用于治疗克罗恩病的难治性、复杂性肛周瘘的脂肪组织来源的基质干细胞制造技术

本文中提供了扩增的同种异体的脂肪组织来源的基质干细胞，其用于治疗克罗恩病的复杂性肛周瘘。

Adipose-derived mesenchymal stem cells for the treatment of refractory and complex perianal fistula in Crohn's disease

In this paper, we present an expanded allogeneic adipose tissue-derived mesenchymal stem cells for the treatment of complex perianal fistula in Crohn's disease.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗克罗恩病的难治性、复杂性肛周瘘的脂肪组织来源的基质干细胞专利
本专利技术涉及用于治疗患有克罗恩病的患者的难治性、复杂性肛周瘘的脂肪组织来源的干细胞。专利技术背景通常，瘘是通常不连接的器官或管之间的异常连接或通道。瘘可以在身体的不同部位发展。例如，瘘的类型(以其中它们发生的身体区域命名)包括肛门直肠瘘或肛瘘(fistula-in-ano)或粪瘘(在直肠或其他肛门直肠区域与皮肤表面之间)、动静脉瘘或A-V瘘(在动脉与静脉之间)、胆瘘(在胆管至皮肤表面之间，经常由胆囊手术引起)、子宫颈瘘(子宫颈中的异常开口)、颅窦瘘(在颅内空间与副鼻窦之间)、肠肠瘘(enteroenteralfistula)(在肠的两部分之间)、肠皮瘘(enterocutaneousfistula)(在肠与皮肤表面之间，即从十二指肠或空肠或回肠)、肠阴道瘘(在肠与阴道之间)、胃瘘(在胃至皮肤表面之间)、子宫腹膜瘘(在子宫与腹膜腔之间)、外淋巴瘘(在中耳与内耳间的膜之间的撕裂)、肺动静脉瘘(在肺的动脉与肺静脉之间，导致血液分流)、直肠阴道瘘(在直肠与阴道之间)、脐瘘(在脐与肠之间)、气管食管瘘(在呼吸管与饲管之间)，以及膀胱阴道瘘(在膀胱与阴道之间)。瘘的原因包括创伤，来自医学治疗和疾病的并发症。瘘的治疗根据瘘的原因和程度而改变，但通常涉及手术干预。通常使用各种手术方案，最常用的是瘘管切开术、放置挂线(穿过瘘的通道以保持其打开用于引流的线)，或者直肠内皮瓣方案(其中健康组织被拉过瘘的内侧以防止排泄物或其他物质再次感染通道)。肛门直肠瘘手术并非没有副作用，包括复发、再感染和失禁。炎症性肠病(诸如克罗恩病和溃疡性结肠炎)是导致肛门直肠瘘、肠肠瘘和肠皮瘘的主要原因。报道的克罗恩病中瘘的发生率为17％至50％。患有克罗恩病的患者的瘘的治疗仍然是一个极具挑战性的问题，因为许多这样的瘘对可用的治疗没有响应。此类瘘及其复发是一种非常令人痛苦的并发症，其会显著降低受影响患者的生活质量。最近在医学治疗(例如，用治疗)和专家手术治疗方面的改进已经减少了对复杂手术的需求。然而，许多患者并未被治愈。瘘不能痊愈很可能是由于已经受克罗恩病影响的组织质量欠佳。确实，克罗恩瘘提供在一些最不可能条件下的伤口愈合的模型系统。肛周瘘是克罗恩病的常见并发症A1，估计其在诊断后的头二十年中影响多达28％的患者A2,A3，特别是患有结肠疾病和直肠损害的那些患者A4。它们严重损害患者的生活质量并引起相当大的发病率A5,A6。大约70–80％的肛周瘘为复杂性的A3,A7，并且对这些的治疗存在挑战性，因为它们对于常规治疗策略(抗生素、免疫抑制剂)和抗肿瘤坏死因子(抗TNF)疗法来说特别难治A8-A12。此外，60–70％的患者在停止治疗后会复发A13-A17，并且仅少数患者得到长期缓解A18。医学疗法的失败或不耐受性最终会导致使用使人衰弱的手术方法，例如转移造口(divertingstoma)或直肠切除术A19。因此，存在对可替代性医学治疗的巨大的未满足的需求。间充质基质细胞(MSC)是非造血基质细胞，其能够分化成间充质组织(诸如骨、软骨、肌肉、韧带、肌腱和脂肪)。可以容易地从组织中(诸如骨髓或脂肪组织)分离MSC并在培养中快速扩增。WO-A-2006/136244描述了使用含有脂肪组织来源的基质干细胞的组合物来治疗瘘。脂肪组织来源的间充质基质细胞是一种很有前景的新的治疗方法，其可用于治疗复杂性肛周瘘，这是因为它们具有抗炎症和再生组织的潜能A20-A22。最初的概念验证于先前在同种异体的、扩增的脂肪组织来源的干细胞(eASC、Cx601)的开放标签第1/2a期的临床研究中获得，该研究在患有复杂性肛周瘘的24名克罗恩病患者中进行，其中在治疗后24周，56.3％的患者显示外部开口的完全闭合，且不存在通过MRI测量的经治疗的瘘的集合物A23。克罗恩病中的复杂性肛周瘘的治疗特别具挑战性，且仍然需要建立用于治疗克罗恩病中的复杂性肛周瘘的经临床证明的疗法。专利技术概述本专利技术涉及提供用于治疗克罗恩病中的难治性、复杂性肛周瘘的经临床证明的疗法，其基于评估eASC在患有克罗恩病和治疗难治的、引流复杂的肛周瘘的212名成人中的功效和安全性的多中心、双盲、以安慰剂为对照的研究的结果。