一种用于脂肪酶固定化的氨基化改性复合磁性纳米载体的制备方法技术

本发明专利技术提供了一种用于脂肪酶固定化的氨基化改性复合磁性纳米载体的制备方法，合成的具体方法是：先将磁性纳米Fe3O4‑SiO2载体进行表面的去油和活化，然后将活化的载体用硅烷偶联剂(Kh‑550)改性，改性后得产品G0，然后将G0用单体和乙二胺进行接枝反应，得改性产品G1，然后将G1用于固定化脂肪酶，计算酯化反应的酯化率。本方法改性的磁性纳米Fe3O4‑SiO2载体，在其表面固定了长的有机链臂，改善了载体在有机相中的兼容性，增加了脂肪酶与载体表面的接触面积，使其在有机相中更稳定，分散性更好，适应了对不同酶分子的固定化和在不同反应物中的应用的需求。

Preparation method of amino modified magnetic nano carrier for lipase immobilization

The present invention provides a preparation method of amino modified composite magnetic nanocarrier for lipase immobilization. The synthesis method is as follows: firstly, the magnetic nanometer Fe3O4 SiO2 carrier is deoiled and activated, then the activated carrier is modified with silane coupling agent (Kh 550), then the product G0 is obtained after modification, and then G0 is activated. The modified product G1 was obtained by grafting monomer and ethylenediamine. Then G1 was used to immobilize lipase to calculate esterification rate. The modified magnetic nano-Fe3O4_SiO2 carrier has a long organic chain arm fixed on its surface, which improves the compatibility of the carrier in organic phase, increases the contact area between lipase and carrier surface, makes it more stable and dispersible in organic phase, and adapts to the immobilization of different enzyme molecules and different reactions. The need for application in matter.

【技术实现步骤摘要】
一种用于脂肪酶固定化的氨基化改性复合磁性纳米载体的制备方法
本专利技术涉及用于脂肪酶固定化的氨基化改性复合磁性纳米载体领域，具体涉及复合磁性纳米Fe3O4-SiO2载体氨基化改性的制备方法。
技术介绍
Fe3O4纳米粒子同时具备磁性粒子和纳米粒子的双重优势，在催化剂、靶向药物载体、生物分离、核磁共振成像、磁热疗等领域具有广阔的应用前景。由于纳米效应、磁引力等作用，磁性Fe3O4纳米粒子极易团聚，导致其无法直接应用。此外，磁性Fe3O4纳米粒子在酸性条件下容易被腐蚀，也大大限制了其应用范围。因此，分散性与稳定性是磁性Fe3O4纳米粒子应用过程中必须解决的问题。纳米SiO2具有良好的分散性及抗分解能力，在磁性Fe3O4纳米粒子表面包覆一层SiO2后，能有效地降低粒子的零电点和屏蔽磁引力的相互作用使粒子具有良好的水溶性、化学稳定性及生物相容性，且SiO2表面存在丰富的羟基，可使复合粒子易于进一步功能化。但因为SiO2表面存在丰富的羟基，因而表面呈亲水性，极性强、容易吸水，且容易相互连接成立体网状机构，而这种立体网状结构分子之间的作用力很强，所以使得纳米二氧化硅粒子之间很容易产生聚团现象，不本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于脂肪酶固定化的氨基化改性复合磁性纳米载体的制备方法,其特征在于，包括以下步骤：S1：将磁性纳米Fe3O4‑SiO2载体先用0.5mol/L‑5mol/L的NaOH溶液进行超声洗涤10min‑30min去油；S2:将去油的磁性纳米Fe3O4‑SiO2载体双氧水碱性溶液进行表面的活化，使其暴露更多的羟基自由基；S3：将活化的载体用硅烷偶联剂(Kh‑550)改性，改性后得载体G0；S4：将载体G0与甲基丙烯酸和乙二胺进行接枝反应，得到氨基化改性载体G1；S5:将氨基化改性后的G1载体固定化脂肪酶，将制备的固定化脂肪酶置于0‑4℃保存备用。

【技术特征摘要】
1.一种用于脂肪酶固定化的氨基化改性复合磁性纳米载体的制备方法,其特征在于，包括以下步骤：S1：将磁性纳米Fe3O4-SiO2载体先用0.5mol/L-5mol/L的NaOH溶液进行超声洗涤10min-30min去油；S2:将去油的磁性纳米Fe3O4-SiO2载体双氧水碱性溶液进行表面的活化，使其暴露更多的羟基自由基；S3：将活化的载体用硅烷偶联剂(Kh-550)改性，改性后得载体G0；S4：将载体G0与甲基丙烯酸和乙二胺进行接枝反应，得到氨基化改性载体G1；S5:将氨基化改性后的G1载体固定化脂肪酶，将制备的固定化脂肪酶置于0-4℃保存备用。2.根据权利要求1一种用于脂肪酶固定化的氨基化改性复合磁性纳米载体的制备方法，其特征在于，磁性纳米Fe3O4-SiO2载体粒径为30nm-50nm、SiO2包裹厚度为3nm-5nm。3.根据权利要求1一种用于脂肪酶固定化的氨基化改性复合磁性纳米载体的制备方法，其特征在于，其活化时用的双氧水碱性溶液按其重量百分比包括：0.5％-5％的H2O2、2％-10％的NH3·H2O、85％-97.5％的去离子水。4.根据权利要求1一种用于脂肪酶固定化的氨基化改性复合磁性纳米载体的制备方法，其特征在于，S3步骤包括：S31：将一定量的乙醇、一定量的去离子水和一定量的Kh-550混合后，在60℃-80℃条件下搅拌10min-50min，使Kh-550充分水解；S32:在水解后的溶液中加入活化后的磁性纳米Fe3O4-SiO2载体，搅拌反应30min-2h，待其充分反应；S33：磁分离乙醇洗涤2次，50℃-80℃真空干燥10-30min，改性成功后得载体G0。5.根据权利要求4一种用于脂肪酶固定化的氨基化改性复合磁性纳米载体的制备方法，其特征在于，用硅烷偶联剂(Kh-550)改性去油与活化后的载体G0按重量百分比包括：20％-...

【专利技术属性】
技术研发人员：甘露菁，田韩，荣菡，王磊，蔡阳伦，林楚宏，
申请(专利权)人：北京理工大学珠海学院，
类型：发明
国别省市：广东,44