一种检测辅酶I中三氟乙酸的方法技术

一种检测辅酶I中三氟乙酸的方法，涉及检测技术领域。一种检测辅酶I中三氟乙酸的方法，包括：利用淋洗液将辅酶I带入离子色谱柱的保护柱中，经保护柱处理后将辅酶I输送至离子色谱柱的分析柱中，经保护柱处理后的辅酶I进入分析柱处理，然后进入抑制器处理后由电导检测器进行电导检测；淋洗液为碳酸钠和碳酸氢钠的混合溶液。该方法能有效地检测出辅酶I中所含的三氟乙酸。

A method for detecting three FLUOROACETIC acid in coenzyme I

The invention relates to a method for detecting three FLUOROACETIC acid in coenzyme I, and relates to the detection technology field. A method for the detection of trifluoroacetic acid in coenzyme I includes: introducing coenzyme I into the protective column of the ion chromatography column with eluent, transporting coenzyme I to the analytical column of the ion chromatography column after treatment by the protective column, entering the analytical column after treatment by the protective column, and then entering the inhibitor treatment by the conductivity detector. The eluent is a mixture of sodium carbonate and sodium bicarbonate. The method can effectively detect three FLUOROACETIC acid contained in coenzyme I.

【技术实现步骤摘要】
一种检测辅酶I中三氟乙酸的方法
本专利技术涉及检测
，且特别涉及一种检测辅酶I中三氟乙酸的方法。
技术介绍
三氟乙酸(TFA)属于四类有机溶剂，在临床使用存在毒性，因此必须严格控制其中药品中的残留量，目前部分学者对药品中的TFA残留做了研究报道，但对辅酶I(NAD)中的残留鲜有报道。目前，对三氟乙酸的检测通常采用气相色谱检测方法或液相色谱检测方法，但是这两种方法均不能较好地检测出三氟乙酸的残留。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种检测辅酶I中三氟乙酸的方法，该方法能有效地检测出辅酶I中所含的三氟乙酸。本专利技术解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。本专利技术提出一种检测辅酶I中三氟乙酸的方法，包括：利用淋洗液将辅酶I带入离子色谱柱的保护柱中，经保护柱处理后将辅酶I输送至离子色谱柱的分析柱中，经保护柱处理后的辅酶I进入分析柱处理，然后进入抑制器处理后由电导检测器进行电导检测；淋洗液为碳酸钠和碳酸氢钠的混合溶液。进一步地，在本专利技术的一种实施例中：混合溶液的体积浓度为1.8～2.2％。进一步地，在本专利技术的一种实施例中：混合溶液的体积浓度为2％。进一步地，在本专利技术的一种实施例中：碳酸钠和碳酸氢钠的体积比为6-10:3。进一步地，在本专利技术的一种实施例中：碳酸钠和碳酸氢钠的体积比为7-9:3。进一步地，在本专利技术的一种实施例中：淋洗液的进料速度为0.8-1.2mL/min。进一步地，在本专利技术的一种实施例中：淋洗液的进料速度为1mL/min。进一步地，在本专利技术的一种实施例中：先将辅酶I与超纯水混合稀释，将稀释后的辅酶I过滤膜及RP柱，然后由淋洗液将辅酶I带入离子色谱柱的保护柱中。进一步地，在本专利技术的一种实施例中：滤膜的孔径为0.2-0.25mm。本专利技术实施例的有益效果是：本公开的一种检测辅酶I中三氟乙酸的方法，利用弱碱性的碳酸钠和碳酸氢钠配置而成的淋洗液，抑制器可降低流动相的背景，，辅酶I和淋洗液经保护柱处理后进入分析柱内，利用电导检测器进行电导检测，从而提高辅酶I中三氟乙酸的检测灵敏度。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。图1为对照组测试得到的色谱图；图2为实施例1测试得到的色谱图；图3为实施例2测试得到的色谱图；图4为实施例3测试得到的色谱图；图5为实施例4测试得到的色谱图；图6为对比例1中样品溶液测试得到的色谱图；图7为对比例1中空白溶剂测试得到的色谱图；图8为对比例2中样品溶液测试得到的色谱图；图9为对比例2中空白溶剂测试得到的色谱图。具体实施方式为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。离子色谱仪的型号为ICS600。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。