The invention provides a preparation method of beer composite enzyme with good immobilization effect, which includes the following steps: 1) weighing and preparing composite enzyme; 2) adding biotin and avidin to composite enzyme, adding buffer solution with pH value of 4-5, stirring evenly, mixing sodium alginate solution with volume percentage of 2.0%-3.5%, stirring again. Mix evenly until no bubbles occur. 3) Slowly extrude the mixture into calcium chloride solution and fix it for 2 4 h at 18 20 C to obtain a clarifier. The binding of avidin and biotin is highly specific and affinity. Once combined, it is extremely stable. Because one avidin molecule has four biotin binding sites, it can form a stable complex similar to crystal lattice, and avidin is easy to bind with sodium alginate, biotin is easy to bind with enzymes. The binding mode of \sodium alginate-avidin-biotin-complex enzyme\ makes the immobilized material immobilized. It has better immobilization effect with complex enzymes.
【技术实现步骤摘要】
一种固定化效果良好的啤酒复合酶的制备方法
本专利技术属于酿酒
,具体涉及一种固定化效果良好的啤酒复合酶的制备方法。
技术介绍
啤酒中的蛋白质和啤酒中的多酚或醛糖结合引起的混浊、沉淀;啤酒原辅料中的果胶也会引起啤酒混浊,需要利用中性蛋白酶和菠萝蛋白酶分解蛋白质使其不能和多酚结合、利用果胶酶把果胶分解有利于固体粒子沉降,从而起到澄清啤酒的目的。现有的啤酒复合酶固定化率并不是100%;固定化后酶活力会发生变化,酶和底物之间的亲和能力减弱;啤酒复合酶澄清剂多次使用之后固定化效果下降。
技术实现思路
针对现有技术的不足,本专利技术提供了一种固定化效果良好的啤酒复合酶的制备方法,利用亲和素以及生物素解决固定化材料与复合酶之间作用力不足,提高啤酒复合酶澄清剂循环使用的效果。技术方案如下:一种固定化效果良好的啤酒复合酶的制备方法,包括以下步骤:1)称取配制复合酶;2)向复合酶加入生物素和亲和素,再加入pH值为4~5的缓冲溶液,搅拌均匀,混入体积百分比为2.0%~3.5%的海藻酸钠溶液,再次搅拌均匀至无气泡;3)将混合液缓慢挤出至氯化钙溶液中,在-18℃~-20℃的条件下固定2-4h,得到澄清剂;进一步,还可以包括步骤:4)用生理盐水冲洗澄清剂2-3次,0~4℃保藏。其中,所述氯化钙溶液的百分比浓度为1%~2%。所述复合酶包括果胶酶,还包括中性蛋白酶、菠萝蛋白酶中的至少一种。生物素是合成维生素C的必要物质,是脂肪和蛋白质正常代谢不可或缺的物质。亲和素是一种糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每个分子由4个亚基组成,可以和4个生物素分子亲密结合。亲和素与生物素的结合,虽 ...
【技术保护点】
1.一种固定化效果良好的啤酒复合酶的制备方法,其特征在于包括以下步骤:1)称取配制复合酶;2)向复合酶加入生物素和亲和素,再加入pH值为4~5的缓冲溶液,搅拌均匀,混入体积百分比为2.0%~3.5%的海藻酸钠溶液,再次搅拌均匀至无气泡;3)将混合液缓慢挤出至氯化钙溶液中,在‑18℃~‑20℃的条件下固定2‑4h,得到澄清剂。
【技术特征摘要】
1.一种固定化效果良好的啤酒复合酶的制备方法,其特征在于包括以下步骤:1)称取配制复合酶;2)向复合酶加入生物素和亲和素,再加入pH值为4~5的缓冲溶液,搅拌均匀,混入体积百分比为2.0%~3.5%的海藻酸钠溶液,再次搅拌均匀至无气泡;3)将混合液缓慢挤出至氯化钙溶液中,在-18℃~-20℃的条件下固定2-4h,得到澄清剂。2.根据权利要求1所述的固定化效...
【专利技术属性】
技术研发人员:付博,吴民富,郑琳,郑培君,鲍玲玲,李莎,黄俊达,
申请(专利权)人:佛山职业技术学院,
类型:发明
国别省市:广东,44
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