一种用于检测牛乳品中A1β-酪蛋白含量的特征肽及方法技术

本发明专利技术公开了一种用于检测牛乳品中A1β‑酪蛋含量的特征肽及方法，该特征肽的氨基酸序列为IHPFAQTQSLVYPFPGPIHNSLPQNIPPLTQTPVVVPPFLQPEVMGVSK。本发明专利技术通过筛选特征肽，获取对应的内标肽，并采用液质联用技术，实现了牛乳品中A1β‑酪蛋白的定量，该方法具有较好的线性、灵敏度、回收率和精密度。

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测牛乳品中A1β-酪蛋白含量的特征肽及方法
本专利技术涉及食品检测
，尤其涉及一种用于检测牛乳品中A1β-酪蛋白含量的特征肽及方法。
技术介绍
牛β-酪蛋白是牛奶中的主要乳蛋白之一，约占鲜奶蛋白质的15％～25％。牛β-酪蛋白具有非常优秀的消化性和低过敏性，可以防止活性蛋白的变异，亦可以促进某些营养成分(如钙、磷、必需氨基酸等)的吸收。β-酪蛋白由226个氨基酸残基组成，包含A1、A2、A3等多种变异体，其中A1、A2为最主要的变异体。A2β-酪蛋白是牛β-酪蛋白的天然原型。最初，所有家牛只含有A2类β-酪蛋白，后因基因突变出现了A1蛋白质的变体。A1β-酪蛋白和A2β-酪蛋白的结构存在差异，A1β-酪蛋白在67号位氨基酸上发生变异，由原来的羟脯氨酸P变异为组氨酸H。研究表明，A1β-酪蛋白在消化过程中可生成β-酪啡肽-7(BCM-7)，而A2β-酪蛋白则不会生成；然而BCM-7被部分研究认为可能是诱发糖尿病，影响免疫系统和心血管系统发育的因素。乳制品中高含量的A1对于婴幼儿早期的生长发育具有潜在的风险性。申请公布号为CN101339158A的专利技术专利申请文献公开本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测牛乳品中A1β‑酪蛋白含量的特征肽，其特征在于，氨基酸序列为IHPFAQTQSLVYPFPGPIHNSLPQNIPPLTQTPVVVPPFLQPEVMGVSK。

【技术特征摘要】
1.一种用于检测牛乳品中A1β-酪蛋白含量的特征肽，其特征在于，氨基酸序列为IHPFAQTQSLVYPFPGPIHNSLPQNIPPLTQTPVVVPPFLQPEVMGVSK。2.一种用于检测牛乳品中A1β-酪蛋白含量的内标肽，其特征在于，氨基酸序列为IHPFAQTQS(L*)VYPFPGPIHNS(L*)PQNIPP(L*)TQTPVVVPPF(L*)QPEVMGVSK。3.一种液质联用检测牛乳品中A1β-酪蛋白含量的试剂盒，其特征在于，包括A1β-酪蛋白特征肽和A1β-酪蛋白内标肽；所述A1β-酪蛋白特征肽的氨基酸序列为IHPFAQTQSLVYPFPGPIHNSLPQNIPPLTQTPVVVPPFLQPEVMGVSK，所述A1β-酪蛋白内标肽的氨基酸序列为IHPFAQTQS(L*)VYPFPGPIHNS(L*)PQNIPP(L*)TQTPVVVPPF(L*)QPEVMGVSK。4.如权利要求3所述的试剂盒在检测牛乳品中A1β-酪蛋白含量中的应用。5.一种液质联用检测牛乳品中A1β-酪蛋白含量的方法，其特征在于，采用方案A和方案B中的至少一种；方案A：(1)取待检测的样品，用水稀释，依次经变性处理、胰蛋白酶酶解处理、二甲基化处理后，终止反应，得到预处理后的样品溶液；(2)取如权利要求1所述特征肽的标准品，依次经变性处理、胰蛋白酶酶解处理、二甲基化处理后，得到二甲基化的内标肽溶液；(3)将所述的内标肽溶液加入至所述样品溶液中混合，得到待测样品；(4)采用高效液相色谱-质谱联用技术对所述待测样品进行检测；(5)根据检测结果，计算待测样品中如权利要求1所述的A1β-酪蛋白特征肽与其相对应的内标肽的峰面积比；(6)将所述峰面积比代入标准曲线中，计算得到待测样品中A1β-酪蛋白特征肽的浓度，最后计算得到样品中A1β...

【专利技术属性】
技术研发人员：任一平，吴頔，陈雨湉，
申请(专利权)人：浙江清华长三角研究院，
类型：发明
国别省市：浙江,33