下面对本专利技术实施例的一种检测辅酶I中三氟乙酸的方法进行具体说明。辅酶I(NAD)，化学名为烟酰胺腺嘌呤二核甘酸或二磷酸烟苷。辅酶I是人体氧化还原反应中重要的辅酶，出现在细胞很多代谢反应中。作为生物催化反应必不可少的辅酶，参与上千种生理反应，如细胞三羧酸循环(TCA)、脂肪β氧化等，在糖、脂肪、氨基酸等营养物质的代谢利用过程中具有重要意义。三氟乙酸(TFA)是一种强羧酸，pKa＝0.23，能够刺激人体组织和皮肤。虽有轻微的毒性，但是在不流动的地表水中富集则会影响农业和水生系统，并且TFA经历微生物降解产生温室气体CHF3，达到一定浓度后，会对人体产生危害。辅酶I中残留三氟乙酸会对人体造成一定伤害。因此，有必要对检测辅酶I中是否残留有三氟乙酸。目前，对三氟乙酸的检测通常采用气相色谱检测方法或液相色谱检测方法，但是这两种方法均不能较好地检测出三氟乙酸的残留。基于此，本申请提供一种检测辅酶I中三氟乙酸的方法，包括：利用淋洗液将辅酶I带入离子色谱柱的保护柱中，经保护柱处理后将辅酶I输送至离子色谱柱的分析柱中，经保护柱处理后的辅酶I进入分析柱处理，然后进入抑制器处理后由电导检测器进行电导检测；淋洗液为碳酸钠和碳酸氢钠的混合溶液。本公开的一种检测辅酶I中三氟乙酸的方法，利用弱碱性的碳酸钠和碳酸氢钠配置而成的淋洗液，抑制器可降低流动相的背景，辅酶I和淋洗液经保护柱处理后进入分析柱内，利用电导检测器进行电导检测，从而提高辅酶I中三氟乙酸的检测灵敏度。需要说明的是，由于气相色谱检测方法中所用的FID检测器(氢离子火焰检测器)是检测碳氢化合物的，而三氟乙酸仅含有两个C，一个H，测残留量根本检测不出来。液相色谱检测方法中，三氟乙酸检测限比较高，残留量很小的情况下达不到其检测限，检测不出来。因而，在本实施方式中，所用的电导检测器为电子俘获检测器(ECD)。进一步地，在一些实施方式中，混合溶液的体积浓度为1.8～2.2％。在一些实施方式中，混合溶液的体积浓度为2％。进一步地，在一些实施方式中，碳酸钠和碳酸氢钠的体积比为6-10:3。在一些实施方式中，碳酸钠和碳酸氢钠的体积比为7-9:3。该比例范围的碳酸钠和碳酸氢钠能使得混合溶液处于合适的碱性范围，有利于降低淋洗液本身的电导。进一步地，在一些实施方式中，淋洗液的进料速度为0.8-1.2mL/min。在一些实施方式中，淋洗液的进料速度为1mL/min。进一步地，在一些实施方式中，先将辅酶I与超纯水混合稀释，将稀释后的辅酶I过滤膜及RP柱，然后由淋洗液将辅酶I带入离子色谱柱的保护柱中。由于辅酶I中可能含有强保留组分或者其他弱极性化合物时，将辅酶I稀释后经滤膜和RP柱可有效去除这些物质，可以降低基体对测定的影响。在一些实施方式中，滤膜的孔径为0.2-0.25mm。以下结合实施例对本专利技术的特征和性能作进一步的详细描述。实施例1吸取1mL的样品辅酶I置于50mL的量瓶中，加超纯水将其稀释至50mL得到初品溶液，吸取1mL初品溶液置于50mL量瓶中，加超纯水稀释至50mL得到样品溶液，将样品溶液过孔径为0.22mm的滤膜后再注入RP柱。离子色谱条件：离子色谱仪的型号为ICS600，淋洗液为体积比为7：3的碳酸钠和碳酸氢钠的混合溶液，混合溶液的体积浓度为2％；淋洗液的流速为1mL/min；分析柱柱温30℃。按照上述离子色谱条件进行测试：利用淋洗液将辅酶I带入离子色谱柱的保护柱中，经保护柱处理后将辅酶I输送至离子色谱柱的分析柱中，经保护柱处理后的辅酶I进入分析柱处理，然后进入抑制器处理后由电导检测器进行电导检测。实施例2吸取5mL的样品辅酶I过孔径为0.22mm的滤膜后再注入RP柱。离子色谱条件：离子色谱仪的型号为ICS600，淋洗液为体积比为3：1的碳酸钠和碳酸氢钠的混合溶液，混合溶液的体积浓度为1.8％；淋洗液的流速为1.2mL/min；分析柱柱温30℃。按照上述离子色谱条件进行测试：利用淋洗液将辅酶I带入离子色谱柱的保护柱中，经保护柱处理后将辅酶I输送至离子色谱柱的分析柱中，经保护柱处理后的辅酶I进入分析柱处理，然后进入抑制器处理后由电导检测器进行电导检测。实本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测辅酶I中三氟乙酸的方法，其特征在于，包括：利用淋洗液将辅酶I带入离子色谱柱的保护柱中，经所述保护柱处理后将所述辅酶I输送至离子色谱柱的分析柱中，经保护柱处理后的辅酶I进入分析柱处理，然后进入抑制器处理后由电导检测器进行电导检测；淋洗液为碳酸钠和碳酸氢钠的混合溶液。

【技术特征摘要】
2018.04.10 CN 20181031595011.一种检测辅酶I中三氟乙酸的方法，其特征在于，包括：利用淋洗液将辅酶I带入离子色谱柱的保护柱中，经所述保护柱处理后将所述辅酶I输送至离子色谱柱的分析柱中，经保护柱处理后的辅酶I进入分析柱处理，然后进入抑制器处理后由电导检测器进行电导检测；淋洗液为碳酸钠和碳酸氢钠的混合溶液。2.根据权利要求1所述的检测辅酶I中三氟乙酸的方法，其特征在于，所述混合溶液的体积浓度为1.8～2.2％。3.根据权利要求2所述的检测辅酶I中三氟乙酸的方法，其特征在于，所述混合溶液的体积浓度为2％。4.根据权利要求2所述的检测辅酶I中三氟乙酸的方法，其特征在于，所述碳酸钠和所...

【专利技术属性】
技术研发人员：金永红，郎巧洁，贾和平，
申请(专利权)人：开封康诺药业有限公司，
类型：发明
国别省市：河南,41