本文中的实施例描述了首个以安慰剂为对照的第3期研究，其评估了单独的或加入至现有医学疗法的扩增的同种异体的脂肪来源的干细胞用于克罗恩病患者的治疗难治的、复杂的肛周瘘的功效和安全性。本文中报道的结果为第24周主要和次要终点。新的临床试验数据出人意料地揭示出脂肪来源的干细胞特别有效地治疗多个管道的复杂性肛周瘘。数据还显示，在瘘前处理时未接受或者接受了抗TNF和免疫抑制剂疗法的患者中观察到细胞的数量上的最大的影响。另外，出人意料地，在治疗后不久即实现了临床缓解，其中治疗组中的临床缓解的中值时间为6.7周。类似地，响应的中值时间为6.3周。在第6周、第12周和第18周，肛周疾病活动指数(PDAI)的提高明显更大。总之，数据揭示了同种异体的eASC是用于克罗恩病患者的复杂性肛周瘘的一种出人意料的有效疗法，即使是先前的药物疗法已经失败的最难治疗的、非常复杂的瘘，通过单次施用能够提供快速和持久的治疗效果。本专利技术的第一个方面提供了扩增的同种异体的脂肪组织来源的基质干细胞，其用于治疗患有克罗恩病的患者的难治性、复杂性肛周瘘的方法中的用途。本专利技术的第二个方面提供了扩增的同种异体的脂肪组织来源的基质干细胞在制备用于治疗患有克罗恩病的患者的难治性、复杂性肛周瘘的药物中的用途。本专利技术的第三个方面提供了治疗患有克罗恩病的患者、需要此类治疗的患者的难治性、复杂性肛周瘘的方法，所述方法包括向所述瘘施用扩增的同种异体的脂肪组织来源的基质干细胞的步骤。除了其他方面，本文中还公开了含有脂肪组织来源的基质干细胞的组合物。本文中描述的含有脂肪组织来源的基质干细胞的组合物具有独特的表型，且展示有利的表型同质性，因此使得它们更适合用于治疗瘘。可以将含有脂肪组织来源的基质干细胞的组合物可与溶液或其他物质一起配制以用作药物或医学装置，例如，作为缝合线或粘合剂。此外，提供了使用脂肪组织来源的基质干细胞治疗复杂性肛周瘘的新的方法，以及用于实施该方法的试剂盒。附图的简要说明图1描绘了第III期临床研究设计。Cx601，同种异体的、扩增的脂肪来源的干细胞；ICF，知情同意书；MRI，磁共振成像。图2概述了患者的处置方式。Cx601，同种异体的、扩增的脂肪来源的干细胞；ITT，意向治疗；mITT，改良的意向治疗；*深静脉血栓形成、克罗恩病恶化(Crohn’sflare)、肠梗阻、克罗恩病、肛周脓肿(n＝3)；瘘、肛部痛、肛周脓肿(n＝4)；症状未痊愈或恶化；抗生素的新疗程；肛周区域的新的手术；§需要改变疗法的克罗恩病的恶化。图3显示了主要终点：第24周时ITT群体(A组)中联合的临床和放射学缓解*。第24周时mITT群体(B组)中联合的临床和放射学缓解*。至第24周根据随机分层因子(即在随机化时接受的克罗恩病治疗)，mITT群体(C组)中联合的缓解*。Cx601，同种异体的、扩增的脂肪来源的干细胞；IS，免疫抑制剂；ITT，意向治疗；mITT，改良的意向治疗；TNF，肿瘤坏死因子本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.扩增的同种异体的脂肪组织来源的基质干细胞，其用于治疗患有克罗恩病的患者的难治性、复杂性肛周瘘的方法中的用途。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.03.14 GB 1604304.41.扩增的同种异体的脂肪组织来源的基质干细胞，其用于治疗患有克罗恩病的患者的难治性、复杂性肛周瘘的方法中的用途。2.如权利要求1所述的用于所述用途的扩增的同种异体的脂肪组织来源的基质干细胞，其中所述瘘包含以下中的一种、两种或全部三种：多个管道、两个内部开口和3个外部开口。3.如权利要求1或权利要求2所述的用于所述用途的扩增的同种异体的脂肪组织来源的基质干细胞，其中所述瘘耐受以下中的一种或多种：(i)抗生素，(ii)免疫抑制剂和(iii)抗TNF疗法。4.如前述权利要求中任一项所述的用于所述用途的扩增的同种异体的脂肪组织来源的基质干细胞，其中所述患者未接受或者接受了抗TNF疗法和免疫抑制剂疗法。5.如前述权利要求中任一项所述的用于所述用途的扩增的同种异体的脂肪组织来源的基质干细胞，其中所述患者：(a)患有非活动性或轻度活动性克罗恩病；和/或(b)腔克罗恩病。6.如前述权利要求中任一项所述的用于所述用途的扩增的同种异体的脂肪组织来源的基质干细胞，其中所述细胞经病灶内注射。7.如前述权利要求中任一项所述的用于所述用途的扩增的同种异体的脂肪组织来源的基质干细胞，其中在单次给药中施用1.2亿个细胞。8.如前述权利要求中任一项所述的用于所述用途的扩增的同种异体的脂肪组织来源的基质干细胞，其中所述疗法诱导联合缓解或临床缓解。9.如权利要求8所述的用于所述用途...

【专利技术属性】
技术研发人员：爱德华多·布拉沃，玛丽亚·帕斯夸尔，
申请(专利权)人：泰根尼克斯独资有限公司，
类型：发明
国别省市：西班牙,ES