分型最为常用，但在现实的工作应用中还是存在一些问题。例如，为了获得良好的分型结果，目标菌株需要多次传代，然后多次凝集，最后获取单一的H血清分型，过程耗时耗力；凝集结果判断依赖操作人员经验，客观性不强；在现场工作中，部分菌株存在交叉凝集和不凝集现象，影响结果判断；另外，完整的H分型...
【技术保护点】
1.一种大肠杆菌H血清型分型检测试剂盒，其特征在于，包括扩增大肠杆菌H血清型H1～H12、H14～H21、H23～H49、H51～H56的PCR引物，所述扩增大肠杆菌H4血清型的PCR引物由引物H4‑PF和H4‑PR组成，引物H4‑PF的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，引物H4‑PR的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述扩增大肠杆菌H25血清型的PCR引物由引物H25‑PF和H25‑PR组成，引物H25‑PF的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，引物H25‑PR的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；所述扩增大肠杆菌H9血清型的PCR引物由引物H9‑P...
【技术特征摘要】
1.一种大肠杆菌H血清型分型检测试剂盒，其特征在于，包括扩增大肠杆菌H血清型H1～H12、H14～H21、H23～H49、H51～H56的PCR引物，所述扩增大肠杆菌H4血清型的PCR引物由引物H4-PF和H4-PR组成，引物H4-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示，引物H4-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示；所述扩增大肠杆菌H25血清型的PCR引物由引物H25-PF和H25-PR组成，引物H25-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示，引物H25-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示；所述扩增大肠杆菌H9血清型的PCR引物由引物H9-PF和H9-PR组成，引物H9-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.5所示，引物H9-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.6所示；所述扩增大肠杆菌H2血清型的PCR引物由引物H2-PF和H2-PR组成，引物H2-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.7所示，引物H2-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.8所示；所述扩增大肠杆菌H48血清型的PCR引物由引物H48-PF和H48-PR组成，引物H48-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.9所示，引物H48-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.10所示；所述扩增大肠杆菌H54血清型的PCR引物由引物H54-PF和H54-PR组成，引物H54-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.11所示，引物H54-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.12所示；所述扩增大肠杆菌H49血清型的PCR引物由引物H49-PF和H49-PR组成，引物H49-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.13所示，引物H49-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.14所示；所述扩增大肠杆菌H43血清型的PCR引物由引物H43-PF和H43-PR组成，引物H43-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.15所示，引物H43-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.16所示；所述扩增大肠杆菌H55血清型的PCR引物由引物H55-PF和H55-PR组成，引物H55-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.17所示，引物H55-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.18所示；所述扩增大肠杆菌H35血清型的PCR引物由引物H35-PF和H35-PR组成，引物H35-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.19所示，引物H35-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.20所示；所述扩增大肠杆菌H45血清型的PCR引物由引物H45-PF和H45-PR组成，引物H45-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.21所示，引物H45-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.22所示；所述扩增大肠杆菌H10血清型的PCR引物由引物H10-PF和H10-PR组成，引物H10-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.23所示，引物H10-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.24所示；所述扩增大肠杆菌H44血清型的PCR引物由引物H44-PF和H44-PR组成，引物H44-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.25所示，引物H44-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.26所示；所述扩增大肠杆菌H52血清型的PCR引物由引物H52-PF和H52-PR组成，引物H52-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.27所示，引物H52-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.28所示；所述扩增大肠杆菌H14血清型的PCR引物由引物H14-PF和H14-PR组成，引物H14-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.29所示，引物H14-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.30所示；所述扩增大肠杆菌H21血清型的PCR引物由引物H21-PF和H21-PR组成，引物H21-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.31所示，引物H21-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.32所示；所述扩增大肠杆菌H30血清型的PCR引物由引物H30-PF和H30-PR组成，引物H30-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.33所示，引物H30-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.34所示；所述扩增大肠杆菌H34血清型的PCR引物由引物H34-PF和H34-PR组成，引物H34-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.35所示，引物H34-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.36所示；所述扩增大肠杆菌H3血清型的PCR引物由引物H3-PF和H3-PR组成，引物H3-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.37所示，引物H3-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.38所示；所述扩增大肠杆菌H19血清型的PCR引物由引物H19-PF和H19-PR组成，引物H19-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.39所示，引物H19-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.40所示；所述扩增大肠杆菌H41血清型的PCR引物由引物H41-PF和H41-PR组成，引物H41-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.41所示，引物H41-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.42所示；所述扩增大肠杆菌H1血清型的PCR引物由引物H1-PF和H1-PR组成，引物H1-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.43所示，引物H1-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.44所示；所述扩增大肠杆菌H33血清型的PCR引物由引物H33-PF和H33-PR组成，引物H33-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.45所示，引物H33-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.46所示；所述扩增大肠杆菌H38血清型的PCR引物由引物H38-PF和H38-PR组成，引物H38-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.47所示，引物H38-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.48所示；所述扩增大肠杆菌H5血清型的PCR引物由引物H5-PF和H5-PR组成，引物H5-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.49所示，引物H5-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.50所示；所述扩增大肠杆菌H42血清型的PCR引物由引物H42-PF和H42-PR组成，引物H42-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.51所示，引物H42-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.52所示；所述扩增大肠杆菌H29血清型的PCR引物由引物H29-PF和H29-PR组成，引物H29-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.53所示，引物H29-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.54所示；所述扩增大肠杆菌H51血清型的PCR引物由引物H51-PF和H51-PR组成，引物H51-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.55所示，引物H51-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.56所示；所述扩增大肠杆菌H16血清型的PCR引物由引物H16-PF和H16-PR组成，引物H16-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.57所示，引物H16-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.58所示；所述扩增大肠杆菌H23血清型的PCR引物由引物H23-PF和H23-PR组成，引物H23-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.59所示，引物H23-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.60所示；所述扩增大肠杆菌H26血清型的PCR引物由引物H26-PF和H26-PR组成，引物H26-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.61所示，引物H26-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.62所示；所述扩增大肠杆菌H46血清型的PCR引物由引物H46-PF和H46-PR组成，引物H46-PF的核苷酸序列如SEQIDNO.63所示，引物H46-PR的核苷酸序列如SEQIDNO.64所示；所述扩增大肠杆菌H12血清型的PCR引物由引物H12-PF和H12-...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴斌，陈银，朱小娟，崔仑标，吴涛，葛以跃，赵康辰，朱凤才，周明浩，
申请(专利权)人：江苏省疾病预防控制中心，
类型：发明
国别省市：江苏,32
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